木薯/花生間作對其根際土壤微生物數(shù)量、群落結構及多樣性的影響

徐海強 黃潔 劉子凡 魏云霞 蘇必孟 李天

摘要：【目的】研究木薯或花生單作與木薯/花生間作對木薯和花生根際土壤細菌、真菌數(shù)量與群落結構及多樣性的影響，為從根際微生態(tài)角度闡釋木薯與花生的地下部互作機制提供科學依據(jù)?！痉椒ā吭O木薯單作、花生單作和木薯/花生間作3個處理，采用實時熒光定量PCR（Real-time PCR）分別測定單作與間作的根際土壤細菌和真菌數(shù)量，并通過變性梯度凝膠電泳（DGGE）進行細菌和真菌群落結構及多樣性分析?！窘Y果】不論單作或間作，木薯和花生根際土壤細菌、真菌數(shù)量均隨著生育期的延長呈先增長后下降的變化趨勢，在木薯塊根形成期和花生結莢期達到峰值。木薯/花生間作后期根際土壤細菌與真菌數(shù)量的比值（B/F）提高，有利于木薯和花生的根際土壤向細菌型轉化，且間作木薯根際土壤B/F比間作花生分別提高了1.02和1.25倍。在木薯塊根形成期和花生結莢期，與單作相比，間作的DGGE圖譜特異條帶數(shù)有所改變，多樣性指數(shù)有所降低，但與單作多樣性指數(shù)差異不明顯?！窘Y論】木薯/花生間作有利于木薯和花生根際土壤向高肥力的細菌型轉化，且間作同時可改變木薯和花生根際土壤細菌和真菌的群落結構，但對其多樣性影響不明顯。

關鍵詞： 木薯；花生；間作；根際土壤；細菌；真菌

中圖分類號： S344.2；S154.3 文獻標志碼：A 文章編號：2095-1191（2016）02-0185-06

0 引言

【研究意義】微生物是土壤生態(tài)系統(tǒng)的重要組成之一，對有機質分解、養(yǎng)分循環(huán)及利用、生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和可持續(xù)性起著重要作用（賈志紅等，2004）。有研究指出，根際土壤微生物群落的組成和變化對調節(jié)土壤肥力有重要影響（賈志紅等，2004；曹均等，2010），而土壤肥力又直接影響作物的生產力。木薯是我國熱帶亞熱帶地區(qū)的重要能源和淀粉作物，因其生育期較長，行距較寬，適宜與生育期較短且植株矮小的花生進行間套作種植（韓全輝等，2014）。木薯/花生間作模式已成為我國熱帶亞熱帶地區(qū)特有的間作搭配模式（韓全輝等，2014），該模式可充分利用現(xiàn)有土地資源并增加農民的經濟收益（唐秀梅等，2015）。因此，研究木薯/花生間作對根際微生物數(shù)量、群落結構和多樣性的影響，對促進木薯種植及其產業(yè)發(fā)展具有重要意義?！厩叭搜芯窟M展】國內關于間作模式的研究正在從地下部營養(yǎng)吸收（漆智平等，1999）、葉片光合生理（唐秀梅等，2011；韓全輝等，2014）、模式搭配和產量效益（徐小林等，2012）等向根際土壤微生態(tài)方面轉移（宋亞娜等，2006；何國艷等，2012；沈雪峰等，2014；唐秀梅等，2015）。宋亞娜等（2006）研究表明，小麥/蠶豆、玉米/蠶豆和小麥/玉米間作模式能改變土壤微生物群落組成，提高作物根際細菌群落多樣性，表現(xiàn)出不同程度的產量優(yōu)勢；沈雪峰等（2014）研究發(fā)現(xiàn)，甘蔗/花生間作能顯著提高甘蔗和花生根際土壤細菌和真菌數(shù)量，改良土壤微生物狀況；唐秀梅等（2015）在研究木薯/花生間作對土壤微生態(tài)的影響時發(fā)現(xiàn)，間作能增加木薯和花生根際土壤細菌和真菌數(shù)量及微生物多樣性。【本研究切入點】目前，有關木薯/花生間作對不同生育期木薯和花生根際土壤微生物數(shù)量、群落結構及多樣性影響的研究鮮見報道?！緮M解決的關鍵問題】采用實時熒光定量PCR（Real-time PCR）和變性梯度凝膠電泳（DGGE），研究木薯單作、花生單作、木薯/花生間作對木薯和花生根際土壤細菌、真菌數(shù)量與群落結構及多樣性的影響，為從根際微生態(tài)角度闡釋木薯與花生的地下部互作機制提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 供試材料

