tM2-PK在結(jié)直腸癌的應(yīng)用價值臨床研究

葉　紅

(天門市第一人民醫(yī)院 病理科,湖北 天門431700)

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tM2-PK在結(jié)直腸癌的應(yīng)用價值臨床研究

葉紅

(天門市第一人民醫(yī)院 病理科,湖北 天門431700)

摘要：目的研究腫瘤型丙酮酸激酶(tM2-PK)在結(jié)直腸癌患者表達情況及其與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系。方法以49例結(jié)直腸癌患者為研究對象，免疫組化檢測癌組織以及癌旁組織tM2-PK表達情況，并研究癌組織tM2-PK與患者血清tM2-PK水平相關(guān)性，分析tM2-PK與結(jié)直腸癌患者病理特征關(guān)系。結(jié)果49例結(jié)直腸癌患者癌組織與癌旁組織tM2-PK陽性率分別為81.6%、42.9%，兩者存在統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)；結(jié)直腸癌組織最大 Φ≥5 cm結(jié)直腸癌tM2-PK陽性率高于最大 Φ<5 cm結(jié)直腸癌，在TNM分期中Ⅲ+Ⅳ期tM2-PK陽性率高于Ⅰ+Ⅱ期，不同Duck分期上C+D 期tM2-PK陽性率高于A+B期；在不同年齡、性別以及不同分化程度上tM2-PK陽性率無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)； 40例結(jié)直腸癌患者癌組織tM2-PK陽性患者，平均評分7.53±1.94，其tM2-PK血清濃度26.59±10.24，兩者呈正相關(guān)，r=0.876，P=0.001 5，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論tM2-PK在結(jié)直腸癌的早期診斷，病情評估以及預(yù)后判斷上有廣闊前景。

關(guān)鍵詞：結(jié)直腸癌；腫瘤型丙酮酸激酶

(ChinJLabDiagn,2016,20:0925)

結(jié)直腸癌(Colorectal cancer，CRC)為臨床常見的惡性腫瘤，近年其發(fā)病率不斷攀升，在我國已位居惡性腫瘤發(fā)病率的第三位[1]，且呈現(xiàn)出年輕化趨勢，對人類的生命健康形成了嚴(yán)重的威脅。根治性外科手術(shù)為治療結(jié)直腸癌的主要手段，對于早期結(jié)直腸癌患者往往可取得較好的療效。而目前臨床對于結(jié)直腸癌的早期診斷尚缺乏靈敏性、特異性俱佳的指標(biāo)，大部分結(jié)直腸癌患者一經(jīng)診斷往往處于中晚期階段，已失去治療的最好時機[2]。腫瘤型丙酮酸激酶(tM2-PK)為糖酵解途徑中關(guān)鍵酶丙酮酸激酶的一種胚胎型同工酶，近年其作為一種新型的腫瘤標(biāo)志物引起臨床研究人員的廣泛關(guān)注[3,4]，本文對49例結(jié)直腸癌患者臨床資料進行了回顧性分析，旨在探討結(jié)直腸癌患者tM2-PK的表達情況以及與其與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系。

1資料與方法

1.1臨床資料

2013年1月至2014年12月我院腫瘤科行結(jié)直腸癌根治術(shù)患者49例為研究對象，其中男性32例，女性17例，年齡42-82歲，平均年齡(61.3±6.9)歲，49例結(jié)直腸癌患者均經(jīng)臨床病理確診，其中TNM分期情況：Ⅰ期+Ⅱ期25例，Ⅲ期+Ⅳ期24例；腫瘤大小情況：最大直徑≥5 cm 28例，<5 cm 21例；中低分化結(jié)直腸癌32例(粘液腺癌、印戒細胞癌歸于低分化癌)，高分化結(jié)直腸癌17例；Duke 分期情況：A+B 期22例，C+D期27例。49例結(jié)直腸癌患者術(shù)后癌組織標(biāo)本設(shè)為組織觀察組，49例結(jié)直腸癌患者術(shù)后距癌組織邊緣大于10 cm正常組織標(biāo)本設(shè)為組織對照組。所有研究對象均簽署知情同意書，研究經(jīng)醫(yī)院倫理會討論通過。

