急性冠脈綜合征患者血清高遷移率族蛋白B1的表達(dá)及阿托伐他汀干預(yù)治療的影響

孟祥娟，許靜，程愛(ài)娟

?

藥物臨床觀察

急性冠脈綜合征患者血清高遷移率族蛋白B1的表達(dá)及阿托伐他汀干預(yù)治療的影響

孟祥娟1，2，許靜2，程愛(ài)娟2

摘要：目的探討急性冠脈綜合征（ACS）患者血清高遷移率族蛋白B1（HMGB1）及超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）的表達(dá)及阿托伐他汀干預(yù)治療對(duì)其影響。方法選擇臨床確診為ACS的患者90例和對(duì)照組90例，所有患者均于治療前抽取空腹肘正中靜脈血，檢測(cè)HMGB1及hs-CRP；將ACS組患者按隨機(jī)數(shù)字表法分為標(biāo)準(zhǔn)組（45例）和強(qiáng)化組（45例），分別給予阿托伐他汀20 mg每天1次和40 mg每天1次，治療1周后再次抽取空腹肘正中靜脈血，檢測(cè)HMGB1及hs-CRP。結(jié)果ACS組患者血清HMGB1及hs-CRP水平高于對(duì)照組（P＜0.01）。ACS組患者血清HMGB1水平與hs-CRP水平呈正相關(guān)（r=0.389，P＜0.01）。治療前，標(biāo)準(zhǔn)組與強(qiáng)化組患者血清HMGB1及hs-CRP基線水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；治療后1周，2組患者血清HMGB1及hs-CRP水平較治療前均降低，且強(qiáng)化組較標(biāo)準(zhǔn)組降低更明顯（均P＜0.05）。結(jié)論HMGB1和hs-CRP相互影響，在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。強(qiáng)化阿托伐他汀治療能顯著降低HMGB1表達(dá)，減輕ACS患者的炎癥反應(yīng)，穩(wěn)定冠脈粥樣硬化斑塊。

關(guān)鍵詞：急性冠狀動(dòng)脈綜合征；高遷移率族蛋白質(zhì)類；C反應(yīng)蛋白質(zhì)；阿托伐他??；高遷移率族蛋白B1；超敏C反應(yīng)蛋白

急性冠脈綜合征（ACS）是一組包含不同臨床表現(xiàn)、危險(xiǎn)性及預(yù)后的急性血管綜合征，其共同的主要致病機(jī)制是不穩(wěn)定斑塊的纖維帽破裂和內(nèi)膜的淺表糜爛［1］。有研究指出，炎癥反應(yīng)在易損斑塊的形成中發(fā)揮著關(guān)鍵作用［2］，并可導(dǎo)致不穩(wěn)定斑塊破裂［3］。高遷移率族蛋白B1（HMGB1）是新近發(fā)現(xiàn)的一種非特異性的炎癥因子［4］，其在動(dòng)脈粥樣硬化病變的壞死核心區(qū)高表達(dá)［5］。長(zhǎng)期應(yīng)用他汀類藥物可抗動(dòng)脈粥樣硬化、穩(wěn)定粥樣斑塊。但他汀類藥物能否通過(guò)影響HMGB1水平發(fā)揮其抗炎、穩(wěn)定粥樣斑塊的研究尚少見(jiàn)。本研究通過(guò)觀察阿托伐他汀對(duì)ACS患者血清HMGB1及超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）表達(dá)的影響，進(jìn)一步探討阿托伐他汀抗炎、穩(wěn)定粥樣斑塊的作用。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象參照2014美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)（ACC）/美國(guó)心臟協(xié)會(huì)（AHA）非ST段抬高型急性冠脈綜合征診治指南或2013美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)基金會(huì)（ACCF）/AHA ST段抬高心肌梗死指南，選取2014年10月—2015年6月就診于本院的ACS患者90例，其中不穩(wěn)定型心絞痛（UA）患者29例，非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）患者26例，ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者35例，男69例，女21例，年齡30～81歲，平均（59.03±9.84）歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有嚴(yán)重肝腎功能不全及心衰者；伴嚴(yán)重感染性疾病、風(fēng)濕免疫性疾病及惡性腫瘤者；對(duì)他汀類藥物過(guò)敏者；入院前3個(gè)月內(nèi)曾服用過(guò)他汀類或非他汀類調(diào)脂藥物者。所有入選者均簽署知情同意書。將入選的ACS患者按隨機(jī)數(shù)字表法分為標(biāo)準(zhǔn)組和強(qiáng)化組。另外入選同一時(shí)段因胸痛原因待查入住我院，心電圖、心肌壞死標(biāo)志物、生化全項(xiàng)及影像學(xué)檢查均正常，并經(jīng)冠脈造影檢查除外冠心病的患者90例，作為對(duì)照組。

