妊娠相關(guān)血漿蛋白A及CRP在急性冠狀動脈綜合征進展中的診斷效能評價

曾昭偉，常艷敏

(天津市南開醫(yī)院 檢驗科，天津300100)

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妊娠相關(guān)血漿蛋白A及CRP在急性冠狀動脈綜合征進展中的診斷效能評價

曾昭偉，常艷敏

(天津市南開醫(yī)院 檢驗科，天津300100)

摘要：目的評價妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)與CRP在急性冠狀動脈綜合征(ACS)患者中的診斷效能。方法回顧性分析96例ACS患者、30例穩(wěn)定性心絞痛及62例正常對照者的PAPP-A及CRP濃度指標(biāo)。用化學(xué)發(fā)光法測定血清PAPP-A，用散射光比濁法測定血清CRP含量。比較ACS組和正常對照組間PAPP-A、CRP指標(biāo)的濃度差異，分析各指標(biāo)在ROC曲線下的面積、特異性及敏感性。結(jié)果PAPP-A及CRP在AMI組、UAP組之間差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，在AMI、UAP組與SAP、正常對照組之間差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，在SAP及正常對照組間差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。PAPP-A與CRP正相關(guān)。檢測ACS組，ROC曲線下的面積：PAPP-A >CRP，面積分別為：0.808、0.767。PAPP-A、CRP診斷ACS臨界值分別為：15.56 mIU/L、2.80 mg/L。結(jié)論通過ROC曲線評價，診斷ACS時，作為單一檢測指標(biāo)時，PAPP-A比CRP更優(yōu)。

關(guān)鍵詞：ROC曲線；急性冠狀動脈綜合征；妊娠相關(guān)血漿蛋白A；C反應(yīng)蛋白

(ChinJLabDiagn,2016,20:0933)

急性冠狀動脈綜合征(acute coronary syndrome,ACS) 是我國常見的一種心血管系統(tǒng)疾病，約占急診患者的20%，其惡性轉(zhuǎn)歸甚至死亡的危險性極大，患者主要表現(xiàn)為不穩(wěn)定性心絞痛，包括ST段抬高型心肌梗死及非ST段抬高型心肌梗死[1]，發(fā)病急、危險性大。目前的檢測手段如心電圖、心肌酶譜等出現(xiàn)明顯變化時間點較晚，不利于早期診斷，ACS臨床癥狀又常常不典型，所以上述診斷手段難言滿意，尋求一種早期靈敏的診斷指標(biāo)成為當(dāng)務(wù)之急[2]。

研究表明[3]，妊娠相關(guān)血漿蛋白A(pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A)其在ACS患者血管斑塊中高表達，其作為一種潛在的特異標(biāo)志物值得深入研究。C反應(yīng)蛋白(CRP)是一種重要的急性時相反應(yīng)蛋白，與冠狀動脈的急性損傷、病變惡化發(fā)展有著密切的聯(lián)系，往往被用于心血管疾病如ACS的檢測指標(biāo)[4]。

本研究旨在觀察急性冠狀動脈綜合征患者血清中PAPP-A及CRP含量變化，用受試者工作特征(ROC)曲線評價利用PAPP-A及CRP預(yù)測ACS的臨床價值，確定最佳臨界值并評價兩者對ACS早期診斷的意義，為ACS早期診斷尋找更優(yōu)指標(biāo)。

1對象與方法

1.1對象隨機選取自天津市南開醫(yī)院心內(nèi)科2013年12月-2014年03月期間入院治療急性冠狀動脈綜合征患者96例，診斷均符合美國心臟病學(xué)會(ACC)和美國心臟病協(xié)會(AHH)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者經(jīng)冠狀動脈造影及病理學(xué)改變?yōu)榻饦?biāo)準(zhǔn)證實，其中不穩(wěn)定型心絞痛41例，急性心肌梗死55例，男67例，女29例，平均年齡(52.1±10.8)歲。另入選穩(wěn)定型心絞痛30例，其中男19例，女11例，平均年齡(50.2±9.6)歲。經(jīng)住院行冠狀動脈造影未發(fā)現(xiàn)任何斑塊或狹窄的健康體檢者為對照組，62例，其中男39例，女23例，平均年齡(56.2±10.2)歲。所有患者從發(fā)生ACS至入院30 min 內(nèi)完成常規(guī)12導(dǎo)聯(lián)心電圖檢查，并抽取靜脈血檢測生化、血脂、凝血指標(biāo)、心肌酶( CK、CK-MB) 和cTnT等指標(biāo)。搜集所有患者的年齡、性別、體重指數(shù)、吸煙史、高脂血癥等一般臨床資料。