1.2方法

1.2.1組織tM2-PK檢測tM2-PK檢測試劑采用北京中杉金橋生物有限公司產(chǎn)品，按試劑盒說明書操作。結(jié)果判讀：細胞出現(xiàn)黃色顆粒為陽性。具體如下：①細胞無著色0 分、淺黃色1分、棕黃色2分、棕褐色3分；②陽性細胞占比例分為 0 分為<5 %、1分為5%-10%、 2 分為11%-50%、3 分為51%-80%、4 分為>80%。③將兩者評分的乘積作為陽性結(jié)果判斷，0 分(-)；1-4 分為(+)；5-8 分為(++)；9-12 分為(+++～++++)。

1.2.2血清tM2-PK檢測所有研究對象于術(shù)前空腹取血，離心分離血清，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清tM2-PK含量，試劑采用北京中杉金橋生物有限公司產(chǎn)品，嚴(yán)格按試劑操作說明書操作。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS17.0進行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料采用率表示，組間率的比較采用χ2檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析，以P<0.05具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1結(jié)直腸癌患者癌組織與癌旁組織tM2-PK陽性比較

結(jié)直腸癌患者癌組織與癌旁組織tM2-PK陽性率經(jīng)卡方檢驗分析，有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，癌組織tM2-PK陽性率高于癌旁組織tM2-PK陽性率,見表1。

表1　結(jié)直腸癌患者癌組織與癌旁組織tM2-PK陽性比較

2.2結(jié)直腸癌組織tM2-PK與病理特征關(guān)系

經(jīng)卡方檢驗分析比較，結(jié)直腸癌組織tM2-PK在不同腫瘤大小，不同TNM分期、不同Duck分期上存在統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，最大 Φ≥5 cm結(jié)直腸癌tM2-PK陽性率高于最大 Φ<5 cm結(jié)直腸癌，在TNM分期中Ⅲ+Ⅳ期tM2-PK陽性率高于Ⅰ+Ⅱ期，不同Duck分期上C+D 期tM2-PK陽性率高于A+B期；在不同年齡、性別以及不同分化程度上tM2-PK陽性率無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05),見表2。

表2　結(jié)直腸癌組織tM2-PK與病理特征關(guān)系

2.3結(jié)直腸癌患者癌組織tM2-PK評分與血清tM2-PK水平相關(guān)性分析

40例結(jié)直腸癌患者癌組織tM2-PK陽性患者，平均評分7.53±1.94，其tM2-PK血清濃度26.59±10.24，經(jīng)Spearman相關(guān)性分析，兩者呈正相關(guān)，r=0.876，P=0.0015，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3討論

結(jié)直腸癌好發(fā)于老年人群，男性多于女性，病因與生活方式、遺傳、大腸腺瘤等關(guān)系密切。發(fā)病較為隱匿，患者早期多無任何臨床癥狀，或僅表現(xiàn)為便血，臨床幾種常用的腫瘤標(biāo)志物缺乏靈敏性以及特異性?；颊呔歪t(yī)多處于中晚期，預(yù)后較差，資料顯示[5]：我國結(jié)直腸癌的五年生存率在50%-70%之間。結(jié)直腸癌也是目前最有預(yù)防前景的癌癥之一[6]，關(guān)鍵是早期診斷，早期發(fā)現(xiàn)。

丙酮酸激酶(PK)為糖酵解途徑催化生成第二個ATP反應(yīng)的關(guān)鍵酶，具有4種不同組織特異性的同工酶PK-L、PK-R、PK-M1以及PK-M2，活性形式為四聚體。M2亞型即tM2-PK表達于胚胎、肺、腎、未分化以及增殖細胞中，不同于其他三種同工酶，tM2-PK在缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1)作用下，Ser、Tyr位點易發(fā)生磷酸化[7]，由四聚體活性形式轉(zhuǎn)變?yōu)槎垠w形式而導(dǎo)致催化活性大幅減弱，而導(dǎo)致烯醇式丙酮酸(PEP)累積促進細胞的快速增殖。tM2-PK在腫瘤細胞中呈現(xiàn)出過度表達而成為腫瘤細胞特征性的糖代謝酶[8]。自1993年tM2-PK在德國漢堡腫瘤標(biāo)志物研討會上首次被提出作為一種新的腫瘤標(biāo)志物以來[9]，tM2-PK在肺癌、惡性血液病、消化道腫瘤等領(lǐng)域的研究得到廣泛的開展[10]，在腫瘤早期診斷、療效評價，預(yù)后評估均有重要的臨床應(yīng)用價值。

