連香樹精油對植物病原真菌抑菌作用及對人肝癌細胞株SMMC－7721細胞毒性研究

汪 超，唐 明，魏 琴，馬丹煒，王亞男，張 紅，李 群*

連香樹精油對植物病原真菌抑菌作用及對人肝癌細胞株SMMC－7721細胞毒性研究

汪 超1，唐 明1，魏 琴2，馬丹煒1，王亞男1，張 紅1，李 群1*

(1．四川師范大學生命科學學院，四川成都610101; 2．宜賓學院香料植物資源開發(fā)與利用四川省高校重點實驗室，四川宜賓644000)

首次以連香樹精油作為天然抑菌劑及抑癌劑，檢測連香樹精油對6種植物病原真菌的抑菌作用及對人肝癌細胞株SMMC－7721的細胞毒性，旨在探究連香樹精油在抑菌和抑癌方面的功能，為天然抗菌劑和抗癌藥物的開發(fā)打下基礎．采用改良瓊脂稀釋法測定連香樹精油對6種植物病原真菌的抑制率、最低抑菌體積分數(shù)(MIC)和最小殺菌體積分數(shù)(MBC)，并采用MTT法檢測其對人體肝癌細胞SMMC－7721的細胞毒性．結果表明，連香樹精油具有較好的抗菌性和抗癌性．在抗菌方面，對玉米大斑、黑曲霉以及根霉的抑菌效果較好，抑制率分別達到97．8%、99．7%、99．4%;對禾谷鐮孢菌的抑菌效果較差(最高抑制率僅為29．1%)．在MIC和MBC測定實驗中，同樣表明連香樹精油對黑曲霉的抑菌效果較好(MIC為6．25 μL/mL，MBC為50 μL/mL)．在抑癌方面，連香樹精油對SMMC－7721肝癌細胞具有較好的抑制效果，當精油體積分數(shù)為8 μL/mL時，對SMMC－7721肝癌細胞的抑制率可以達到67．9%，與陽性對照5－氟尿嘧啶(抑制率68．9%)沒有顯著差異，且對正常肝細胞L02的殺傷作用(抑制率18．7%)要遠遠低于5－氟尿嘧啶對其傷害(抑制率59%)．連香樹精油對植物病原真菌和SMMC－7721肝癌細胞具有良好的抑制作用，在農(nóng)藥及醫(yī)藥應用中有較好的應用潛力．

連香樹精油;天然抗菌劑;天然抗癌劑;植物病原真菌;SMMC－7721肝癌細胞

連香樹 (Cercidiphyllum japonicum Sieb．et Zucc．)屬連香樹科連香樹屬，別名五君樹、山白果，為我國首例的二級保護植物，其味芳香，百米可聞，因其大樹越搖越香而得名［1］．目前關于連香樹的研究，主要集中在食品、化工、育苗及觀賞價值等方面［2］．連香樹的化學成分分析及生物活性方面的研究少見報道，特別是產(chǎn)生香味的化學成分——連香樹精油的研究還是空白．

眾所周知，植物病原菌危害是糧食產(chǎn)量降低的主要原因之一［3］．目前在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中主要采用一些化學農(nóng)藥對植物病原菌進行防治，但化學農(nóng)藥具有高毒、容易富集、污染大等缺點［4］．另外，癌癥的治療已成為世界性難題之一，目前治療的手段主要包括放療、化療等一些對人體傷害較大的方式．多年來，研究者們一直在尋求天然殺菌劑和天然抗癌藥物，其中植物精油作為植物活性成分的重要組成部分，研究表明它具有良好的抑菌性［5］、抗癌性［6］、殺蟲作用［7］以及保鮮作用［8］，同時具有毒性較低、污染小等優(yōu)點［9］，因此，近年來以植物精油代替化學藥物抑制植物病原菌和各種癌細胞的報道已逐漸增多．

該文首次以連香樹精油這種天然活性物處理6種植物病原真菌和人體肝癌細胞，探究其抑菌能力和抑癌能力，進而評估其作為天然抑菌和抑癌藥物的可能性，旨在為連香樹精油的開發(fā)和利用奠定基礎．

1 材料與方法

1．1 材料 連香樹精油，由宜賓學院香料植物開發(fā)與利用四川省高校重點實驗室提供;6種供試植物病原真菌分別為玉米大斑(Exserohilum turcicum，ET)、辣椒疫霉(Phytophthora capsici，PC)、禾谷鐮孢菌(Fusarium graminearum，F(xiàn)G)、黑曲霉(Aspergillus