供試木薯品種為華南8號，由中國熱帶農業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所選育提供；花生品種為賀油12，由廣西賀州市農業(yè)科學研究所提供。

1. 2 試驗方法

試驗于2014年3～7月在中國熱帶農業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所木薯試驗基地進行。前茬作物為木薯。0～20 cm土層基本理化性質：pH 5.19，有機質含量0.97%，堿解氮含量48.08 mg/kg，速效磷含量24.72 mg/kg，速效鉀含量62.87 mg/kg，細菌含量2.5×108 CFU/g，真菌含量0.69×106 CFU/g。

1. 2. 1 試驗設計 試驗設木薯單作、花生單作和木薯/花生間作3個處理，隨機區(qū)組排列，3次重復，共9個小區(qū)，每小區(qū)面積30.8 m2（5.5 m×5.6 m）。木薯株行距為0.8 m×1.1 m，花生株行距為0.2 m×0.3 m。間作小區(qū)中在2行木薯行中間種植2行花生，木薯行與花生行的距離均為0.4 m。2014年3月25日種植木薯和花生，東西行向種植，木薯種莖芽眼朝東。本試驗不施肥料，田間管理一致。

1. 2. 2 取樣 分別于5月15日（木薯苗期、花生花針期）、6月15日（木薯塊根形成期、花生結莢期）和7月15日（木薯塊根膨大期、花生成熟期）在各小區(qū)內沿東往西行向取根際土壤樣品。取樣時，不取邊列效應的第1、3、5、7列木薯，按次序取第2、4、6列木薯；在同一列中，排除兩側邊行的各1株木薯，每次只取各列中間的3株木薯及與取樣木薯對應的最近1株花生。將整株木薯和花生挖出，輕抖根系，用毛刷將根際土輕輕刷下，得到根際土壤樣品；分別將每小區(qū)中的3株木薯和3株花生的根際土壤各混合為一個樣品。在單作系統(tǒng)中，木薯根際土壤用MC（Monocropping cassava）表示，單作花生根際土壤用MP（Monocropping peanut）表示；在間作系統(tǒng)中，木薯根際土壤用IC（Intercropping cassava）表示，花生根際土壤用IP（Intercropping peanut）表示。對土壤樣品迅速過篩除去雜物，-80 ℃保存，用于基因組DNA的提取。

1. 3 測定項目及方法

1. 3. 1 土壤樣品細菌、真菌數(shù)量的測定 每份土壤樣品稱取0.3 g，按照美國MoBio的土壤提取試劑盒說明提取土壤樣品中微生物總DNA，于-20 ℃保存?zhèn)溆?。利用Real-time PCR測定根際土壤樣品中細菌、真菌數(shù)量（Fierer et al.， 2005）。用含大腸桿菌16S全長和釀酒酵母18S全長的質粒為標準品，稀釋成不同梯度后，用Real-time PCR繪制成標準曲線。細菌、真菌定量擴增引物見表1，分別為Eub338/Eub518、5.8S/ITS1f。根據(jù)所得樣品Cq值，計算每克土壤所含微生物數(shù)量。

1. 3. 2 土壤微生物群落結構和多樣性分析

1. 3. 2. 1 PCR擴增 采用細菌PCR擴增的通用引物Eub338/Eub518和真菌PCR擴增的18S rDNA通用引物NS1/Fungi（沈宗專等，2015）（表1）。PCR反應體系50 μL：1 μL模板DNA，25 μL Premix，上、下游引物各1 μL，22 μL ddH2O。擴增程序：95 ℃預變性5 min；95 ℃ 30 s，細菌59.0 ℃（真菌56.4 ℃） 45 s，72 ℃ 300 s，進行30個循環(huán)；72 ℃延伸10 min，4 ℃保存。

