肺結(jié)核患者外周血輔助性T細(xì)胞亞群相關(guān)細(xì)胞因子臨床意義初探

李曉紅,佟冬冬

(1.長(zhǎng)春市傳染病醫(yī)院,吉林 長(zhǎng)春130123；2.吉林大學(xué)第一附屬醫(yī)院,吉林 長(zhǎng)春130021)

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肺結(jié)核患者外周血輔助性T細(xì)胞亞群相關(guān)細(xì)胞因子臨床意義初探

李曉紅1,佟冬冬2*

(1.長(zhǎng)春市傳染病醫(yī)院,吉林 長(zhǎng)春130123；2.吉林大學(xué)第一附屬醫(yī)院,吉林 長(zhǎng)春130021)

結(jié)核分枝桿菌感染宿主后發(fā)病與否，不僅與感染細(xì)菌的數(shù)量和毒力等因素相關(guān)，同時(shí)還取決于機(jī)體的免疫功能狀態(tài)。目前認(rèn)為機(jī)體的抗結(jié)核免疫反應(yīng)主要通過(guò)T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)巨噬細(xì)胞的細(xì)胞免疫反應(yīng)[1]。為明確CD4+T淋巴細(xì)胞及其亞型相關(guān)細(xì)胞因子與結(jié)核病進(jìn)展的相關(guān)性,我們應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)肺結(jié)核患者CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù),采用流式細(xì)胞微球陣列技術(shù)(CBA)檢測(cè)其分泌細(xì)胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10的含量，探討其經(jīng)有效抗結(jié)核治療后的臨床意義?，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料肺結(jié)核患者組：選取2010年1月-2011年12月于我院診斷治療的初治肺結(jié)核患者給予常規(guī)抗結(jié)核化療方案進(jìn)行治療，即2HRZE/4HR(H為異煙肼，R為利福平，Z為吡嗪酰胺，E為乙胺丁醇)，6個(gè)月后達(dá)臨床治愈(癥狀均緩解，痰菌陰轉(zhuǎn)，X線胸片提示結(jié)核病灶明顯吸收)。共92例，其中男62例，女30例，年齡在18-57歲之間，平均年齡為28.84±11.06歲。所有患者均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì)制定的《肺結(jié)核診斷及治療指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。所有患者均排除心、肝、腎等臟器嚴(yán)重疾病或自身免疫性疾病的患者，未曾使用免疫調(diào)節(jié)劑，化療過(guò)程中可依據(jù)患者的臨床表現(xiàn)給予適當(dāng)?shù)谋８嗡幬锛皬?fù)合維生素輔助治療。健康人群對(duì)照組：選取健康人群30例，其中男20例，女10例，年齡19-58歲之間，平均年齡為30.3±11.88歲。兩組在性別構(gòu)成和平均年齡方面比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有組間可比性。

1.2試驗(yàn)方法肺結(jié)核患者組于治療前、治療后2個(gè)月以及化療后6個(gè)月，對(duì)照組空腹抽取靜脈血4-5 ml進(jìn)行檢測(cè)。CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)采用抗凝全血標(biāo)本;選用試劑為BD MultiTESTTMCD3/CD8/CD45/CD4 Kit(美國(guó) BD 公司,批號(hào):84305)Thl/Th2相關(guān)細(xì)胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10檢測(cè)選用試劑為BDTMCBAHuman Thl/Th2 Cytokine II Kit(美國(guó) BD 公司,批號(hào):88810)。使用美國(guó)BD公司的BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀于吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心進(jìn)行檢測(cè)，試驗(yàn)方法嚴(yán)格按照試劑盒所提供的說(shuō)明書(shū)操作。

1.3統(tǒng)計(jì)方法所有臨床研究數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，并以P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異非常顯著。

2結(jié)果

2.1患者組與對(duì)照組的CD4+T淋巴細(xì)胞及其亞型Th1/Th2細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平比較

與對(duì)照組健康人群相比，肺結(jié)核患者CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)降低，INF-γ水平降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；IL-10水平明顯提高，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有顯著差異(P<0.01)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的比較±s)

注：與對(duì)照組相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01

2.2肺結(jié)核患者在抗結(jié)核治療過(guò)程中CD4+T淋巴細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子水平動(dòng)態(tài)觀察及比較

