血清P-gp NPY GAL在腦血管病性癲癇患者中的應(yīng)用價(jià)值

張　媚　張細(xì)六

武漢市第五醫(yī)院　武漢　430050

血清P-gp NPY GAL在腦血管病性癲癇患者中的應(yīng)用價(jià)值

張媚張細(xì)六

武漢市第五醫(yī)院武漢430050

【摘要】目的探討血清P糖蛋白(P-gp)、神經(jīng)肽(NPY)、甘丙肽(GAL)在腦血管病性癲癇患者中的應(yīng)用價(jià)值。方法選取84例腦血管病性癲癇患者為研究對(duì)象，另選取80例正常體檢者為對(duì)照組，采用ELISA法側(cè)2組血清NPY、GAL水平，采用流式細(xì)胞儀測(cè)定2組外周血P-gp，應(yīng)用受試者特異性曲線(ROC)分析P-gp、NPY、GAL在腦血管病性癲癇中的應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果腦血管病性癲癇患者血清P-gp、NPY、GAL顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，與間歇性癲癇組相比，持續(xù)性癲癇組血清P-gp、NPY、GAL水平顯著升高(P<0.05)。與單一指標(biāo)相比，P-gp、NPY、GAL聯(lián)合檢測(cè)可提高腦血管病性癲癇患者診斷的靈敏性及特異性(P<0.05)。結(jié)論血清P-gp、NPY、GAL與癲癇發(fā)病有密切關(guān)系，可作為腦血管病性癲癇病情預(yù)后及轉(zhuǎn)歸的評(píng)價(jià)指標(biāo)。三者聯(lián)合檢測(cè)可提高腦血管病性癲癇臨床診斷的靈敏性及特異性。

【關(guān)鍵詞】血清；P糖蛋白；神經(jīng)肽；甘丙肽；腦血管病性癲癇

癲癇是腦血管疾病患者常見的并發(fā)癥，我國(guó)目前發(fā)病率為5%～15%，腦血管病性癲癇發(fā)作嚴(yán)重影響患者身心健康及生活質(zhì)量[1]。目前研究認(rèn)為腦血管病性癲癇發(fā)作為患者預(yù)后及生存質(zhì)量的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[2]。因此，盡早診斷腦血管病性癲癇的發(fā)生，對(duì)改善腦血管疾病預(yù)后及提高患者生活質(zhì)量具有積極的意義。近年神經(jīng)生物學(xué)研究指出[3]，某些神經(jīng)內(nèi)分泌物，如清P糖蛋白(P-gp)、神經(jīng)肽(NPY)、甘丙肽(GAL)改變可能與癲癇的發(fā)病機(jī)制及預(yù)后有密切的關(guān)系。為此，本研究采用ELISA法測(cè)定血清P-gp、NPY、GAL水平，探討其對(duì)腦血管病性癲癇患者病情預(yù)后及轉(zhuǎn)歸的預(yù)測(cè)價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料及方法

1.1臨床資料選取2014-01—2015-01我院收治的84例腦血管病性癲癇患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均經(jīng)頭顱CT或MRI確診為腦血管疾病；(2)均符合全國(guó)第4次腦血管學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(3)癲癇診斷參照國(guó)際抗癲癇聯(lián)盟1981年資制定的標(biāo)準(zhǔn)；(4)均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)炎癥性疾病或傳染性疾?。?2)肝腎功能不全；(3)急性嚴(yán)重性神經(jīng)疾病；(4)下丘腦垂體異常疾??；(5)近2周內(nèi)接受過(guò)手術(shù)或外傷的患者；(6)近6個(gè)月應(yīng)用過(guò)免疫抑制劑及激素治療的患者。男 48例，女36例；年齡48～78(52.3±3.86)歲；間歇性癲癇58例，持續(xù)性癲癇26例。另選取80例正常體檢者為對(duì)照組，經(jīng)頭顱CT或MRI排除腦血管疾病，其余排除標(biāo)準(zhǔn)與腦血管病性癲癇組一致，男44例，女36例；年齡48～75(51.8±3.92)歲。2組性別、年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法(1)血清NPY、GAL：2組分別于清晨空腹抽取靜脈血2 mL，離心留取上清液。采用ELISA法測(cè)定2組血清NPY、GAL水平，NPY試劑盒由上海紀(jì)寧生物科研有限公司提供，GAL試劑盒由上海滬震生物科技有限公司提供，操作過(guò)程嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。(2)P-gp測(cè)定：應(yīng)用德國(guó)BECTON DICKIKSON公司提供的FACSCalibur流失細(xì)胞儀測(cè)定2組外周血細(xì)胞膜上P-gp水平，并計(jì)算P-gp陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。

2結(jié)果

2.12組血清P-gp、NPY、GAL水平對(duì)比腦血管病性癲癇患者血清P-gp、NPY、GAL顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1　2組血清P-gp、NPY、GAL水平對(duì)比

2.2不同腦血管病性癲癇患者血清P-gp、NPY、GAL水平對(duì)比與間歇性癲癇組相比，持續(xù)性癲癇組血清P-gp、NPY、GAL水平顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2　不同腦血管病性癲癇患者血清P-gp、NPY、GAL

2.3血清P-gp、NPY、GAL在腦血管病性癲癇患者中的價(jià)值與單一指標(biāo)相比，P-gp、NPY、GAL聯(lián)合檢測(cè)可提高腦血管病性癲癇患者診斷靈敏性及特異性(P<0.05)。見表3。