1. 3. 2. 2 變性梯度凝膠電泳（DGGE） 采用D-Code基因突變檢測系統(tǒng)對PCR產物進行DGGE分析。聚丙烯酰胺凝膠濃度8%，細菌變性劑濃度40%～60%，真菌變性劑濃度20%～40%。電泳條件：在80 V電壓下，60 ℃電泳14 h，電泳結束后進行銀染并拍照。Shannon-

Wiener指數(shù)是目前應用最廣泛的可以反映土壤微生物群落結構多樣性的指數(shù)之一（Larkin， 2003），因此，采用Shannon多樣性指數(shù)（H）表征土壤微生物群落多樣性。

H=-ΣPi lnPi

式中，Pi=ni /N，ni是第i條條帶的多度，N為樣品中所有條帶的總多度。

1. 4 統(tǒng)計分析

采用Excel 2007和SAS 9.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

2. 1 木薯/花生間作對木薯根際土壤細菌和真菌數(shù)量的影響

由表2可看出，在木薯生育期內，不論單作或間作，木薯根際土壤細菌和真菌數(shù)量均隨生育期的延長呈先增長后下降的變化趨勢，在木薯塊根形成期達到峰值，且塊根形成期的細菌和真菌數(shù)量均顯著高于苗期和塊根膨大期（P<0.05，下同）。間作與單作相比，木薯塊根膨大期間作的木薯根際土壤細菌數(shù)量比單作提高了59.4%；木薯塊根形成期和膨大期間作的木薯根際土壤真菌數(shù)量分別比單作降低了33.8%和10.0%。從細菌與真菌數(shù)量的比值（B/F）來看，木薯苗期間作的木薯根際土壤B/F低于單作12.9%，但在木薯塊根形成期和膨大期，間作的木薯根際土壤B/F分別比單作高25.0%和66.4%。由此可見，在木薯與花生的共生期內，木薯/花生間作有利于木薯根際土壤向細菌型轉化。

2. 3 木薯/花生間作對其根際土壤細菌群落結構和多樣性的影響

在木薯塊根形成期及花生結莢期，單作或間作對木薯和花生根際土壤細菌群落結構的影響如圖1所示。不論單作或間作，木薯和花生樣品的整條泳道含有條帶數(shù)為12～14條；與木薯單作（MC）相比，木薯間作（IC）消失了條帶1，增加了條帶2，且條帶3和4亮度增加，條帶5亮度減弱；與花生單作（MP）相比，花生間作（IP）消失了條帶6、8和9，增加了條帶7和10。由此可見，在木薯塊根形成期及花生結莢期，木薯/花生間作明顯改變了木薯和花生根際土壤細菌群落結構。

對圖1中的條帶進行Shannon-Wiener指數(shù)分析，結果顯示，分別與木薯單作（MC）和花生單作（MP）相比，木薯間作（IC）和花生間作（IP）的根際土壤細菌H分別降低了5.6%和5.7%。由此可見，在木薯塊根形成期及花生結莢期，與單作相比，木薯/花生間作使木薯和花生根際土壤細菌多樣性指數(shù)有所降低，但與單作多樣性指數(shù)差異不明顯。

2. 4 木薯/花生間作對根際土壤真菌群落結構和多樣性的影響

在木薯塊根形成期及花生結莢期，單作或間作對木薯和花生的根際土壤真菌群落結構的影響如圖2所示。不論單作或間作，木薯和花生樣品的整條泳道含有條帶數(shù)為10～15條；與木薯單作（MC）相比，木薯間作（IC）消失了條帶4，增加了條帶3、5和6，條帶1和2亮度減弱；與花生單作（MP）相比，花生間作（IP）消失了條帶7、8、9和10。說明在木薯塊根形成期及花生結莢期，木薯/花生間作明顯改變了木薯和花生根際土壤真菌群落結構。

對圖2中的條帶進行Shannon-Wiener指數(shù)分析，結果顯示，與木薯單作（MC）和花生單作（MP）相比，木薯間作（IC）和花生間作（IP）的根際土壤真菌H分別降低了2.9%和16.7%。由此可見，在木薯塊根形成期及花生結莢期，與單作相比，木薯/花生間作使木薯和花生根際土壤真菌多樣性指數(shù)有所降低，但與單作多樣性指數(shù)差異不明顯。