Niger，AN)、根霉(Rhizopus，RP)、假絲酵母(Candida Albicans，CA)，均由本實驗室提供，均采用PDA培養(yǎng)基進行培養(yǎng)保存;人肝癌細胞株SMMC－7721由本實驗室提供，采用RPMI1640培養(yǎng)基進行培養(yǎng)．

1．2 儀器 全波長紫外分光光度計購自MSS型成都軍能海爾思科技有限公司;二氧化碳培養(yǎng)箱，購自賽默Thermo 311成都軍能海爾思科技有限公司;倒置顯微鏡，購自XD－30寧波舜宇儀器有限公司．

1．3 方法

1．3．1 抑菌圈測定 用改良的瓊脂稀釋法對連香樹植物精油的抑菌活性進行定性分析．參照馬萱等［10］的方法，略作改動．用丙酮將連香樹精油稀釋成12．5～200 μL/mL，經(jīng)0．22 μm濾膜過濾除菌，各吸取1～25 mL冷卻至37℃左右的PDA培養(yǎng)基中，搖勻后倒入無菌的平板中冷卻，作為藥用培養(yǎng)基，以加等體積丙酮的PDA培養(yǎng)基為對照．在超凈工作臺上，用接種針分別挑取適量的6種植物病原真菌孢子，置于PDA平板上劃線，放置28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7 d后，加入適量的無菌水沖洗平板，獲得孢子懸浮液，并用無菌水調整孢子懸浮液約為5×104個/mL．吸取200 μL孢子懸浮液至新的PDA平板上，涂布均勻后置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7 d后，用直徑為6 mm的無菌打孔器，分別對其進行打孔，獲得菌餅．將其分別接種到不同體積分數(shù)的藥用培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基上，置28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5 d后，用相交垂直線法測定菌落直徑，3次平行，2個重復．抑制率(%)=(對照菌落直徑－處理菌落直徑)/(對照菌落直徑－6 mm)×100%．

1．3．2 最低抑菌體積分數(shù)(MIC)和最小殺菌體積分數(shù)(MBC)測定 采用二倍稀釋法測定連香樹精油的最小抑菌體積分數(shù)(MIC)和最小殺菌體積分數(shù)(MBC)，對其抑菌活性進行定量分析．用丙酮將精油稀釋至6．25～400 μL/mL，經(jīng)0．22 μm濾膜過濾除菌，各吸取1～25 mL冷卻至37℃左右的PDA培養(yǎng)基中，配制成藥用培養(yǎng)基(丙酮為對照);將各病原菌制備成孢子懸浮液(106～107個/mL)，分別吸取200 μL涂布于藥用培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)5～7 d，以無菌生長時的連香樹精油的體積分數(shù)為最低抑制體積分數(shù)(MIC)［11］;然后用無菌水清洗未長菌的藥用培養(yǎng)基，吸取200 μL加到空白的PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)5～7 d，以無菌生長時的連香樹精油體積分數(shù)為最小殺菌體積分數(shù)(MBC)［11］．

1．3．3 細胞毒性檢測 采用MTT法［12］檢測連香樹精油對人肝癌細胞株SMMC－7721細胞增殖抑制作用．人肝癌細胞株SMMC－7721和正常肝細胞L02用RPMI1640完全培養(yǎng)液(含10%小牛血清，1%青霉素，1%鏈霉素)在37℃、含5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．待其長到對數(shù)生長期時，用0．25%胰蛋白酶消化，調整細胞數(shù)為1×105個/mL，接種到96孔板中，每個孔加98 μL繼續(xù)培養(yǎng)24 h．細胞貼壁后，加入2 μL不同體積分數(shù)的連香樹精油，使其體積分數(shù)分別為0．25，0．5，1．0，2．0，4．0和8．0 μL/mL;以等體積5－氟尿嘧啶(8 mg/mL)為陽性對照，等體積丙酮為陰性對照．培養(yǎng)24 h后，用倒置顯微鏡(10×20倍)觀察各處理梯度的細胞形態(tài)變化，并隨機各取10個視野統(tǒng)計細胞數(shù)目，計算每個視野中細胞平均數(shù)，且進行顯著性分析(P≤0．05)．之后，每孔加20 μL 5 mg/mL MTT(PBS配制)，培養(yǎng)4 h后吸去上清，每孔加150 μL DMSO，在搖床上低速震蕩10 min，充分溶解甲瓚．用全波長紫外分光光度計在490 nm處檢測每孔OD值，計算細胞增殖抑制率，4次平行，2個重復．細胞增殖抑制率%=(陰性對照組平均OD值－處理組平均OD值)/陰性對照組平均OD值×100%．

