胃蛋白酶原聯(lián)合幽門螺旋桿菌IgG抗體對胃癌早期診斷的價值

謝 慶, 陳衛(wèi)剛, 齊翠花, 劉 芳, 喬 琨

石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院消化內科,新疆 石河子832008

胃蛋白酶原聯(lián)合幽門螺旋桿菌IgG抗體對胃癌早期診斷的價值

謝 慶, 陳衛(wèi)剛, 齊翠花, 劉 芳, 喬 琨

石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院消化內科,新疆 石河子832008

目的 探討胃蛋白酶原(Pepsinogens, PG)聯(lián)合幽門螺旋桿菌(H.pylori)IgG抗體對胃癌早期診斷價值。方法 選取2015年1月-2015年12月于石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院住院部及門診就診并行胃鏡檢查的患者資料，其中淺表性胃炎組40例、輕度萎縮性胃炎組40例、胃癌前病變組40例、胃癌組40例，經(jīng)免疫印跡法測血清H.pyloriIgG抗體，免疫放射法測定各組PG濃度。結果 與淺表性胃炎組及輕度萎縮性胃炎組比較，胃癌前病變組及胃癌組中PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與淺表性胃炎組比較，胃癌前病變組及胃癌組中H.pyloriIgG抗體陽性率升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；H.pyloriIgG抗體陽性組PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值明顯低于陰性組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。H.pyloriIgG抗體陽性組PGⅡ值明顯高于陰性組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。PG與H.pyloriIgG抗體聯(lián)合檢測提高了胃癌診斷的靈敏度。結論 PG和H.pyloriIgG抗體與胃癌關系密切，兩者聯(lián)合檢測對胃癌早期診具有重要的臨床意義。

胃蛋白酶原;幽門螺旋桿菌IgG抗體;胃癌;早期診斷

胃癌作為我國高發(fā)的惡性腫瘤，早期診斷及治療是提高胃癌治愈率及生存期，降低病死率的關鍵。1962年日本胃癌研究會證實提出早期胃癌的概念，這是胃癌診斷和治療的里程碑事件，使胃癌達到臨床治愈、獲得長期存活成為可能[1]，但早期胃癌缺乏一定的特異性癥狀和體征，早期診斷率低，雖然電子胃鏡及病理檢查是最可靠的診斷方法，但由于具有較差的依從性，不適用于大規(guī)模的普查，因此，我們迫切地需要發(fā)現(xiàn)一些生物指標來提高早期胃癌的診斷率。研究發(fā)現(xiàn)，血清胃蛋白酶原(Pepsinogens,PG)可反映胃黏膜的形態(tài)和功能，可作為胃癌和癌前病變高危人群的血清篩查指標，起到血清學活檢的作用[2-3]。近年來一些歐洲國家和日本應用PG和幽門螺旋桿菌(H.pylori)IgG抗體篩查胃癌，已成為令人矚目的新方法[4-5]。本文通過2015年1月-2015年12月于石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院就診并行電子胃鏡檢查的患者資料進行分析，進一步研究PG及H.pyloriIgG抗體與胃癌的關系，探討二者聯(lián)合對胃癌早期診斷的價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2015年1月-2015年12月于石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院就診并行電子胃鏡檢查的患者資料，確保入選患者1個月內無特殊用藥史(如質子泵抑制劑、H2受體拮抗劑、抗H.pylori藥物等)，根據(jù)病理結果分為4組：淺表性胃炎組(包括正常者)40例、輕度慢性萎縮性胃炎組40例、胃癌前病變組(包括中-重度萎縮性胃炎伴腸化、低級別上皮內瘤變)40例、胃癌組(包括高級別上皮內瘤變)40例。其中淺表性胃炎組男18例、女22例，平均年齡(56.6±1.2)歲；輕度萎縮性胃炎組男22例、女18例，平均年齡(57.2±2.2)歲；癌前病變組男21例、女19例，平均年齡(62.2±1.8)歲；胃癌組男25例、女15例，平均年齡(62.9±1.3)歲。各組年齡、性別比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 清晨采用一次性靜脈采血針于患者正中靜脈抽取空腹靜脈血4 ml，靜置30 min后按轉速1 000 r/min離心10 min分離出血清，將血清放入-80 ℃冰箱保存，嚴格按照試劑說明書進行檢測。PG定量檢測使用上海透景科技股份有限公司Luminex200；H.pylori抗體定性檢測使用深圳市伯勞特生物制品有限公司的H.pylori抗體分型檢測試劑盒(免疫印跡法)。分別測出PGⅠ、 PGⅡ值，再計算出兩者比值。