3 討論

3. 1 間作對根際土壤細菌和真菌數(shù)量的影響

本研究結果表明，不論單作或間作，木薯和花生的根際土壤細菌、真菌數(shù)量均隨著生育期的延長呈先增長后下降的變化趨勢，在木薯塊根形成期和花生結莢期達到峰值。木薯塊根形成期是木薯塊根快速發(fā)育形成的關鍵時期，花生結莢期是花生根系生長最旺盛的時期，說明木薯和花生的根際微生物數(shù)量與其根部發(fā)育情況密切相關，塊根或根系生長旺盛時，其根際微生物數(shù)量相應增加。相關研究表明，甜菜（張亞平和劉日明，1999）、棉花（張鳳華等，2000）和黃瓜（胡元森等，2004）的根際微生物數(shù)量與相應生育期的根系生長呈正相關，與本研究結果基本一致。B/F是土壤向細菌型轉化和肥力提高的一個生物學標志（李瓊芳，2006）。本研究結果表明，與木薯或花生單作相比，木薯/花生間作中后期可提高木薯和花生根際土壤B/F，說明木薯/花生間作后期細菌數(shù)量增加、真菌數(shù)量降低，有利于木薯和花生根際土壤向高肥力的細菌型轉化，與西瓜/大豆、辣椒/甜瓜等間作模式能提高B/F，從而使作物土壤向高肥力細菌型轉化的結論相似（張娟，2014）。另外，在木薯塊根形成期（花生結莢期）和膨大期（花生成熟期），間作木薯根際土壤B/F比間作花生分別提高了1.02和1.25倍，說明在木薯/花生間作模式中，木薯比花生更有利于其根際土壤向高肥力的細菌型轉化。

3. 2 間作對根際土壤細菌和真菌群落結構及多樣性的影響

DGGE條帶的多寡和亮度反映了土壤中微生物種群的類別和數(shù)量。本研究的DGGE分析結果表明，在木薯塊根形成期和花生結莢期，間作與單作相比，特異條帶數(shù)有所改變，說明間作明顯改變了木薯和花生根際土壤的細菌和真菌群落結構，這些類群的微生物有可能對木薯和花生的生長起特殊作用，如將差別條帶進行分離、測序和菌種鑒定，將有助于木薯根際微生態(tài)、微生物肥料和木薯/花生間作機制等研究工作的開展。

在本研究中的木薯塊根形成期及花生結莢期，與單作相比，木薯/花生間作對木薯和花生根際土壤細菌和真菌多樣性指數(shù)有所降低，但與單作多樣性指數(shù)差異不明顯，與小麥/蠶豆間作能夠穩(wěn)定中期作物的根際細菌群落多樣性結果近似（宋亞娜等，2006），但不同于小麥/蠶豆間作的中后期能顯著降低蠶豆根際微生物多樣性的結果（董艷等，2008）。可能是由于董艷等（2008）采用的是傳統(tǒng)可培養(yǎng)方法，僅反映土壤中0.1%～1.0%的微生物（羅海峰等，2003），而本研究和宋亞娜等（2006）采用的是以PCR為基礎的現(xiàn)代分子生物學方法，能反映土壤中100%的微生物（陳灝等，2002）。由此可見，本研究中的木薯和花生根際土壤細菌和真菌群落多樣性結果可靠。

4 結論

本研究結果表明，與木薯或花生單作相比，木薯/花生間作后期有利于作物根際土壤向高肥力的細菌型轉化，且間作同時可改變木薯和花生根際土壤細菌和真菌的群落結構，但對其多樣性影響不明顯。

參考文獻：

曹均，吳姬，趙小蓉，李貴桐，孫明德，曹慶昌，林啟美. 2010. 北京9個典型板栗園土壤碳代謝微生物多樣性特征[J]. 生態(tài)學報，30（2）：527-532.

Cao J，Wu J，Zhao X R，Li G T，Sun M D，Cao Q C，Lin Q M. 2010. Carbon catabolic diversity characters of 9 chestnut soils in Beijing[J]. Acta Ecologica Sinica， 30（2）：527-532.

陳灝，唐小樹，林潔，張伯生，任大明. 2002. 不經培養(yǎng)的農田土壤微生物種群構成及系統(tǒng)分類的初步研究[J]. 微生物學報，42（4）：478-483.