納入標(biāo)準(zhǔn)：AMI、UA、穩(wěn)定型心絞痛(stable anginapectoris，SAP)的診斷以ACC/AHA2004年冠心病有關(guān)指南命名和診斷標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：所有研究對象均排除妊娠、高血壓、嚴(yán)重肝腎疾病、嚴(yán)重心力衰竭等。

1.2方法

1.2.1血漿標(biāo)本的收集所有研究對象均于發(fā)病12h內(nèi)采集肘靜脈血4 ml，肝素抗凝，4 000 r/min離心5 min取血漿，檢測或-40℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2基于微球標(biāo)記的PAPP-A檢測

①抗體標(biāo)記受體微球帶有濾膜的離心管中加入0.1 mg抗體，9 000 rpm離心8 min，緩沖液洗滌，重復(fù)6次，在抗體液中加入0.5 mg受體微球，10 μl的25 mg/ml NaBH3CN、1.5 μl 10%Tween-20，加PBS至100 μl，37℃振蕩48 h，受體微球濃度2 mg/ml。

②生物素標(biāo)記抗體離心管中加入標(biāo)記抗體1 mg，9 000 rpm離心8 min，用緩沖液重復(fù)洗滌6次，在50 μl抗體溶液中加入5 μl濃度22 mg/ml生物素，室溫振蕩20 h，用帶有濾膜的離心管去除剩余生物素。

③標(biāo)本檢測在96孔板中加入25 μl生物素化抗體(1∶2000)，25 μl受體球(1∶100)，25 μl血清樣本，37℃孵育30 min。避光條件下加入175 μl供體微球，于37℃孵育10 min，以定值血為質(zhì)控，制備標(biāo)準(zhǔn)品并測定信號值。

1.2.3CRP檢測CRP 含量測定采用美國Beckman全自動免疫特種蛋白分析儀，利用散射光比濁法測定。

2結(jié)果

2.1一般臨床資料比較ACS組與SAP組比較，P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表1)。

表1　一般臨床資料的比較±s)

注：性別、吸煙史等指標(biāo)及表格中指標(biāo)，均P>0.05。

2.2各組別PAPP-A及CRP檢測對比PAPP-A及CRP檢測在ACS與SAP、對照組濃度差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，SAP與對照組差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，圖1)，且在ACS標(biāo)本組PAPP-A及CRP的相關(guān)系數(shù)r=0.9754，P<0.05，兩者正相關(guān)，相關(guān)性良好。

注：A為PAPP-A濃度對比圖，B為CRP濃度對比圖。其中，*P<0.05，#P>0.05。

2.3ROC評價繪制ROC圖比較其臨床診斷意義，分析結(jié)果顯示：在針對ACS檢測中，PAPP-AROC曲線下面積為0.808，而CRP為0.767，PAPP-A、CRP診斷ACS臨界值分別為15.56mIU/L、2.80mg/L。PAPP-A檢測比CRP臨床價值高(表2、圖2)。

表2　PAPP-A及CRP檢測對ACS臨床診斷價值的性能評價

圖2　PAPP-A 和CRP檢測的ROC曲線分析

3討論

ACS發(fā)病率高，其發(fā)病轉(zhuǎn)歸主要為生成的動脈硬化斑塊破裂[5]，進而生成血栓，引起相關(guān)器官組織的梗死，危險性極大。隨著社會的發(fā)展及老齡化社會的到來，導(dǎo)致ACS的危險因素越來越多，比如環(huán)境、遺傳及個體差異等，老年人口的相對增多使得ACS發(fā)病率必然有增無減。早期發(fā)現(xiàn)和早期治療是延長患者生存期、降低死亡率的關(guān)鍵。