1.2研究方法所有入選的ACS患者在抗血小板聚集、抗凝、抗心絞痛等常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，標(biāo)準(zhǔn)組和強(qiáng)化組分別給予阿托伐他汀（輝瑞制藥）20 mg每天1次和40 mg每天1次治療；所有入組患者于治療前采集空腹肘正中靜脈血5 mL，置促凝管內(nèi)，于4℃、3 000 r/min離心10 min，分離上層血清，應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)同型半胱氨酸（Hcy）和血脂，其余血清標(biāo)本置于-80℃冰凍保存待檢；ACS組患者于治療后1周再次采集清晨空腹肘正中靜脈血5 mL，操作方法同上。血清HMGB1、hs-CRP檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），兩種試劑盒均同批購(gòu)自上海藍(lán)基生物科技有限公司，并嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 20.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本資料t檢驗(yàn)，方差不齊的組間比較采用t′檢驗(yàn)，組內(nèi)治療前后指標(biāo)的比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以M（P25，P75）表示，組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用Χ2檢驗(yàn)。雙變量正態(tài)資料的線性相關(guān)采用Pearson分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1臨床資料比較ACS組有糖尿病病史、吸煙史的比例和Hcy水平高于對(duì)照組，HDL-C低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01），見(jiàn)表1。治療前，標(biāo)準(zhǔn)組與強(qiáng)化組臨床資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

2.2ACS組與對(duì)照組血清HMBG1與hs-CRP基線水平比較ACS組血清HMBG1與hs-CRP水平高于對(duì)照組（P＜0.01），見(jiàn)表3。

2.3HMBG1與hs-CRP相關(guān)性治療前，ACS組患者血清HMBG1與hs-CRP水平呈正相關(guān)（r=0.389，P＜0.01）。

Tab.1　Comparison of general clinical date between ACS group and control group表1　ACS組與對(duì)照組臨床基本資料比較　（n=90）

Tab.2　Comparison of general clinical date between standard group and intensive group表2　標(biāo)準(zhǔn)組與強(qiáng)化組臨床基本資料比較?。╪=45）

Tab.3　Comparison of serum HMBG1 and hs-CRP baseline concentrations between ACS group and control group表3　ACS組與對(duì)照組血清HMBG1與hs-CRP基線水平比較　（μg/L，x±s）

2.4治療前后標(biāo)準(zhǔn)組與強(qiáng)化組血清HMGB1及hs-CRP水平變化治療前標(biāo)準(zhǔn)組與強(qiáng)化組血清HMGB1及hs-CRP水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后1周2組患者血清HMGB1及hs-CRP較治療前均降低，且強(qiáng)化組較標(biāo)準(zhǔn)組降低更明顯（均P＜0.05），見(jiàn)表4。

Tab.4　Comparison of HMBG1 and hs-CRP before and after treatment between two groups表4　2組患者治療前后HMBG1與hs-CRP比較?。é蘥/L，x±s）

3　討論

有研究證據(jù)指出，炎癥可通過(guò)減薄纖維帽、增強(qiáng)脂質(zhì)的涌入、擴(kuò)大脂質(zhì)核心以及刺激新血管的生成，在促使易損斑塊形成中發(fā)揮關(guān)鍵作用［2］。炎癥反應(yīng)可導(dǎo)致不穩(wěn)定斑塊破裂并誘發(fā)血栓形成，導(dǎo)致隨后的急性缺血事件的發(fā)生［3］。ACS是急性心肌缺血事件中最常見(jiàn)的一組臨床疾病，其共同的主要致病機(jī)制是冠脈不穩(wěn)定斑塊的纖維帽破裂和內(nèi)膜的淺表糜爛［1］。