患者在強(qiáng)化治療(2個(gè)月后)、療程結(jié)束(6個(gè)月后)測(cè)定CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及細(xì)胞因子INF-γ、IL-2、 IL-4、IL-10水平，分別與入院時(shí)測(cè)定情況進(jìn)行比較及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。治療2個(gè)月后，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、INF-γ、IL-2、IL-4無(wú)明顯變化，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無(wú)明顯差異；IL-10水平較前下降，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療6個(gè)月后，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯上升，IL-10水平明顯下降，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著差異(P<0.01)；INF-γ水平上升、IL-4水平下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；IL-2水平上升，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有明顯差異(P<0.01)。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　治療過(guò)程中CD4+T淋巴細(xì)胞及其亞型Th1/Th2細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平的比較±s)

注：與入院時(shí)相比，*表示P<0.05，**表示P<0.01

3討論

有關(guān)結(jié)核病患者機(jī)體免疫功能方面的研究,是近幾年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)之一。結(jié)核病免疫是T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫,CD4+T淋巴細(xì)胞對(duì)結(jié)核病的發(fā)病和演變具有決定性意義。CD4+T淋巴細(xì)胞因分泌不同的細(xì)胞因子,分型為T(mén)h1和Th2細(xì)胞,其平衡狀態(tài)與疾病的轉(zhuǎn)歸和愈后密切相關(guān)[1]。Th1細(xì)胞主要通過(guò)分泌IFN-γ、IL-2等細(xì)胞因子發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)，在細(xì)胞免疫中發(fā)揮極為重要的作用。IFN-γ通過(guò)促進(jìn)Th1細(xì)胞和巨噬細(xì)胞參與的炎癥反應(yīng)，抑制Th2細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞參與的炎癥反應(yīng)而加強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答。Th2細(xì)胞主要通過(guò)分泌IL-4、IL-10等細(xì)胞因子發(fā)揮相關(guān)生物學(xué)效應(yīng)。IL-4通過(guò)抑制巨噬細(xì)胞的活化，阻斷INF-γ激活巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答[3]。由此可見(jiàn)，Th1/Th2應(yīng)答平衡對(duì)于結(jié)核病的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸起著決定性的作用。

本研究主要是針對(duì)初治結(jié)核病患者的CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)以及Th1和Th2細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子進(jìn)行測(cè)定觀察，從而對(duì)于患者的免疫功能進(jìn)行分析判定。結(jié)果顯示：92例肺結(jié)核患者外周血CD4+T細(xì)胞的水平較健康對(duì)照組低,提示細(xì)胞免疫功能降低；通過(guò)INF-γ、IL-2水平降低可判定Th1細(xì)胞水平降低，提示保護(hù)性細(xì)胞免疫功能抑制；IL-4、IL-10水平明顯提高可判定Th2細(xì)胞水平增加?？梢?jiàn)活動(dòng)性肺結(jié)核患者細(xì)胞免疫功能降低，Th1/Th2應(yīng)答平衡失衡。此結(jié)論與相關(guān)學(xué)術(shù)報(bào)道[4,5]結(jié)論一致。在抗結(jié)核治療過(guò)程中動(dòng)態(tài)觀察并與治療前進(jìn)行對(duì)比分析，有效的抗結(jié)核治療有助于細(xì)胞免疫功能逐漸恢復(fù)。表2數(shù)據(jù)顯示，活動(dòng)性肺結(jié)核患者在抗結(jié)核強(qiáng)化治療后，CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)增加(P<0.05)，IL-10數(shù)值下降(P<0.05)；經(jīng)有效抗結(jié)核治療6個(gè)月后，CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增加(P<0.01)，INF-γ水平升高(P<0.05)、IL-2水平升高(P<0.01)，IL-2數(shù)值下降(P<0.05)，IL-10數(shù)值下降(P<0.01).此組觀察病例均為抗結(jié)核治療取得良好療效的病例，故可推斷：活動(dòng)性肺結(jié)核經(jīng)有效抗結(jié)核治療后免疫功能逐漸恢復(fù)，Th1細(xì)胞水平增加，Th2細(xì)胞水平降低，Th1/Th2應(yīng)答平衡平衡逐漸恢復(fù)。

綜上所述，活動(dòng)性肺結(jié)核患者細(xì)胞免疫功能降低，Th1/Th2應(yīng)答平衡失衡，Thl細(xì)胞的功能降低，Th2細(xì)胞功能增強(qiáng)；經(jīng)有效抗結(jié)核治療后，細(xì)胞免疫功能逐漸恢復(fù)。由此可見(jiàn)，外周血CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)以及Th1和Th2細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)有助于對(duì)肺結(jié)核患者預(yù)后情況的正確評(píng)價(jià)。然而，免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子的作用是復(fù)雜的和多方面的，其具體機(jī)制仍需進(jìn)一步深入研究。

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文章編號(hào)：1007-4287(2016)06-1011-02

*通訊作者

(收稿日期：2015-08-19)