1．3．4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及處理 實驗所有的數(shù)據(jù)以SPSS 17．0處理分析獲得，均以“平均值±標準誤”來表示;數(shù)據(jù)顯著性(P≤0．05)及極顯著性(P≤0．01)均在Duncan檢測下獲得．

2 結果與分析

2．1 連香樹精油對病原真菌抑制作用

2．1．1 不同體積分數(shù)的精油對菌體的抑制作用不同體積分數(shù)的連香樹精油處理玉米大斑(Exserohilum turcicum，ET)、辣椒霉菌(Phytophthora capsici，PC)、禾谷鐮刀孢菌(Fusarium graminearum，F(xiàn)G)、黑曲霉(Aspergillus nige，AN)、根霉(Rhizopus，RP)以及假絲酵母(Candida Albicans，CA)所獲得的精油體積分數(shù)－菌體生長抑制率趨勢圖見圖1;效果較好的玉米大斑、黑曲霉及根霉的培養(yǎng)基平板圖見圖2．由圖1可知，對玉米大斑而言，隨著精油體積分數(shù)(12．5～100 μL/mL)的增加，菌體生長抑制率逐漸增大，且各體積分數(shù)間呈極顯著差異(P≤ 0．01)(見圖2A);精油體積分數(shù)在100 μL/mL時，其菌體抑制率達到最大，最大值為97．8%(見圖2A－5);精油體積分數(shù)在100～200 μL/mL之間時，隨著精油體積分數(shù)的增加，抑制率反而降低，且各體積分數(shù)間差異顯著(P≤0．05)．在對辣椒霉菌的研究中，隨著精油體積分數(shù)的增加(12．5～200 μL/ mL)，菌體生長抑制率同樣呈正相關增長趨勢，且精油體積分數(shù)在200 μL/mL時，抑制率達到最大(85．7%)，各梯度間呈極顯著差異(P≤0．05)．對于禾谷鐮刀孢菌來說，精油體積分數(shù)在12．5～100 μL/mL之間時，精油體積分數(shù)－菌體生長抑制率呈正相關關系，且精油體積分數(shù)在100 μL/mL時其菌體抑制率達到最大，為29．1%，各梯度間具有極顯著差異(P≤0．01)．精油對黑曲霉抑制效果的評估中，隨著精油體積分數(shù)的增加(12．5～100 μL/ mL)，其菌體生長抑制率亦增加(見圖2B)，且精油體積分數(shù)在100 μL/mL時，抑制率達到最大值，為99．7%(見圖2B－5)，且各梯度間具有極顯著差異(P≤0．01)．對于根霉(見圖2C)而言，精油體積分數(shù)在12．5～100 μL/mL之間，精油體積分數(shù)－菌體生長抑制率呈正相關關系，精油體積分數(shù)100 μL/ mL時菌體抑制率達到最大值，為99．4%(見圖2C)，且各梯度間呈極顯著差異(P≤0．01)．在對假絲酵母的研究中，隨著精油體積分數(shù)的增加(12．5～50 μL/mL)，菌體生長抑制率同樣逐漸增大，且精油體積分數(shù)在50 μL/mL時，抑制率達到最大(43．8%)，相關性分析可知，各梯度間呈極顯著差異(P≤0．01);精油體積分數(shù)在50～200 μL/mL時，隨著精油體積分數(shù)的增加，其菌體抑制率逐漸減小，且各梯度間呈極顯著差異(P≤0．01)．

以上結果表明，連香樹精油對玉米大斑、黑曲霉以及根霉的抑菌效果較好，有待進一步研究其抑制機理．

根據(jù)不同體積分數(shù)連香樹精油對6種受試植物病原真菌抑制率的差異性而做的毒力測定結果見表1．從表1可知，連香樹精油對6種受試植物病原真菌的抑制效果隨精油體積分數(shù)的增大呈現(xiàn)不同的模式．對玉米大斑、辣椒霉菌以及禾谷鐮孢菌而言，隨精油體積分數(shù)的變化抑菌效果成二次函數(shù)模式;而對黑曲霉、根霉和假絲酵母來說，隨精油體積分數(shù)的變化抑菌效果呈非線性增長模式．