炎癥因子在冠狀動(dòng)脈狹窄的過(guò)程中產(chǎn)生并釋放，它們可以反過(guò)來(lái)促進(jìn)冠狀動(dòng)脈狹窄的進(jìn)一步發(fā)展，形成一種惡性的循環(huán)。高遷移率族蛋白（HMG）是一種低分子非組蛋白染色體核蛋白，其富含電荷，在聚丙烯酰胺凝膠電泳中具有快速的遷移率。HMGB1則是HMG家族中含量最豐富且唯一能夠被釋放到細(xì)胞外，發(fā)揮其生物學(xué)活性的蛋白質(zhì)，其幾乎存在于所有真核細(xì)胞中。既往有研究顯示HMGB1是一種新型的敏感性、非特異性的炎癥因子［4］，HMGB1作為一種促炎癥因子，在動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用［6］。HMGB1高表達(dá)于動(dòng)脈粥樣硬化斑塊病變的壞死核心中，并由壞死細(xì)胞釋放，誘發(fā)局部炎癥［5］。在多種非特異性炎癥反應(yīng)中，組織細(xì)胞的壞死、損傷可引起活化的巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞主動(dòng)分泌HMGB1，其在細(xì)胞外可直接刺激炎癥細(xì)胞產(chǎn)生hs-CRP、腫瘤壞死因子（TNF）和干擾素（IFN）等炎癥因子，而這些炎癥因子同樣可以反過(guò)來(lái)促進(jìn)HMGB1的生成，形成級(jí)聯(lián)放大的炎癥反應(yīng)［7］，從而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化及不穩(wěn)定斑塊的形成，甚至導(dǎo)致不穩(wěn)定型斑塊的破裂，引發(fā)冠狀動(dòng)脈嚴(yán)重的完全性或不完全性阻塞，導(dǎo)致ACS及其他急性心血管事件的發(fā)生。近年來(lái)，Kohno等［8］研究發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死（AMI）后HMGB1可迅速釋放到細(xì)胞外，并在梗死發(fā)生后12 h達(dá)高峰，這種高水平的狀態(tài)可維持至梗死后1周。Hashimoto等［9］研究顯示，ACS患者血清HMGB1水平高于對(duì)照組，高水平的HMGB1可能是UA或NSTEMI發(fā)病1 d內(nèi)預(yù)測(cè)心血管死亡率潛在的獨(dú)立危險(xiǎn)炎癥因子。

hs-CRP可促進(jìn)冠狀動(dòng)脈粥樣斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞對(duì)內(nèi)源性LDL-C的攝取，誘導(dǎo)泡沫細(xì)胞的產(chǎn)生，在冠脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵作用；還可以促使白細(xì)胞釋放蛋白酶，加速降解粥樣硬化斑塊纖維帽，導(dǎo)致斑塊纖維帽變薄、破裂，繼發(fā)血栓形成，是心血管事件的重要炎癥標(biāo)志物之一［10］。近年來(lái)研究顯示，hs-CRP水平在ACS患者中明顯升高，可反映冠脈斑塊內(nèi)炎癥強(qiáng)度的大小及冠心病的嚴(yán)重程度［10-11］。

Hashimoto等［9］和 Seo等［12］的研究顯示血清HMGB1及hs-CRP水平在ACS患者中均較對(duì)照組患者升高。本研究與之相符，提示HMGB1水平可能與冠脈斑塊的穩(wěn)定性有關(guān)。ACS患者冠脈內(nèi)的易損斑塊破裂、血管內(nèi)皮受損，導(dǎo)致血小板激活并黏附聚集，從而形成血栓，導(dǎo)致冠脈管腔嚴(yán)重狹窄或閉塞，引發(fā)心肌缺血。在急性缺血階段，HMGB1由受損或壞死的心肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、泡沫細(xì)胞和活化的巨噬細(xì)胞等釋放，增加炎癥或組織的損傷［13］。本研究還顯示ACS患者血清HMBG1與hs-CRP呈正相關(guān)，和Yao等［14］研究相近，提示HMGB1和hs-CRP作為炎癥因子可相互促進(jìn)，在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

