動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)設(shè)計(jì)與探討

林亞秋　羅璠

摘 要 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在本科《細(xì)胞生物學(xué)》教學(xué)中占有重要的地位，為了提高學(xué)生的積極性并熟練掌握無菌操作步驟，教研室根據(jù)自身的特點(diǎn)，將小鼠脂肪細(xì)胞培養(yǎng)與分子鑒定結(jié)合起來，目的是使學(xué)生將細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)結(jié)合起來，對(duì)培養(yǎng)學(xué)生的綜合能力具有很好的效果，并為細(xì)胞生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革提供了新思路。

關(guān)鍵詞 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 實(shí)驗(yàn) 教學(xué)設(shè)計(jì)

中圖分類號(hào)：Q2-4；G642 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

細(xì)胞生物學(xué)是一門實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的學(xué)科，在生命科學(xué)專業(yè)的知識(shí)結(jié)構(gòu)體系中占有重要地位。它通過結(jié)構(gòu)和功能相結(jié)合，從細(xì)胞、亞細(xì)胞和分子等方面，用活的、動(dòng)態(tài)的視點(diǎn)，來研究和探討生命活動(dòng)的基本規(guī)律。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)最重要的基本技術(shù)，在本科細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課中占有舉足輕重的地位，是這門實(shí)驗(yàn)課的精髓，通過該實(shí)驗(yàn)可以幫助學(xué)生樹立嚴(yán)格無菌的觀念和一絲不茍的工作作風(fēng)。

目前細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容比較單一，主要是細(xì)胞的觀察、染色，標(biāo)本制備，細(xì)胞培養(yǎng)等，針對(duì)傳統(tǒng)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在的不足，結(jié)合本專業(yè)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備及老師的科研項(xiàng)目，我們將原來的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)在教學(xué)設(shè)計(jì)中進(jìn)行了改革，即在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上增加分子水平對(duì)細(xì)胞鑒定的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，使學(xué)生全面掌握操作技術(shù)，突破傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的缺點(diǎn)，為積極推進(jìn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革提供參考。

1實(shí)驗(yàn)方法

1.1小鼠脂肪細(xì)胞的獲得

首先使學(xué)生掌握目前動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的前言進(jìn)展及主要采用的方法。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖墙虝?huì)學(xué)生用組織塊和消化法兩種方法來獲得小鼠脂肪細(xì)胞，熟練掌握無菌的操作。

1.2培養(yǎng)的小鼠脂肪細(xì)胞的鑒定

通過此部分實(shí)驗(yàn)使學(xué)生了解動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不僅僅是只獲得即為成功，還需要對(duì)所獲得的細(xì)胞進(jìn)行鑒定，才可進(jìn)行后續(xù)研究。因此，此部分教會(huì)學(xué)生不僅用經(jīng)典的染色方法—油紅O染色法進(jìn)行鑒定外，并利用分子生物學(xué)方法（即熒光定量PCR技術(shù)）檢測(cè)成熟脂肪細(xì)胞中脂肪細(xì)胞分化標(biāo)志基因的表達(dá)情況來進(jìn)行進(jìn)一步鑒定。

2實(shí)驗(yàn)教學(xué)探討

2.1開設(shè)本實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的意義

為了更好地適應(yīng)學(xué)科發(fā)展的需要，培養(yǎng)社會(huì)所需的創(chuàng)新型人才，根據(jù)生物技術(shù)專業(yè)的特點(diǎn)，選取重要的細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，并使實(shí)驗(yàn)多元化，結(jié)合新的內(nèi)容來設(shè)計(jì)，將對(duì)學(xué)生動(dòng)手動(dòng)腦能力的提高有很大影響，這種創(chuàng)新性的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)同樣被各大高校所重視。理論課在講述細(xì)胞培養(yǎng)的內(nèi)容時(shí)利用PPT進(jìn)行動(dòng)態(tài)的講解且配合大量的動(dòng)畫，但還是比較抽象，學(xué)生難以理解。本實(shí)驗(yàn)教學(xué)根據(jù)這些特點(diǎn)，緊密結(jié)合理論課內(nèi)容，在細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，同時(shí)將細(xì)胞鑒定實(shí)驗(yàn)（包括細(xì)胞總總RNA提取、反轉(zhuǎn)錄等實(shí)驗(yàn)過程）加入細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，不但向?qū)W生介紹了細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法，而且通過細(xì)胞鑒定向?qū)W生展示了細(xì)胞培養(yǎng)的效果，同時(shí)豐富了細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容。該實(shí)驗(yàn)不僅使學(xué)生們掌握了細(xì)胞培養(yǎng)和鑒定的方法，同時(shí)也使其對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)具有了更加感性、直觀的認(rèn)識(shí)。

2.2實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的問題及解決方法

實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的最大問題就是無菌意識(shí)不強(qiáng)，學(xué)生在超凈工作臺(tái)中比較忙亂，一會(huì)忘記在酒精燈附近操作，一會(huì)槍頭碰到了其他部位。并且在解剖小鼠操作時(shí)剪刀經(jīng)常會(huì)粘到毛毛，造成了所取樣品的污染。在消化法時(shí)消化的時(shí)間掌握不好，造成消化不完全，得到的細(xì)胞較少等問題。最后將鋪滿組織塊的瓶子放在二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí)瓶蓋忘記擰松半圈。

2.3以學(xué)生為主，老師為輔的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式

我們?cè)O(shè)計(jì)的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)設(shè)計(jì)包含細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞鑒定兩部分內(nèi)容，細(xì)胞培養(yǎng)前期準(zhǔn)備工作頗多，并且這些準(zhǔn)備工作是保證實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。為了培養(yǎng)學(xué)生無菌意識(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)所用器皿的清潔消毒、培養(yǎng)基的配制等，都是由學(xué)生利用課余時(shí)間在教師指導(dǎo)下親自動(dòng)手完成的。這樣既培養(yǎng)了學(xué)生的基本操作技能，也增加了學(xué)生的動(dòng)手機(jī)會(huì)。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)同時(shí)具有連續(xù)性強(qiáng)和整體性強(qiáng)的特點(diǎn)，前一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。因此對(duì)學(xué)生的要求有了進(jìn)一步的提高，每個(gè)學(xué)生只有參與整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程，才能獲得最后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在實(shí)驗(yàn)中要注意培養(yǎng)學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中的團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神，發(fā)揮每個(gè)學(xué)生的特長(zhǎng)。

3結(jié)語

本實(shí)驗(yàn)將細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞分子鑒定結(jié)合并應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，突破了原來細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)后僅僅在顯微鏡觀察下觀察的局限，并培養(yǎng)了學(xué)生團(tuán)結(jié)協(xié)作的精神，比如前期準(zhǔn)備不好，后期則無法成功，這極大地提高了學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的興趣。教師在理論授課時(shí)雖然強(qiáng)調(diào)了很多無菌操作的注意事項(xiàng)，但是通過實(shí)驗(yàn)過程中觀察，學(xué)生依然會(huì)遇到很多問題。這就需要教師在學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作過程中實(shí)時(shí)糾正，嚴(yán)格把關(guān)，培養(yǎng)學(xué)生熟練掌握一套標(biāo)準(zhǔn)的無菌操作技術(shù)。然而，提高實(shí)驗(yàn)課程的教學(xué)水平，保證課程的教學(xué)質(zhì)量是一個(gè)不斷提高的探索過程，尚有待于在教學(xué)實(shí)踐過程中不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)、實(shí)踐改進(jìn)，只有這樣才能使細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)日臻完善。

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