另外，從毒力回歸方程可以看出，除禾谷鐮孢菌無對應的EC50值外，其余5種受試植物病原菌均有各自對應的EC50值，說明連香樹精油對禾谷鐮孢菌抑制效果較差，對其他5種受試植物病原菌抑制效果較好．其中玉米大斑與辣椒疫霉EC50值分別為42．5和71．4 μL/mL，且相關系數(shù)(R2)接近1，表明其EC50值可靠性較高;而黑曲霉、根霉、假絲酵母的相關系數(shù)(R2)與1偏差較大，表明其EC50可靠性相對較低．

表1 連香樹精油對6種植物病原真菌的毒力測定結果Table 1 Toxicity of the essential oil from Cercidiphyllum japonicum to 6 phytopathogenic fungi

2．1．2 MIC和MBC測定 不同體積分數(shù)的連香樹精油處理6種植物病原真菌后，所獲得的最低抑制體積分數(shù)(MIC)和最小殺菌體積分數(shù)(MBC)結果見表2．從表中明顯可以看出，連香樹精油對黑曲霉的抑殺作用最強，其MIC為6．25 μL/mL，MBC為50 μL/mL;對禾谷鐮孢菌的抑殺作用最差(MIC和MBC分別為50和200 μL/mL);對其他4種受試植物病原菌的抑菌效果，則介于以上2種病原菌之間．以上結果與抑菌圈測定結果基本一致．

表2 連香樹精油對6種植物病原真菌的抑菌活力Table 2 The antibacterial activity of Cercidiphyllum japonicum oil on 6 phytopathogenic fungi

2．2 連香樹精油對肝癌細胞SMMC－7721的細胞毒性 不同體積分數(shù)連香樹精油對 SMMC－7721肝癌細胞抑制活力見圖3．從圖中可以看出，精油體積分數(shù)為0．25 μL/mL時對SMMC－7721肝癌細胞的抑制作用表現(xiàn)為最低，抑制率為8．37%，與陰性對照丙酮的抑制率(8．23%)差異不大;隨著精油體積分數(shù)的增大，精油對SMMC－7721肝癌細胞的殺傷能力也在逐漸增大，且各梯度之間具有顯著性差異;當精油體積分數(shù)在8 μL/mL時對SMMC－7721肝癌細胞抑制作用最大，抑制率為67．9%，與陽性對照 5－氟尿嘧啶抑癌效果(抑制率68．9%)沒有顯著的差異．另一方面，精油在抑制肝癌細胞生長的同時，也對正常細胞產(chǎn)生一定的毒性．從圖中可以看出，隨著精油體積分數(shù)增大，精油對L02正常肝細胞有一定的毒害作用;在精油體積分數(shù)較低(0～0．5 μL/mL)時，毒害作用與陰性對照丙酮的抑制率(8．23%)相比差異不大;當精油體積分數(shù)(1～8 μL/mL)較高時，精油對肝細胞有一定的毒性，且差異較顯著，當精油體積分數(shù)在8 μL/ mL時毒害作用達到最大(抑制率為18．7%)，但仍遠遠低于陽性對照5－氟尿嘧啶的毒害(抑制率為59%)．

在前面研究結果的基礎上，進一步觀察了8 μL/mL連香樹精油處理SMMC－7721肝癌細胞后細胞形態(tài)的變化，結果見圖4，并對細胞數(shù)目進行了統(tǒng)計，結果見表3．從圖4與表3中可以看出，和對照細胞數(shù)量(320個)(圖4A)相比，8 μL/mL連香樹精油處理后的細胞數(shù)量(125個)(圖4C)和5－ 氟尿嘧啶處理后的細胞數(shù)量(122個)(圖4B)結果相當(P≤0．05)，但明顯低于對照處理細胞數(shù)量，同時細胞形態(tài)也由對照時呈現(xiàn)的長梭狀(圖4A)逐漸改變?yōu)樘幚砗笄蛐?圖4B和4C)．同樣，用8 μL/ mL連香樹精油處理L02正常細胞(圖4F)和未做處理的正常L02細胞(圖4D)相比，細胞數(shù)量分別為165個和206個，具有差異性(P≤0．05)，說明8 μL/mL連香樹精油對L02細胞有一定的傷害作用;另外，比較5－氟尿嘧啶處理L02正常細胞(圖4E)和未做處理的L02正常細胞(圖4D)，發(fā)現(xiàn)5－氟尿嘧啶處理后細胞數(shù)量為76個，這遠低于未做處理的L02對照細胞數(shù)量(206個)(圖4D)與8 μL/mL連香樹精油處理后的細胞數(shù)量(165個)(圖4F)，且差異顯著(P≤0．05)，說明5－氟尿嘧啶對正常L02細胞的傷害作用要遠高于連香樹精油．