近年來(lái)，有研究顯示他汀類藥物在降脂的同時(shí)還具有抗炎、抗氧化、改善內(nèi)皮功能及抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用［15］，長(zhǎng)期應(yīng)用可阻止冠脈粥樣硬化斑塊的進(jìn)展。短期強(qiáng)化阿托伐他汀治療具有抗炎、穩(wěn)定斑塊的作用［16］。但阿托伐他汀能否通過(guò)影響HMGB1水平發(fā)揮其抗炎及穩(wěn)定粥樣硬化斑塊的研究報(bào)道尚少見(jiàn)。本研究顯示強(qiáng)化阿托伐他汀治療能降低ACS患者HMGB1的表達(dá)，穩(wěn)定冠脈粥樣硬化斑塊，發(fā)揮其抗炎、抗氧化作用。本研究時(shí)間短、樣本量小，未能對(duì)長(zhǎng)期大劑量阿托伐他汀治療對(duì)冠脈斑塊的穩(wěn)定性及安全性作進(jìn)一步觀察，有待于進(jìn)一步證實(shí)。

參考文獻(xiàn)

［1］Libby P.Mechanisms of acute coronary syndromes and their implications for therapy［J］.N Engl J Med，2013，368（21）：2004-2013. doi：10.1056/NEJMra1216063.

［2］Bentzon JF，OtsukaF，Virmani R，et al.Mechanisms of plaque formation and rupture［J］.Circ Res，2014，114（12）：1852-1866.doi：10.1161/ CIRCRESAHA.114.302721.

［3］Liang Y，Hou Y，Niu H，et al.Correlation of high-sensitivity C-reactive protein and carotid plaques with coronary artery disease in elderly patients［J］.Exp Ther Med，2015，10（1）：275-278.

［4］Hu X，Jiang H，Bai Q，et al.Inceased serum HMGB1 is related to the severity of coronary artery stenosis［J］.Clin Chim Acta，2009，406（1/2）：139-142.doi：10.1016/j.cca.2009.06.016.

［5］Kalinina N，Agrotis A，Antropova Y，et al.Increased expression of the DNA-binding cytokine HMGB1 in human atherosclerotic lesions：role of activated macrophages and cytokines［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2004，24（12）：2320-2325.

［6］de Souza AW，Westra J，Limburg PC，et al.HMGB1 in vascular diseases：Its role in vascular inflammation and atherosclerosis［J］. Autoimmun Rev，2012，11（12）：909-917.doi：10.1016/j.autrev. 2012.03.007.

［7］Inoue K，Kawahara K，Biswas KK，et al.HMGB1 expression by activated vascular smooth muscle cells in advanced human atherosclerosis plaques［J］.Cardiovasc Pathol，2007，16（3）：136-143.

［8］Kohno T，Anzai T，Naito K，et al.Role of high-mobility group box 1 protein in post-infarction healing process and left ventricular remodelling［J］.Cardiovasc Res，2009，81（3）：565-573.doi：10.1093/cvr/cvn291.

［9］Hashimoto T，Ishii J，KitagawaF，et al.Circulatinghigh-mobility group box 1 and cardiovascular mortality in unstable angina and non-ST-segment elevation myocardial infarction［J］.Atherosclerosis，2012，221 （2）：490-495.doi：10.1016/j.atherosclerosis.2012.01.040.

［10］Cimmino G，Ragni M，Cirillo P，et al.C-reactive protein induces expression of matrix metalloproteinase-9：a possible link between inflammation and plaque rupture［J］.Int J Cardiol，2013，168（2）：981-986.doi：10.1016/j.ijcard.2012.10.040.

［11］Jung CH，Lee WY，Kim BY，et al.The risk of metabolic syndrome according to the white blood cell count in apparently healthy Korean adults［J］.Yonsei Med J，2013，54（3）：615-620.doi：10.3349/ ymj.2013.54.3.615.

［12］Seo HS.The role and clinical significance of high-sensitivity C-reactive protein in cardiovascular disease［J］.Korean Circ J，2012，42 （3）：151-153.doi：10.4070/kcj.2012.42.3.151.