Chen H，Tang X S，Lin J，Zhang B S，Ren D M. 2002. Community constitute and phylogenetic analysis on soil uncultured microorganism[J]. Acta Microbiologica Sinica， 42（4）：478-483.

董艷，湯利，鄭毅，朱有勇，張福鎖. 2008. 小麥—蠶豆間作條件下氮肥施用量對根際微生物區(qū)系的影響[J]. 應用生態(tài)學報，19（7）：1559-1566.

Dong Y，Tang L，Zheng Y，Zhu Y Y，Zhang F S. 2008. Effects of nitrogen application rate on rhizosphere microbial community in wheat-faba bean intercropping system[J]. Chinese Journal of Applied Ecology，19（7）：1559-1566.

韓全輝，黃潔，劉子凡，羅春芳，魏艷. 2014. 木薯/花生間作對花生光合性能、產量和品質的影響[J]. 廣東農業(yè)科學，41（13）：13-16.

Han Q H，Huang J，Liu Z F，Luo C F，Wei Y. 2014. Effects of cassava-peanut intercropping on photosynthetic characters， yield and quality of peanut[J]. Guangdong Agricultural Sciences， 41（13）：13-16.

何國艷，湯利，鄭毅. 2012. 玉米馬鈴薯間作對根際微生物數(shù)量的影響[C]//面向未來的土壤科學（中冊）——中國土壤學會第十二次全國會員代表大會暨第九屆海峽兩岸土壤肥料學術交流研討會論文集. 南京：中國土壤學會：225-232.

He G Y，Tang L，Zheng Y. 2012. Effects of maize-potato intercropping on amount of rhizosphere microorganisms[C]//Soil Science for the Future（Vol. 2）——Proceedings of the 12th National member Congress of Soil Science Society of China and the 9th Academic Exchange Conference on Soil Ferti-

lizer Across the Taiwan Strait. Nanjing：Soil Science Society of China：225-232.

胡元森，吳坤，劉娜，陳紅歌，賈新成. 2004. 黃瓜不同生育期根際微生物區(qū)系變化研究[J]. 中國農業(yè)科學，37（10）：1521-1526.

Hu Y S，Wu K，Liu N，Chen H G，Jia X C. 2004. Studies on microbial population dynamics in the cucumber rhizospheres at different developmental stages[J]. Scientia Agricultura Sinica， 37（10）：1521-1526.

賈志紅，楊珍平，張永清，苗果園. 2004. 麥田土壤微生物三大種群數(shù)量的研究[J]. 麥類作物學報，24（3）：54-56.

Jia Z H，Yang Z P，Zhang Y Q，Miao G Y. 2004. Study on the quantity of three main colony of soil microbe in wheat farmland[J]. Journal of Triticeae Crops， 24（3）：54-56.

李瓊芳. 2006. 不同連作年限麥冬根際微生物區(qū)系動態(tài)研究[J]. 土壤通報，37（3）：563-565.

Li Q F. 2006. Dynamics of the microbial flora in the liriope rhizosphere and out rhizosphere during continuous cropping years[J]. Chinese Journal of Soil Science， 37（3）：563-565.

羅海峰，齊鴻雁，薛凱，張洪勛. 2003. PCR-DGGE技術在農田土壤微生物多樣性研究中的應用[J]. 生態(tài)學報，23（8）：1570-1575.

Luo H F，Qi H Y，Xue K，Zhang H X. 2003. A preliminary application of PCR-DGGE to study microbial diversity in soil [J]. Acta Ecologica Sinica， 23（8）：1570-1575.

漆智平，I. M. 若，J. 豪邁爾. 1999. 木薯—野花生間作的根系分布及營養(yǎng)吸收研究[J]. 土壤肥料，（6）：15-17.

Qi Z P，Rao I M，Ricaurte J. 1999. Research about cassava-wild peanut intercropping of the root distribution and nutrition absorption[J]. Soil and Fertilizer Sciences，（6）：15-17.

沈雪峰，方越，董朝霞，陳勇. 2014. 甘蔗/花生間作對土壤微生物和土壤酶活性的影響[J]. 作物雜志，（5）：55-58.

