日立7170A生化儀交叉污染程序設置去除血清鎂檢測干擾

劉　瑾，謝雪蓓

(中國人民解放軍第一一八院檢驗科,浙江溫州 325000)

·臨床研究·

日立7170A生化儀交叉污染程序設置去除血清鎂檢測干擾

劉瑾，謝雪蓓

(中國人民解放軍第一一八院檢驗科,浙江溫州 325000)

目的血清鎂檢測時易受含鎂離子試劑污染，通過防交叉污染程序去除血清鎂檢測干擾。方法采用日立7170A型全自動生化分析儀，以單獨測定血清鎂作為對照組，以已設置防交叉污染程序(A組)和未設置防交叉污染程序(B組)作為研究組。取新鮮混合血清在A、B兩組條件下與三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶及其同工酶同時檢測，觀察研究組與對照組之間的偏倚率。結果觀察A、B兩組條件下血清鎂測定結果與對照組單獨測定血清鎂結果的偏倚率，其中A組偏倚率為1.10%，B組偏倚率為54.95%。結論三酰甘油、肌酸激酶試劑含有鎂離子，與血清鎂同時測定時，由于試劑探針的殘留攜帶，出現交叉污染，干擾血清鎂檢測，出現假性升高。通過日立7170A型全自動生化分析儀防交叉程序設置，增加試劑針沖洗次數，可有效避免干擾。

三酰甘油；堿性磷酸酶；肌酸激酶同工酶；血清鎂；交叉污染

現代生物化學檢驗儀器自動化普及，如何利用自動化儀器性能保證檢驗質量是目前需要重視的問題。在日常生物化學檢驗過程中，試劑間的交叉污染現象引起檢測結果異常的事件頻頻發(fā)生，這是由于自動化儀器結構因素，或者反應過程中因試劑或反應液交叉污染引起其他項目的測定結果受到干擾。全自動生化分析儀的試劑針需接觸試劑盤里的各種試劑，不同項目之間的測定是連續(xù)的，而試劑針在每個項目測定時試劑吸取前僅有一個短暫的水沖洗過程，且隨著儀器長時間的使用，儀器性能改變，如存在試劑污染現象，將會對檢測結果造成極大影響[1]。筆者在工作中發(fā)現，一些血清鎂在自動化儀器組合項目檢測時結果經常偏高，但經過單獨復查結果卻是正常的。本文通過設置日立7170A型全自動生化分析儀防交叉污染功能，增加試劑探針沖洗次數，觀察是否能去除血清鎂在與三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶及其同工酶組合檢測時出現的正干擾[2]?，F將結果報道如下。

1材料與方法

1.1標本來源新鮮混合血清10份，均為本院檢驗科接收標本，排除脂血、溶血標本。

1.2儀器與試劑日立7170A型全自動生化分析儀。血清鎂檢測試劑購自寧波賽克生物技術有限公司。三酰甘油檢測試劑購自浙江伊利康生物技術有限公司，試劑成分包括三磷腺苷、甘油激酶、N-乙基-N(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽等。堿性磷酸酶購自上海復星長征醫(yī)學科學有限公司，試劑成分包括醋酸鎂、硫酸鋅、N-羥乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、硫酸鋅(AMP)等。肌酸激酶購自上海科華生物工程股份有限公司，試劑成分包括醋酸鎂、5-磷酸二腺苷、6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)等。肌酸激酶同工酶購自上?？迫A生物工程股份有限公司，試劑成分包括醋酸鎂、乙酰半胱氨酸等。

1.3程序設置(1)在日立7170A全自動生化分析儀上打開實用工作菜單中的交叉污染(Carry Over)界面；(2)用光標在避免試劑針交叉污染條件一覽表中指定要實行的條件號碼；(3)選擇右側(Edit)鍵進入編輯試劑針窗口；(4)設定可造成試劑交叉污染的試劑針號；(5)設定可造成影響的試驗項目(Test)、試劑類型(Type)；(6)設定可受到影響的試驗項目(Test)、試劑類型(Type)；(7)設定清洗劑的位置(Position)、容量(Volume)；(8)如三酰甘油、肌酸激酶對血清鎂的干擾，按上述步驟進行防交叉污染設置，其工作界面顯示見表1。表1中述及清洗劑位置wash3即儀器清洗槽1D3，可用堿性清洗液作為防交叉污染清洗劑[3]。清洗劑容量一定要高于三酰甘油、肌酸激酶檢測R1試劑所設的量，如此試劑針才不會有試劑殘留，起到防交叉污染作用。

表1　試劑針交叉污染設置

1.5統(tǒng)計學處理采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，組間數據比較采用配對t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

對照組與A、B兩組血清鎂檢測結果見表2。將A組和B組血清鎂測定結果與對照組進行比對分析。A組血清鎂結果與對照組接近，其偏倚率為1.10%，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。B組血清鎂結果遠高于對照組，其偏倚率為54.95%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。在A組已設置防交叉污染程序條件下，有效避免了血清鎂與三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶及其同工酶同時測定時造成的交叉污染。

表2　血清鎂檢測結果

注：-表示無數據。

3討論

全自動生化儀清洗系統(tǒng)的工作模式使一個項目會對緊隨其后的一個甚至幾個項目的測試帶來一定程度的試劑污染，并且隨著儀器的長時間使用，儀器性能也會下降，試劑交叉污染的程度會有所加劇[4]。上述試驗證明，三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶試劑中含有鎂離子，鎂離子是三酰甘油、肌酸激酶等試劑中不可缺少的組成成分[5]，與血清鎂同時測定出現正干擾。因為儀器在正常程序情況下對試劑針無法完全沖洗干凈，所以三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、血清鎂同時測定會出現交叉污染，影響血清鎂檢測結果[6]。筆者通過相關資料查找，以及儀器操作指南中的相關說明，有兩種方法可消除此干擾。一種是重新設定項目的位置，另一種是通過儀器防交叉污染程序設置消除干擾[7]。由于生化分析儀的項目設置是根據本實驗室的具體情況和試劑廠家提供的儀器參數決定的，重新編排項目位置可能對其他項目存在交叉污染，一般不建議重新設定[8]。本實驗室血清鎂檢測是由于自動生化分析儀試劑探針的殘留攜帶，造成檢測項目間的試劑交叉污染，影響血清鎂檢測結果[9]。所以本文采用日立7170A型全自動生化分析儀自帶防交叉污染程序，增加試劑針沖洗次數，有效避免了血清鎂與三酰甘油、堿性磷酸酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶同時測定時出現的交叉污染。

生物化學檢驗技術發(fā)展越來越快，項目種類也越來越多，儀器的自動化程度也越來越高。種類繁多的項目也引起項目間因試劑成分和反應液產生交叉污染。因此，在試驗過程中，一定要了解項目試劑成分和反應過程中所產生的物質是否對其他項目有干擾，從而合理編排儀器程序避免交叉污染。

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2016-01-28修回日期：2016-03-18)

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.12.039

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1673-4130(2016)12-1691-02