［13］Xu H，Yao Y，Su Z，et al.Endogenous HMGB1 contributes to ischemia-reperfusion-induced myocardial apoptosis by potentiating the effect of TNF-&alpha；/JNK［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2011，300（3）：H913-921.doi：10.1152/ajpheart.00703.2010.

［14］Yao HC，Zhao AP，Han QF，et al.Correlation between serum highmobility group box-1 levels and high-sensitivity C-reactive protein and troponin I in patients with coronary artery disease［J］.Exp Ther Med，2013，6（1）：121-124.

［15］Zucker IH，Keehan KH.The American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology：a long history，a bright future［J］.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2014，306（8）：H1103-1104.doi：10.1152/ajpheart.00106.2014.

［16］Shan R，Wu SQ，Cheng AJ.Effects of loading dose of atorvastatin on inflammatory cytokines in acute myocardial infarction patients undergoing emergency percutaneous coronary intervention［J］.Tianjin Med J，2015，43（3）：285-287.［單瑞，吳尚勤，程愛(ài)娟.圍術(shù)期強(qiáng)化阿托伐他汀治療對(duì)AMI患者急診PCI術(shù)后Lp-PLA2及炎癥因子的影響［J］.天津醫(yī)藥，2015，43（3）：285-287］.doi：10.3969/ j.issn.0253-9896.2015.03.017.

（2015-08-23收稿2015-12-08修回）

（本文編輯李國(guó)琪）

The expression of high mobility group box-1 in patients with acute coronary syndrome and the treatment of atorvastatin

MENG Xiangjuan1，2，XU Jing2，CHENG Aijuan2
1 Graduate School of Tianjin Medical University，Tianjin 300070，China；2 Department of Cardiology，Tianjin Chest Hospital Corresponding AuthorE-mail:tjxkyyjuan@sina.com

Abstract：ObjectiveTo investigate the expressions of high mobility group box-1（HMGB1）and high sensitivity C-reactive protein（hs-CRP）in patients with acute coronary syndrome（ACS）and the effects of atorvastatin on the two inflammatory cytokines.MethodsA total of 90 patients with ACS and 90 cases of normal control subjects were selected in this study.The serum concentrations of HMGB1 and hs-CRP were measured before treatment in patients of ACS.Patients were randomly divided into two groups:control group（n=45）and atorvastatin group（n=45）.Atorvastatin was given 20 mg/24 h and 40 mg/24 h.Blood samples were obtained from the patients for detection of HMGB1 and hs-CRP one week after treatment with atorvastatin.ResultsThere were significantly higher serum levels of HMGB1 and hs-CRP in patients with ACS than those of control subjects（P＜0.01）.The level of HMGB1 was positively correlated with the level of hs-CRP in patients of ACS（r=0.389，P＜0.01）.Before treatment，there were no significant diffferences in level of HMGB1 and hs-CRP in patients with ACS between the two groups.After treatment with atorvastatin，the levels of HMGB1 and hs-CRP were decreased in the two groups of ACS，and those were significantly lower in the intensive group than the standard group（P＜0.05）.ConclusionHMGB1 could stimulate the secretion of hs-CRP and other inflammatory cytokines，playing an important role in the process of occurrence and development of atherosclerosis.High loading dose of atorvastatin may reduce the expression of HMGB1 and decrease the inflammation，and stabilize the plaques in patients with acute coronary syndrome.

Key words：acute coronary syndrome；high mobility group proteins；C-reactive protein；atorvastatin；high mobility group box-1；hs-CRP

中圖分類號(hào)：R541.4

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

DOI：10.11958/20150127

基金項(xiàng)目：天津市衛(wèi)生行業(yè)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目（12KG126）；天津市衛(wèi)生局科技基金（2011KZ61）

作者單位：1天津醫(yī)科大學(xué)研究生院（郵編300070）；2天津市胸科醫(yī)院心內(nèi)科

作者簡(jiǎn)介：孟祥娟（1988），女，碩士在讀，主要從事心血管疾病基礎(chǔ)與臨床研究

通訊作者E-mail:tjxkyyjuan@sina.com