PAPP-A是一種基質(zhì)金屬蛋白酶，主要由胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞合成、分泌。研究表明，其在ACS患者中濃度也有升高。最初發(fā)現(xiàn)PAPP-A在孕婦胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞合成并分泌，后來研究表明PAPP-A在心血管斑塊破裂中起到分解纖維帽胞外基質(zhì)的作用，其表達增高[6]。CRP是一種重要的急性時相反應(yīng)蛋白，細(xì)胞因子如白介素誘導(dǎo)大量CRP的產(chǎn)生是ACS發(fā)病機制之一[7]。CRP水平的升高與心血管危險性呈正相關(guān),并被認(rèn)為是致心血管疾病的獨立危險因子[8]。

本研究隨機選擇標(biāo)本，以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)分為三組：ACS、SAP、正常對照組。各組基本臨床資料差別均無統(tǒng)計學(xué)意義。利用基于微球的化學(xué)發(fā)光檢測體系檢測PAPP-A與CRP檢測結(jié)果對比。結(jié)果表明，PAPP-A及CRP在ACS組高于SAP及正常對照組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義，PAPP-A與CRP有正相關(guān)，相關(guān)性良好，回歸方程為：YCRP=5.294 7+2.348 6XPAPP-A，(r=0.9754，P<0.05)。所以兩者均可以作為指標(biāo)之一對ACS進行檢測[9]。

ROC曲線能評價一個和多個的效能并通過曲線下面積(AUC)直觀表示[10],便于不同方法間的比較。面積在0.5以下時無診斷價值，面積在0.5-0.7時有較低的準(zhǔn)確性，面積在0.7-0.9 時有較高的準(zhǔn)確性，面積在0.9以上時準(zhǔn)確性最高。本研究發(fā)現(xiàn)，PAPP-A與CRP的AUC均大于0.7，分別為0.808、0.767。所以，PAPP-A在ACS診斷方面價值高于CRP。

總之，PAPP-A與CRP在檢測ACS方面均有臨床價值，但是PAPP-A的診斷效能更佳。我們后續(xù)可以擴大標(biāo)本量，利用PAPP-A與其他高效新穎的檢測指標(biāo)聯(lián)合建立針對ACS的檢測體系，為優(yōu)化ACS的早期診斷打下堅實基礎(chǔ)。

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[10]ZakiME,El-BassyouniHT,El-GammalM,etal.Indicatorsofthemetabolicsyndromeinobeseadolescents[J].ArchMedSci,2015,11(1):92.

基金項目：天津市衛(wèi)生局科技基金(2013KY24)

文章編號：1007-4287(2016)06-0933-04

中圖分類號：R543.3

文獻標(biāo)識碼：A

(收稿日期：2015-09-14)

Evaluation of diagnostic efficacy of pregnancy associated plasma protein A and CRP in patients with progressive acute coronary syndrome

ZENGZhao-wei，CHANGYan-min.

(DepartmentofClinicalLaboratory,TianjinNankaiHospital,Tianjin300100,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the diagnostic efficacy of pregnancy associated plasma protein A (PAPP-A) and CRP in patients with acute coronary syndrome (ACS).MethodsConcentrations of PAPP-A and CRP in 96 patients with ACS,30 ones with stable angina pectoris and 62 cases of normal controls were retrospectively analyzed.Serum PAPP-A and CRP in ACS and the control group were detected with chemiluminescent method and light scattering turbidimetry respectively,the concentrations difference between the ACS group and the normal control group were compared.The area under the ROC curve,the specificity and sensitivity of the concentrations were all analyzed.ResultsThe differences between PAPP-A and CRP in AMI group and UAP group were not statistically significant (P>0.05),however,there were statistical differences between AMI,SAP groups and UAP,control groups (P<0.05),no statistical difference was found between SAP and normal control groups (P>0.05).With the progression of ACS,the concentrations of PAPP-A and CRP was significant difference (P<0.05),PAPP-A concentration was positively correlated with CRP.In ACS group,the area under the ROC curve was PAPP-A>CRP,they were 0.808 and 0.767 respectively.Cut-off values of PAPP-A and CRP were 15.56mIU/L and 2.80 mg/L.Conclusionwith the ROC curve evaluation,as the detection index in ACS,PAPP-A was better than CRP.

Key words:ROC curve;acute coronary syndrome;pregnancy associated plasma protein A;C reactive protein