2 結果

2.1 各組PG檢測結果比較 與淺表性胃炎組、輕度萎縮性胃炎組比較，胃癌前病變組及胃癌組中PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其余各組間PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。與淺表性胃炎相比，胃癌組PGⅡ值升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其他三組間比較，PGⅡ值差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

組別PGⅠ(μg/L)PGⅡ(μg/L)PGⅠ/PGⅡ淺表性胃炎組112．78±35．7720．58±15．006．86±1．71輕度萎縮性胃炎組97．70±28．3621．45±16．465．63±1．53癌前病變組78．79±25．87▲18．32±14．354．36±1．76▲胃癌組64．81±28．29▲26．72±16．78?2．51±0．98▲

注：與淺表性胃炎組、輕度萎縮性胃炎組比較， ▲P<0.05；與淺表性胃炎組比較，*P<0.05。

2.2 各組H.pyloriIgG抗體檢測結果比較 與淺表性胃炎組(47.50%，19/40)比較，癌前病變組(62.50%,25/40)及胃癌組(65.00%,26/40)中H.pyloriIgG抗體陽性率明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。輕度萎縮性胃炎組(55.00%,22/40)抗體陽性率較淺表性胃炎組高，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。其余各組間比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

2.3H.pyloriIgG抗體陽性組與H.pyloriIgG抗體陰性組比較 將所有病例作為一個整體分為H.pyloriIgG抗體陽性組與H.pyloriIgG抗體陰性組。H.pyloriIgG抗體陽性組PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ值較陰性組降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。陽性組PGⅡ值較陰性組升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,見表2)。

組別PGⅠ(μg/L)PGⅡ(μg/L)PGⅠ/PGⅡH．pyloriIgG抗體陰性組121．13±32．64▲19．44±10．31▲7．03±1．83▲H．pyloriIgG抗體陽性組99．76±23．4120．65±11．345．74±2．06

注：與H.pyloriIgG抗體陽性組比較， ▲P<0.05。

2.4 PG和H.pyloriIgG抗體聯(lián)合檢測在胃癌及胃癌前病變組診斷的效果評價 PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/ PGⅡ、H.pyloriIgG抗體在胃癌及胃癌前病變組檢測的敏感性分別為68.4%、67.3%和57.4%，特異性分別為39.8%、41.0%和46.9%，PG和H.pyloriIgG抗體聯(lián)合檢測的敏感性和特異性分別為91.0%和43.1%。

3 討論

胃癌起病隱匿，早期不易發(fā)現(xiàn)，目前胃癌的診斷仍需行電子胃鏡及病理檢查確診，但大規(guī)模的電子胃鏡檢查進行胃癌篩查費用較高,患者依從性較低，因此，找出無創(chuàng)性胃癌篩查的血清學指標，開展高危人群篩查，鼓勵亞健康人群主動進行電子胃鏡檢查，逐步提高胃癌檢出率，成為我國胃癌防治的重點。目前，胃黏膜“血清學活檢”在早期胃癌及胃癌前疾病篩查中的作用受到越來越多的關注和肯定，利用“血清學活檢”進行胃癌人群篩查具有多種優(yōu)勢，如簡便易行，結果客觀；無創(chuàng)，受檢者依從性好；快速高效、高通量檢測等[6]。PG屬于天冬氨酸水解蛋白酶，在胃酸等酸性環(huán)境下被激活，轉化為具有消化功能的胃蛋白酶，主要有PGⅠ、 PGⅡ兩種。PGⅠ存在于胃體、胃底腺的主細胞和頸黏液細胞，PGⅡ存在于胃體、胃竇、十二指腸近端和十二指腸腺(Brunner腺)。PG經(jīng)細胞分泌后除了大部分直接進入人體消化道外，大約1%透過胃黏膜毛細血管進入血液系統(tǒng),從而能夠從血液系統(tǒng)中被檢測出。因此，通過血清PG原檢測可以判斷胃黏膜是否發(fā)生病變[7-8]。H.pylori感染是慢性活動性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關淋巴組織淋巴瘤和胃癌的相關致病因素，有資料顯示，H.pylori感染時胃內亞硝胺等增多，導致DNA損傷修復失敗，而出現(xiàn)腸上皮化生及異型增生，使具有惡性潛能細胞易于向惡性轉化，誘發(fā)癌性病變[9]。且研究已經(jīng)證實H.pylori分泌的細胞因子IL-1β可誘導Claudin-18表達量減少，從而促進炎癥、生化及胃癌的形成[10]。