表3 8μL/mL連香樹精油處理SMMC－7721肝癌細胞和L02肝細胞其細胞數(shù)量的變化情況Table 3 The human carcinoma cells SMMC－7721 and human hepatic cells L02 of amount with treatment of 8 μL/mL Cercidiphyllum japonicum oil

依據(jù)上述不同體積分數(shù)的連香樹精油處理SMMC－7721肝癌細胞測定的抑癌活力，分析其毒力回歸方程為:y=7．362x+9．712(R2=0．990;其中，IC10為0．039 μL/mL，IC50為5．47 μL/mL，IC90為10．91 μL/mL)，表明連香樹精油具有良好的抑癌活力，加之連香樹精油對L02肝細胞的毒害作用較小，可以初步說明連香樹精油具有開發(fā)成抑制肝癌藥物的潛力．

3 結論與討論

植物精油來源于天然，對人體相對安全，毒性低、易降解、對環(huán)境污染小，研發(fā)成本相對較低，作為一大類天然的殺菌劑和抑癌劑，越來越引起人們的關注［13－14］．目前，連香樹精油是否有抑菌或抑癌作用，還未見報道．該研究以連香樹精油處理6種不同的植物病原菌與SMMC－7721人體肝癌細胞，得到如下結果:在抑菌方面，連香樹精油對6種受試菌均具有一定的抑制作用，尤其對玉米大斑(抑制率為97．8%)、黑曲霉(抑制率為99．7%)以及根霉(抑制率為99．4%)的抑制作用較強．這與張焱珍等［15］的研究結果有一定的差異．張焱珍等［15］以77種植物提取物作為天然抑菌劑處理不同的植物病原菌的研究中指出，龍舌蘭提取物對玉米大斑病菌的抑制率為76．6%，這遠低于本研究結果，可能是不同植物精油的化學成分不同，導致對同一種受試菌的抑菌效果存在差異性;同樣，馬萱等［10］在4種植物芳香精油(法國百里香、蘇格蘭薄荷、甜薰衣草和闊葉迷迭香)對黑曲霉抑菌作用的研究中指出，4種植物芳香精油對黑曲霉均具有抑制力，且法國百里香精油體積分數(shù)為12．5 μL/mL時，對黑曲霉的抑制率高達100%，這與本研究結果基本一致．李欣等［16］在杜仲雄花乙酸乙酯提取物的抑菌活性研究中也報道了杜仲雄花乙酸乙酯提取物對黑曲霉有著較好的抑制作用，但對根霉沒有抑制作用．從以上較多的報道以及結合本研究結果可以得出，大多數(shù)植物精油對玉米大斑、黑曲霉、根霉都有一定的抑菌作用，連香樹精油對這3種受試菌的抑制效果相對較強，均達97%以上，有進一步擴大應用的潛力．究竟連香樹精油是怎樣抑菌或抑菌機理是什么，有待進一步研究．

目前，植物精油抑菌機理的研究可以歸納為以下幾個方面:1)損傷質膜，改變膜的物理參數(shù)和選擇通透性，導致其孢子失去萌發(fā)力，并抑制菌絲體生長［17］．2)上調nox1基因的表達從而產(chǎn)生大量的抑制霉的活性氧(ROS)［18］．3)影響脂質層穩(wěn)定，溶解胞體中的脂肪體及能量代謝及還原酶系［19］．因此，本研究中，連香樹精油的抑菌機理是否是以上的某一方面或有另外的抑菌機理，還有待下一步的研究．在抑癌方面，首先，本研究得出連香樹精油在體積分數(shù)較高(8 μL/mL)時，可以明顯殺傷SMMC－7721肝癌細胞，且與陽性對照(5－氟尿嘧啶)殺傷癌細胞的差異不大．T．T．Zhang等［20］以懸鉤子植物提取物作為抑癌劑處理肺癌細胞A549，發(fā)現(xiàn)200 μg/mL的懸鉤子植物提取物抑癌效果最為明顯，抑制率可以達到60%．這與本研究結果有一定的相似性，充分說明了很多植物精油均具有較強的抑癌效果．其次，本研究同樣得出，連香樹精油對正常細胞L02的毒殺能力較低，這與于冬梅［21］的研究結果具有一定的相似性．于冬梅等［21］在云南松松塔提取物對人肝癌細胞增殖的研究中，指出云南松松塔乙醇提取物(YN－DEF)具有良好抑制肝癌細胞增殖的作用，但對正常肝細胞L02的毒性較小．同樣，張瑞晨等［22］在何首烏不同分離部位對人正常肝L02細胞和肝癌HepG2細胞殺傷作用的研究中指出，何首烏提取物對肝L02細胞殺傷作用較?。Y合本研究可以說明，植物精油要比傳統(tǒng)的化學藥劑對正常細胞的殺傷作用要小得多，這無疑是將天然植物精油開發(fā)為抗癌劑的一大優(yōu)勢．

