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    陰道病學(xué)婦女宮頸HPV感染及基因型分布特征

    2016-07-24 17:35:02林雄輝周長邵陳麗麗
    中國生化藥物雜志 2016年11期
    關(guān)鍵詞:危型亞型感染率

    林雄輝,周長邵,陳麗麗

    (解放軍第九五醫(yī)院 檢驗(yàn)科,福建 莆田 351100)

    陰道病學(xué)婦女宮頸HPV感染及基因型分布特征

    林雄輝Δ,周長邵,陳麗麗

    (解放軍第九五醫(yī)院 檢驗(yàn)科,福建 莆田 351100)

    目的 探討陰道病學(xué)婦女宮頸人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染及基因型分布特征。方法 采用PCR-反向點(diǎn)雜交法對(duì)解放軍第九五醫(yī)院816例宮頸病變婦女宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行HPV檢測(cè),并進(jìn)行23種HPV基因分型鑒別。結(jié)果 本組816例接受HPV分型檢測(cè)中,HPV陽性532例(65.20%),其中371例(69.74%)高危型HPV(HR-HPV)感染,161例(30.26%)低危型HPV(LR-HPV)感染。45歲以下人群HPV感染率較高;宮頸癌患者HPV感染率為97.10%高于CINⅡ-Ⅲ患者(80.54%)、CINⅠ患者(41.55%)、宮頸炎患者(17.20%),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);HPV感染亞型排列前5位分別為HPV16、58、18、11、56型。單一感染幾率為79.70%,重復(fù)感染率為20.30%;單一感染中以HR-HPV感染率為主,多重感染以雙重感染為主。結(jié)論 44歲以下女性HPV感染的高危人群,HPV感染以16、58、18、11、56為主,宮頸癌及癌前病變患者HPV感染率較高,重視HPV感染篩查對(duì)防治宮頸癌有積極意義。

    人乳頭瘤病毒;宮頸病變;基因分型

    人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一種DNA病毒,目前已鑒定出200多種HPV感染亞型,其中50多種與人類生殖道感染有關(guān)[1]。不同類型的HPV致病類型也存在差異,其中LR-HPV感染(HPV6、11、40等)可致宮頸良性病變,HR-HPV感染(HPV16、18、31等)會(huì)增加宮頸癌和癌前病變發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[2]。研究報(bào)道,HR-HPV持續(xù)感染是宮頸癌及癌前病變發(fā)生的重要影響因素轉(zhuǎn)移[3]。因此,重視對(duì)有性生活女性的HPV感染篩查尤為重要,便于對(duì)高危人群進(jìn)行早期預(yù)防、早期治療。本研究通過收集宮頸脫落細(xì)胞并進(jìn)行23種HPV感染亞型檢測(cè),了解宮頸病變婦女HPV感染情況及亞型分布,對(duì)宮頸疾病和宮頸癌防治有重要指導(dǎo)意義,現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 病例選取2014年12月~2015年8月解放軍第九五醫(yī)院門診及住院的816例宮頸疾病婦女作為研究對(duì)象,均有性生活,且自愿接受HPV檢測(cè)。年齡19~73歲,平均年齡(43.29±8.58)歲。宮頸病變類型:343例宮頸炎,219例CINⅠ期,185例CINⅡ-Ⅲ期,69例宮頸癌。由婦科醫(yī)師講解本次調(diào)查研究的目的、篩查流程等,告知研究期間可隨時(shí)退出該研究,本研究由醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn),研究對(duì)象均自愿本研究病簽署知情同意書。

    1.2 方法

    1.2.1 宮頸細(xì)胞采集:婦科醫(yī)生于研究對(duì)象非月經(jīng)期采集宮頸脫落細(xì)胞,采集前禁性生活、盆浴、陰道檢查。充分暴露宮頸,取無菌棉球拭凈陰道及宮頸口分泌物,將專用取樣刷置入宮頸內(nèi)口,毛刷基底面與宮頸外口齊平,順指針旋轉(zhuǎn)3~5圈收集宮頸口及頸管脫落上皮細(xì)胞,將刷頭放入洗脫管中,并旋轉(zhuǎn)管蓋,做好標(biāo)記。

    1.2.2 HPV分型檢測(cè):主要儀器包括5415R小型高速離心機(jī)(德國Eppendorf),9600型PCR儀(HEMA),FYY-3型分子雜交儀。取保存液1 mL放入試管中,13 000 r/min離心10 min,舍棄上清液保留沉淀物,如細(xì)胞沉淀為贅生物或疣體組織物,可用加樣槍頭將其刺破、搗碎。沉淀物中加入DNA提取液5 μL,充分混勻,100 ℃水浴環(huán)境下裂解10 min,13 000 r/min離心10 min,取上清液作PCR反應(yīng)。利用HPV通用引物(由亞能生物技術(shù)公司合成)擴(kuò)增,采用PCR-反向點(diǎn)雜交法檢測(cè)HPV亞型。本次檢測(cè)HPV基因亞型包括:17種高危型HPV(HR-HPV)感染:16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83;6種低危型HPV(LR-HPV)感染:6、11、42、43、44、81。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0中處理數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)資料采用(%)表示,比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 HPV感染情況 本組816例接受HPV分型檢測(cè)中,HPV陽性532例,陽性率65.20%;其中371例高危型HPV(HR-HPV)感染,感染率為69.74%,161例低危型HPV(LR-HPV)感染,感染率為30.26%,HR-HPV感染率高于LR-HPV感染率。44歲以下人群HPV感染率較高。