表3　血清P-gp、NPY、GAL在腦血管病性癲癇患者中的

注：與P-gp相比，aP<0.05；與NPY相比，bP<0.05；與GAL相比，cP<0.05

3討論

P-gp屬于MDR基因表型，是由1 280個(gè)氨基酸多肽構(gòu)成的跨膜蛋白。正常生理狀態(tài)下，P-gp在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中呈高表達(dá)，廣泛存在于腦實(shí)質(zhì)星形細(xì)胞、腦部毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及大腦毛細(xì)血管質(zhì)膜中[4]。正常狀態(tài)下，P-gp可阻止外源性毒素入侵，及時(shí)清除內(nèi)源性有毒物質(zhì)，并可維持體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定[5]。而在病理狀態(tài)下，內(nèi)環(huán)境改變會(huì)導(dǎo)致血腦屏障損傷，使得位于毛細(xì)血管內(nèi)皮的P糖蛋白從腦細(xì)胞中釋出，導(dǎo)致血液中P-gp水平升高[6]。Alisha等[7]采用免疫組化法測(cè)定顳葉癲癇大鼠腦組織中P-gp表達(dá)情況，結(jié)果顯示，與正常大鼠相比，顳葉癲癇大鼠腦組織中P-gp表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)。本研究結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，腦血管病性癲癇患者外周血P-gp表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)，與黃月艷等[8]研究一致。提示P-gp可作為預(yù)測(cè)腦血管病性癲癇發(fā)病的預(yù)測(cè)指標(biāo)，對(duì)評(píng)估腦血管病性癲癇患者預(yù)后具有較高的診斷價(jià)值。董長(zhǎng)征等[9]研究指出，短暫的一次性癲癇發(fā)作后血清P-gp水平會(huì)出現(xiàn)一過(guò)性性升高，但持續(xù)性的癲癇發(fā)作會(huì)導(dǎo)致血清P-gp水平持續(xù)升高。本研究結(jié)果也表明，持續(xù)性癲癇患者血清P-gp水平顯著高于間歇性癲癇患者。Kia等[10]認(rèn)為，P-gp高表達(dá)與癲癇發(fā)作及藥物作用有密切的關(guān)系，P-gp表達(dá)水平升高可能是由于多環(huán)節(jié)、多機(jī)制、多因素共同作用的結(jié)果，因此其在癲癇中的作用機(jī)制還需進(jìn)一步研究。在應(yīng)用抗癲癇藥物治療的同時(shí)應(yīng)注重應(yīng)用P-gp抑制劑以防止癲癇耐藥性的發(fā)生。

NPY廣泛分布在神經(jīng)系統(tǒng)中，主要起到神經(jīng)調(diào)質(zhì)及神經(jīng)遞質(zhì)作用。研究指出[11]，NPY可能與癲癇過(guò)程中海馬神經(jīng)元異?；顒?dòng)有關(guān)，在癲癇發(fā)作時(shí)容易損傷神經(jīng)元。本研究結(jié)果顯示，腦血管病性癲癇組患者血清NPY水平顯著高于對(duì)照組，且持續(xù)癲癇組患者NPY水平高于間歇性癲癇組，提示腦血管病性癲癇發(fā)作后NPY合成及釋放會(huì)增加血漿中NPY水平。研究指出，癲癇發(fā)作后血清中NPY水平升高會(huì)導(dǎo)致癲癇發(fā)作易感性升高，而癲癇發(fā)作頻率的升高會(huì)促使腦組織持續(xù)分泌NPY，進(jìn)而導(dǎo)致癲癇發(fā)作向持續(xù)狀態(tài)發(fā)展。

GAL是一種廣泛存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)各個(gè)腦區(qū)中的神經(jīng)肽，其積極參與大腦各種生理活動(dòng)，包括記憶、學(xué)習(xí)、情緒、攝食等。近年越來(lái)越多報(bào)告顯示，GAL與癲癇發(fā)病有密切的關(guān)系。鮑民等[12]顯示向癲癇大鼠腦部注入GAL后能有效降低癲癇持續(xù)時(shí)間，從而提示GAL具有抵抗癲癇發(fā)作的作用。本研究結(jié)果顯示，腦血管病性癲癇患者血漿中GAL水平顯著高于對(duì)照組，且持續(xù)癲癇組患者GAL水平顯著高于間歇性癲癇組，提示癲癇患者中GAL水平持續(xù)升高可能具有進(jìn)一步阻斷癲癇發(fā)生的作用，但可能長(zhǎng)時(shí)間的癲癇發(fā)作會(huì)影響GAL對(duì)神經(jīng)組織的支配作用，導(dǎo)致癲癇向持續(xù)狀態(tài)轉(zhuǎn)化。本研究顯示，P-gp、NPY、GAL聯(lián)合檢測(cè)可提高腦血管病性癲癇患者診斷靈敏性及特異性(P<0.05)，提示臨床工作者通過(guò)聯(lián)合診斷的方式可提高腦血管病性癲癇的診斷靈敏性及特異性，有利于對(duì)腦血管病性癲癇患者預(yù)后作出判斷。

綜上所述，血清P-gp、NPY、GAL與癲癇發(fā)病有密切的關(guān)系，可作為腦血管病性癲癇患者預(yù)后及轉(zhuǎn)歸的評(píng)價(jià)指標(biāo)，三者聯(lián)合檢測(cè)可提高腦血管病性癲癇臨床診斷靈敏性及特異性。

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(收稿 2015-06-05)

【中圖分類號(hào)】R742.1

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1673-5110(2016)11-0076-03