從淺表性胃炎、萎縮性胃炎、癌前病變再到胃癌的量變到質變是一個多階段漸進性過程，而這些變化過程均與血清PGⅠ及PGⅠ/ PGⅡ值變化相關[11]，從表1可以看出，伴隨著胃癌的演變過程PGⅠ及PGⅠ/ PGⅡ數(shù)值也呈下降趨勢，這與有關文獻報道一致[12]，與淺表性胃炎組及輕度萎縮性胃炎組比較，癌前病變組及胃癌組中PGⅠ、PGⅠ/ PGⅡ值降低，差異有統(tǒng)計學意義，這與胃黏膜萎縮腸化導致的主細胞分泌PGⅠ減少有關。但在本研究中與淺表性胃炎比較，胃癌組PGⅡ值升高，差異有統(tǒng)計學意義，說明結合PGⅡ對于胃癌的診斷也具有一定意義，這與Cao等[13]研究相符，報道認為PGⅡ與胃癌風險獨立相關，可能是診斷胃癌更好的標志物?；蚨鄳B(tài)性與胃癌易感性的關系研究[14]顯示，PGⅡ基因的插入/缺失多態(tài)性與胃癌易感性高度相關。在以往的研究中可能忽視了PGⅡ的血清學活檢作用，以往認為PGⅡ值在胃癌中無明顯變化甚至數(shù)值升高是因為分泌PGⅡ的腺體廣泛，胃底腺黏膜出現(xiàn)萎縮所致的胃底腺減少對PGⅡ影響不大。與H.pyloriIgG抗體陰性組相比較，陽性組PGⅡ值較陰性組升高，差異有統(tǒng)計學意義，分析原因可能為PGⅡ水平受H.pylori感染等因素影響[15]，而PGⅡ值在胃癌前病變組與其他各組比較無明顯差異，考慮與各組間H.pylori感染率不同及此次研究樣本量較小相關。因此PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ水平的下降與PGⅡ水平的升高均是胃癌的重要血清學檢測指標。血清PGⅡ作為胃黏膜分化成熟的標志，其表達水平有望成為胃疾病篩查及早期診斷的一個重要檢測指標，尤其是對H.pylori感染相關胃疾病具有較好的提示作用[15]，但目前對PGⅡ的研究較少，目前缺乏大規(guī)模的研究來制定胃癌的敏感數(shù)值水平。

由中華醫(yī)學會消化病學分會H.pylori組進行的一個涉及全國20個省市、40個中心自然人群的H.pylori感染流行病學調查顯示：我國H.pylori感染率為40%～90%，平均感染率為59%；現(xiàn)癥感染率為42%～64%，平均感染率為55%；人群總感染率高于發(fā)達國家50%[16]。國外研究報道約80%的中-重度萎縮性胃炎患者可檢測到H.pylori抗體[16]，目前H.pylori感染的診斷方法有多種，Kokkola等[17]分別以組織學方法、13C-尿素呼氣試驗及血清學試驗檢測患者的H.pylori感染情況，結果顯示3種方法的感染陽性率分別為30%、28%和82%，表明前兩種方法只能檢測出H.pylori的現(xiàn)癥感染，低估了H.pylori感染在輕度萎縮性胃炎及胃癌發(fā)生中起到的作用。本研究采用免疫印跡法測定H.pyloriIgG抗體，淺表性胃炎、輕度萎縮性胃炎、癌前病變及胃癌的感染率逐漸升高，與淺表性胃炎組相比較，癌前病變組及胃癌組中H.pyloriIgG抗體陽性率明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義，因此H.pyloriIgG抗體可作為胃癌早期篩查的指標，但與輕度萎縮性胃炎組比較，胃癌前病變組及胃癌組中H.pyloriIgG抗體陽性率之間無明顯差異，H.pyloriIgG抗體預測胃癌的特異性較PG明顯下降，因此H.pyloriIgG抗體單獨作為診斷胃癌的血清學指標效果欠佳。