本研究以連香樹精油作為天然抑菌劑及抑癌劑處理6種植物病原真菌和SMMC－7721肝癌細胞，結果表明連香樹精油具有較高的抑菌性和抑癌性，為其進一步在抑菌、抑癌藥物方面的應用和開發(fā)打下了基礎．

致謝 四川師范大學實驗技術與管理項目(SYJS2015－05)對本文給予了資助，謹致謝意．

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Evaluation of Antibacterial and Cytotoxic Activity of Cercidiphyllum japonicum Oil Against Phytopathogenic Fungi and Humanhepatocellular Carcinoma Cells SMMC-7721

WANG Chao1，TANG Ming1，WEI Qin2，MA Danwei1，WANG Yanan1，ZHANG Hong1，LI Qun1

(1．College of Life Science，Sichuan Normal University，Chengdu 610101，Sichuan; 2．Key Lab of Aromatic Plant Resources Exploitation and Utilization in Sichuan Higher Education，Yibin College，Yibin 644000，Sichuan)

This is the first study to use Cercidiphyllum japonicum oil as natural antimicrobial agents and anticancer drugs．To detect the antibacterial activity of Cercidiphyllum japonicum oil on the 6 kinds of phytopathogenic fungis as well as the cytotoxic function against human carcinoma cells，SMMC-7721，this study explores the efficacy of Cercidiphyllum japonicum oil on antibacterial and antitumor properties and lays the foundation for the development of natural antimicrobial agents and anticancer drugs．Using the modified agar diffusion method，the inhibitory rate，the minimal inhibitory concentration(MIC)and the minimal bactericidal concentration(MBC) of concentration(MIC)against the 6 kinds of pathogenic fungi have been investigated．In order to detect the relevant cytotoxic effects on human carcinoma cells，SMMC-7721，the MTT method is used．The Cercidiphyllum japonicum oil has an incredible effect on the antimicrobial and anticancer properties．In terms of the antibacterial aspect of Setosphaeria，the Exserohilum turcicum，Aspergillus Niger and Rhizopus，had better inhibitory effects，with the inhibition rates reaching 97．8%，99．7%and 99．4%，respectively．However，the Fusarium graminearum showed a poorer effect(with the highest inhibition rate reaching only 29．1%)．The result from the experiment of the 6 kinds of pathogenic fungi with the method of MIC and MBC also shows that Cercidiphyllum japonicum oil performs well when dealing with Aspergillus Niger(MIC is 6．25 μL/mL，MBC is 50 μL/mL)．The Cercidiphyllum japonicum oil also has good inhibition effects on human carcinoma cells，SMMC-7721．When the concentration is 8 μL/mL，the inhibition rates can reach up to 67．9%．No significant differences have been found when it was compared to positive control 5-fluorouraci(inhibition rate 59%)．Cercidiphyllum japonicum oil has an excellent inhibitory effect on phytopathogenic fungi and human carcinoma cells，SMMC-7721，which indicates a high potential in the future，in the areas of pesticide and medicine．

Cercidiphyllum japonicum oil;natural antimicrobial agent;natural anticancer drugs;phytopatho-genic fungi;SMMC-7721 carcinoma cells

Q939．95

A

1001－8395(2016)05－0735－08

10．3969/j．issn．1001－8395．2016．05．021

(編輯 李德華)

2015－09－06

四川省高校重點實驗室開放基金(2015XLY006)

*通信作者簡介:李 群(1971—)，女，副教授，主要從事植物細胞工程的研究，E－mail:Liqun01234@163．com