    2.2 不同年齡HPV感染分布 35≤年齡<40出現(xiàn)HPV感染率最高,占86.60%,其次為40≤年齡<45,占71.96%,HPV感染年齡分布差異有顯著性(P<0.05)。見表1。

    表1 不同年齡HPV感染分布Tab.1 Distribution of HPV infection in different ages

    2.3 不同宮頸疾病HPV感染情況 宮頸癌患者HPV感染率明顯最高,占97.10%,其次為CINⅡ-Ⅲ患者,占80.54%,宮頸炎最低,為17.20%,差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

    表2 不同宮頸疾病HPV感染情況Tab.2 HPV infection in different cervical diseases

    2.4 532例HPV感染亞型分布 本組研究中,HPV感染亞型排列前五位分別為HPV16(12.22%)、HPV58(11.65%)、HPV18(11.09%)、HPV11(10.34%)、HPV56(7.89%)。見表3。

    表3 532例HPV感染亞型分布Tab.3 Distribution of 532 HPV subtypes

    2.5 HPV感染亞型組合分布 單一感染幾率為79.70%,重復(fù)感染率20.30%;單一感染中,HR-HPV感染率為61.84%,LR-HPV感染率為17.86%;多重感染中,雙重感染率為15.23%,三重感染3.95%、四重感染0.75%及其他0.38%。見表4。

    表4 HPV感染亞型組合分布Tab.4 HPV infection subtype combination distribution

    3 討論

    宮頸癌是常見的女性惡性腫瘤之一,發(fā)病率僅次于乳腺癌。近年來,隨著宮頸癌篩查的工作普遍開展,宮頸癌早期診斷準(zhǔn)確人數(shù)明顯增加,有利于臨床早期干預(yù)治療,降低疾病致死率。然而,對(duì)各國宮頸癌發(fā)病資料進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)發(fā)展中國家宮頸癌發(fā)病率仍高于發(fā)達(dá)國家。目前,宮頸癌的發(fā)生機(jī)制尚不明確。研究認(rèn)為,持續(xù)HR-HPV是宮頸癌和癌前病變的重要原因之一[3]。賈政軍等[4]研究發(fā)現(xiàn),幾乎所有的宮頸癌患者均伴隨HPV感染。

    HPV感染屬于一種傳播性疾病,70%~80%左右有性生活的婦女會(huì)伴隨HPV感染[5]。本組研究中,44歲以下人群出現(xiàn)HPV感染的幾率相對(duì)較高,與張艷瓊等[6]報(bào)道研究結(jié)果相符,與該年齡段女性性生活活躍有關(guān)。隨著年齡的增長,女性HPV感染率有所下降,但該年齡段卵巢功能下降,機(jī)體免疫力下降,對(duì)HPV的清除能力會(huì)隨之減弱,可能增加宮頸癌及癌前病變的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。因此,臨床積極開展宮頸癌相關(guān)知識(shí)宣傳,定期進(jìn)行HPV感染篩查,尤其是44歲以下人群,預(yù)防宮頸病變。

    目前,已鑒定出的200多種HPV亞型中,約20種由生殖道分泌的HPV與腫瘤發(fā)生有關(guān)。根據(jù)其致病能力可分為HR-HPV、LR-HPV,其中HR-HPV持續(xù)感染會(huì)增加宮頸癌及癌前病變發(fā)生風(fēng)險(xiǎn),LR-HPV感染可引起生殖道良性病變。本組研究中,宮頸癌患者HPV感染率明顯最高,占97.10%,其次為CINⅡ-Ⅲ患者,占80.54%。因此,臨床重視對(duì)HPV的篩查對(duì)預(yù)防宮頸癌及癌前病變中具有積極意義。本組研究中,HPV感染占前5位的分別為HPV16、58、18、11、56型,與Clifford等[7]報(bào)道HPV16、HPV18感染較為常見,其次為45、31、33的研究結(jié)果部分一致,可能與地區(qū)、研究對(duì)象的年齡有關(guān)。趙蘇萍等[8]分析黔南州水族宮頸疾病婦女人HPV亞型分布,發(fā)現(xiàn)最為常見的類型為HPV16,其次為HPV33、58、52、38型。季月霞等[9]報(bào)道中,HR-HPV感染以HPV18作為常見,其次為HPV16;LR-HPV感染以HPV6、11型較為常見??偨Y(jié)既往文獻(xiàn),發(fā)現(xiàn)HPV16、HPV18是HR-HPV感染較為常見的類型[10]。目前,臨床針對(duì)HPV16型和18型的二價(jià)疫苗和針對(duì)HPV16、18、11、6型的四價(jià)疫苗已經(jīng)上市,在預(yù)防宮頸癌病變有積極作用[11],但還用加大對(duì)HPV33、58、52型等疫苗的研究。