本研究顯示49例確診的結(jié)直腸癌患者中癌組織tM2-PK陽性率高達81.6%，且以強陽性(++以上)居多，結(jié)直腸癌患者癌組織邊緣大于10 cm的周邊正常組織標(biāo)本tM2-PK陽性率為42.9%，以(+)居多，兩者存在統(tǒng)計學(xué)差異，Schneider J等研究顯示[11]：tM2-PK作為結(jié)直腸癌的早期診斷腫瘤標(biāo)志物的靈敏度遠高于胃腸道腫瘤的傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物CEA、CA19-9及CA724，在腫瘤治療的動態(tài)監(jiān)測上有廣闊的應(yīng)用前景。結(jié)直腸癌組織tM2-PK與其病理特征關(guān)系研究上，數(shù)據(jù)顯示：在不同年齡、性別以及不同分化程度上tM2-PK陽性率無統(tǒng)計學(xué)差異，癌組織tM2-PK陽性率與結(jié)直腸癌腫瘤大小、TNM分期以及Duck分期密切相關(guān)，腫瘤細胞的新陳代謝與正常細胞存在差異性，腫瘤細胞tM2-PK二聚體占據(jù)優(yōu)勢地位，細胞通過谷氨酸酵解供能，而有氧糖酵解促進腫瘤細胞的生長及轉(zhuǎn)移。即使缺氧狀態(tài)下，腫瘤細胞仍能大量生長，腫瘤面積越大，侵襲性越強，促使tM2-PK的高表達[12]，其陽性率越高。組織tM2-PK的陽性強弱一定程度上可作為腫瘤預(yù)后評估的參考指標(biāo)。動物實驗顯示[13]：隨著小鼠機體M2-PK表達的抑制，其在異體移植中形成腫瘤的能力明顯降低，也進一步證明了tM2-PK與腫瘤的形成、增殖密切相關(guān)，同時也為相關(guān)腫瘤的分子靶向治療提供了一個新的方向。

組織tM2-PK的檢測在臨床缺乏診斷的前瞻性以及大范圍篩查的可行性，在研究中我們對結(jié)直腸癌患者組織tM2-PK陽性評分與患者tM2-PK的血清水平進行了相關(guān)性分析，結(jié)果顯示：組織tM2-PK陽性評分與患者tM2-PK的血清水平呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.876，患者血清中tM2-PK來源于腫瘤組織細胞壞死以及腫瘤轉(zhuǎn)移過程的釋放，能一定程度反映腫瘤的發(fā)生、進展以及預(yù)后，血液的采集方便、快速、無創(chuàng)，也為結(jié)直腸癌的篩查提供一種新的途徑。綜上所述，tM2-PK在結(jié)直腸癌的早期診斷，病情評估以及預(yù)后判斷上有廣闊前景。

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文章編號：1007-4287(2016)06-0925-04

中圖分類號：R735.3

文獻標(biāo)識碼：A

作者簡介：葉紅(1970-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事病理診斷工作。

(收稿日期：2015-10-16)

Study on the Clinical Application Value of the tM2-PK in the colorectal cancer

YEHong.

(TianmenMunicipalFirstPeople′sHospitalofHubei,Tianmen431700,China)

Abstract:ObjectiveTo study the tumor pyruvate kinase (tM2-PK) expression and its relationship with clinicopathological characteristics of colorectal cancer in patients with colorectal cancer.Methods49 cases of colorectal cancer patients for the study,next to the immunohistochemistry cancer tissue and cancer tissue tM2-PK expression and cancer research organizations tM2-PK and serum tM2-PK levels in patients with correlation analysis tM2-PK colorectal cancer patients with pathological relationship.Results49 cases of tissue tM2-PK positive rate of colorectal cancer in patients with cancer and adjacent tissues respectively 81.6%,42.9%,there was significant difference (P<0.05) between the two;colorectal cancer and colorectal largest Φ≥5 cm cancer tM2-PK was higher than the maximum Φ<5 cm of colorectal cancer in TNM staging Ⅲ+Ⅳ stage tM2-PK positive rate in Ⅰ+Ⅱ stage,different stages Duck on C+D positive rate of tM2-PK higher than that of a + B;no significant difference (P>0.05) at different ages,gender,and different degrees of differentiation on tM2-PK positive rate;40 cases of colorectal cancer cancer tissues tM2-PK-positive patients,with an average score 7.53±1.94,serum concentrations tM2-PK 26.59±10.24,a positive correlation,r=0.876,P=0.0015,statistically significant (P<0.05).ConclusiontM2-PK in the early diagnosis of colorectal cancer,as well as assess the prognosis of the disease and has good prospects.

Key words:colorectal cancer;tumor type pyruvate kinase