本研究顯示，H.pyloriIgG抗體陽性組與陰性組的PGⅠ、PGⅡ及PGⅠ/PGⅡ值，發(fā)現(xiàn)H.pylori感染與PG具有密切關系，H.pylori感染的患者血清中PGⅠ及PGⅠ/ PGⅡ值較未感染H.pylori的患者水平低，差異有統(tǒng)計學意義。分析原因為H.pylori能降低黏膜屏障功能，影響胃腸黏膜細胞分泌，導致PG大量進入血循環(huán)，從而改變血清PG水平[18]。H.pylori長期感染，發(fā)展至胃癌前病變或胃癌時，胃蛋白酶基因發(fā)生突變，從而失去分泌PGⅠ的能力，所以導致PGⅠ及PGⅠ/ PGⅡ值降低[19]。血清中PG指標及H.pylori感染均與胃癌具有相關性，可作為胃癌的篩查指標，而H.pylori感染與PG兩者又具有密切關系，因此建議兩者聯(lián)合檢測，本文對于兩者的檢測效果進行評價，可見單個指標對胃癌的診斷靈敏度不高，而聯(lián)合檢測的靈敏度明顯提高，對胃癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療有重要意義，但聯(lián)合檢測的特異性并沒有明顯提高，分析原因可能與本次研究樣本量較小有關，另由于目前沒有對PGⅡ的大規(guī)模研究制定敏感界值，本研究并沒有聯(lián)合檢測靈敏度及特異度。

總之，本研究結果表明，血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ值降低是胃腺體萎縮的標志，PGⅡ水平升高是胃癌的獨立危險因素，H.pylori感染也是胃癌的致病因素，而H.pylori感染又與PG水平的變化具有相關性，兩者共同檢測可提高診斷的靈敏度。血清學檢測具有簡便、創(chuàng)傷性小、經(jīng)濟等臨床優(yōu)勢，對于人群進行PG與H.pylori抗體聯(lián)合檢測進行篩查，篩選出胃癌高危人群，對高危人群再輔以電子胃鏡及病理檢查，對高危人群而病理陰性者可進行隨訪，從而提高早期胃癌的診斷率。

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(責任編輯：馬 軍)

Value of serum Pepsinogen and anti-H.pyloriIgG in early diagnosis of gastric cancer

XIE Qing, CHEN Weigang, QI Cuihua, LIU Fang, QIAO Kun

Department of Gastroenterology, the First Affiliated Hospital of Medical College of Shihezi University, Shihezi 832008, China

Objective To investigate the value of serum Pepsinogens (PG) combined with anti-H.pyloriIgG in early diagnosis of gastric cancer.Methods The patients who underwent electronic gastroscopy from Jan. 2015 to Dec. 2015 in the First Affiliated Hospital of Medical College of Shihezi University were chosen, including superficial gastritis group (40 cases), mild atrophy gastritis group (40 cases), gastric precancerous state group (40 cases) and gastric cancer group (40 cases). SerumH.pyloriIgG antibody was detected by Western blotting, pepsinogen concentration in each group was detected by Immuno Assay.Results Compared with superficial gastritis group and mild atrophy gastritis group, serum PGⅠand PGⅠ/ PGⅡvalues in both gastric precancerous state group and gastric cancer group were decreased significantly (P<0.05). Compared with superficial gastritis group, the positive rate of anti-H.pyloriIgG in both gastric precancerous state group and gastric cancer group was increased (P<0.05); PGⅠ, PGⅠ/ PGⅡvalues in anti-H.pyloriIgG positive group were significantly lower than those in the negative group (P<0.05). The PGⅡ in anti-H.pyloriIgG positive group was significantly higher than that in the negative group (P<0.05). Pepsinogen and combined detection ofH.pyloriIgG antibody enhanced the sensitivity of diagnosis of gastric cancer.Conclusion Pepsinogen and anti-H.pyloriIgG are closely related with gastric cancer, the combined detection for early diagnosis of gastric cancer has important clinical significance.

Pepsinogen; Anti-H.pyloriIgG; Gastric cancer; Early diagnosis

10.3969/j.issn.1006-5709.2016.11.010

國家級基金:新疆哈薩克族食管鱗癌差異基因的篩選及初步鑒定 (81260362); 地級市基金:內鏡下消化道腫瘤早期診斷與治療的應用研究 (gxjs2012-zdgg01)

謝慶，2013級研究生,研究方向：消化系統(tǒng)疾病。E-mail:280160645@qq.com

陳衛(wèi)剛，主任醫(yī)師，研究方向：消化系統(tǒng)疾病。E-mail:13579456959@126.com

R735.2

A

1006-5709(2016)11-1244-04

2015-11-01