    本組研究中,單一感染幾率為79.70%,重復(fù)感染率為20.30%,單一感染常見;單一感染中以HR-HPV較為常見,多重感染中以雙重感染感染較為常見,與智艷芳等[12]研究結(jié)果一致。目前關(guān)于多重HPV感染是否會(huì)增加宮頸病變的風(fēng)險(xiǎn)尚存在爭(zhēng)議,Stenmark等[3]認(rèn)為,對(duì)多重HPV感染不會(huì)增加宮頸癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn);但嚴(yán)粉琴等[13]研究報(bào)道,多種HPV感染會(huì)增加病毒致病程度。因此,臨床需擴(kuò)大研究對(duì)象,了解多重HPV感染對(duì)宮頸癌及癌前病變發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的影響,為臨床防治宮頸癌提供客觀資料。

    綜上所述,宮頸癌屬于一種可預(yù)防性疾病,HR-HPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的高危影響因素。HPV感染亞型分布具有地域性的特點(diǎn),各地區(qū)應(yīng)對(duì)女性HPV感染狀況和亞型分布進(jìn)行分析,為臨床防治宮頸癌及癌前病變提供流行病學(xué)資料,降低宮頸癌發(fā)生率。

    [1] 呂倩靈,張玲,林偉平,等.高危型人乳頭狀瘤病毒及病毒載量對(duì)宮頸癌癌前病變的相關(guān)性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(4):804-805,856.

    [2] 何禮霞,何俊勇,蒲建璐,等.人群對(duì)于HPV感染的認(rèn)知現(xiàn)狀[J].西部醫(yī)學(xué),2012,24(8):1643-1644.

    [3] Stenmark MH,McHugh JB,Schipper M, et al.Nonendemic HPV-positive nasopharyngeal carcinoma: Association with poor prognosis[J]. Int J Radiat Oncol Biol Phys,2014,88(3):580-588.

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    [5] 唐嗣信,李莎.瀏陽地區(qū)女性 HPV感染狀況及其基因類型分析[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2014,31(6):1219-1221.

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    [7] Clifford GM,Smith JS,Plummer m, et al.Human papillomavirus types in invasive cervical cancer worldwide a meta -analysis[J].British J Cancer,2003,88(1):63-73.

    [8] 趙蘇萍,韋艷萍,魏萍,等.黔南州水族宮頸疾病婦女人乳頭狀瘤病毒感染現(xiàn)狀及相關(guān)因素分析[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2011,38(22):4589-4591,4595.

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    [10] 陳岳青,王一鳳,陳文學(xué),等.人乳頭瘤病毒感染亞型與宮頸病變的關(guān)系[J].實(shí)用癌癥雜志,2014,29(12):1540-1543.

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    (編校:席大力 王儼儼)

    Cervical HPV infection and genotype distribution characteristics in women with vaginal disease

    LIN Xiong-huiΔ, ZHOU Chang-shao, CHEN Li-li

    (Department of Inspection, PLA No.95 Hospital, Putian 351100, China)

    ObjectiveTo study cervical human papillomavirus (HPV) infection and genotype distribution characteristics in patients with vaginal disease.MethodsThe PCR dot blot was used to carry out HPV detection of cervical exfoliated cells in 816 women with cervical lesions in the hospital, and 23 kinds of HPV genotypes were identified.ResultsAmong the 816 cases receiving HPV type detection, HPV of 532 cases (65.20%) was positive, including 371 cases (69.74%) with low-risk HPV (HR-HPV) infection, 161 cases (30.26%) with low-risk HPV infection (LR-HPV) (P< 0.05). The HPV infection rate below 45 years old was relatively higher. The HPV infection rate in patients with cervical cancer (97.10%) was higher than that in patients with cervical intraepithelial neoplasia (CIN) II - III (80.54%), patients with CIN Ⅰ(41.55%) and patients with cervicitis (17.20%) (P< 0.05). The top five types of HPV infection were HPV16, 58, 18, 11 and 56 type, respectively. The single infection rate (79.70%) was higher than multiple infection rate (20.30%) (P< 0.05); HR-HPV infection was the main infection in single infection, and double infection was the main infection in multiple infection.ConclusionBelow 45 years old women are the high-risk groups of HPV infection. 16, 58, 18, 11 and 56 are the main types of HPV infection. The infection rates of patients with cervical cancer and precancerous lesions are relatively higher. Paying attention to the screening of HPV infection has positive significance in the prevention and treatment of cervical cancer.

    human papillomavirus; cervical lesions; genotyping

    10.3969/j.issn.1005-1678.2016.11.055

    林雄輝,通信作者,男,本科,檢驗(yàn)師,研究方向:醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),E-mail:605990696@qq.com。

    R737.33

    A

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