Shen X F，F(xiàn)ang Y，Dong C X，Chen Y. 2014. Effects of sugarcane/peanut intercropping on soil microbes and soil enzyme activities[J]. Crops，（5）：55-58.

沈宗專，鐘書堂，趙建樹，張建，李榮，阮云澤，沈其榮. 2015. 氨水熏蒸對高發(fā)枯萎病蕉園土壤微生物區(qū)系及發(fā)病率的影響[J]. 生態(tài)學報，35（9）：1-11.

Shen Z Z，Zhong S T，Zhao J S，Zhang J，Li R，Ruan Y Z，Shen Q R. 2015. Effects of ammonia fumigation on soil microflora and banana production in an orchard with serious Fusarium wilt disease[J]. Acta Ecologica Sinica， 35（9）：1-11.

宋亞娜，Marschner Petra，張福鎖，包興國，李隆. 2006. 小麥/蠶豆，玉米/蠶豆和小麥/玉米間作對根際細菌群落結構的影響[J]. 生態(tài)學報，26（7）：2268-2274.

Song Y N，Marschner P，Zhang F S，Bao X G，Li L. 2006. Effect of intercropping on bacterial community composition in rhizoshpere of wheat（Triticum aestivum L.）， maize（Zea mays L.）and faba bean（Vicia faba L.）[J]. Acta Ecologica Sinica， 26（7）：2268-2274.

唐秀梅，鐘瑞春，揭紅科，劉超，王澤平，韓柱強，蔣菁，賀梁瓊，李忠，唐榮華. 2011. 間作花生對木薯碳氮代謝產物及關鍵酶活性的影響[J]. 中國農學通報，27（3）：94-98.

Tang X M，Zhong R C，Jie H K，Liu C，Wang Z P，Han Z Q，Jiang J，He L Q，Li Z，Tang R H. 2011. Effect of interplan-

ting peanut on metabolites and key enzyme activities of carbon-nitrogen metabolism of cassava[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin， 27（3）：94-98.

唐秀梅，鐘瑞春，蔣菁，熊發(fā)前，賀梁瓊，李忠，韓柱強，黃志鵬，唐榮華. 2015. 木薯/花生間作對根際土壤微生態(tài)的影響[J]. 基因組學與應用生物學，34（1）：117-124.

Tang X M，Zhong R C，Jiang J，Xiong F Q，He L Q，Li Z，Han Z Q，Huang Z P，Tang R H. 2015. The effect of cassava/peanut intercropping on microecology in rhizosphere soil[J]. Genomics and Applied Biology，34（1）：117-124.

徐小林，黃欠如，葉川，成艷紅，余喜初，李大明，熊春貴. 2012. 丘陵紅壤旱地花生木薯間作適宜間距研究[J]. 江西農業(yè)學報，24（4）：20-22.

Xu X L，Huang Q R，Ye C，Cheng Y H，Yu X C，Li D M，Xiong C G. 2012. Study on suitable spacing between peanut and cassava in their intercropping in hilly red soil upland[J]. Acta Agriculturae Jiangxi， 24（4）：20-22.

張鳳華，馬富裕，鄭重，金濤，馬旭. 2000. 不同水肥處理膜下滴灌棉田根際微生物及棉花生長發(fā)育的研究[J]. 新疆農業(yè)大學學報，23（4）：56-58.

Zhang F H，Ma F Y，Zheng Z，Jin T，Ma X. 2000. A study of cotton growth and rhizospheric microorganism on the diffe-

rent water and fertilizer under mulch drip irrigation[J]. Journal of Xinjiang Agricultural University，23（4）：56-58.

張娟. 2014. 不同種植模式對砂田土壤微生物學性狀及作物的影響[D]. 銀川：寧夏大學.

Zhang J. 2014. Effect of different planting patterns on soil microbiological characteristics and crop in gravel-sand mulched field[D]. Yinchuan：Ningxia University.

張亞平，劉日明. 1999. 根際微生物與地膜甜菜生長發(fā)育關系的研究[J]. 石河子大學學報（自然科學版），3（3）：183-186.

Zhang Y P，Liu R M. 1999. A study on relation between growth of beet and rhizospheric microorganism[J]. Journal of Shihezi University（Natural Science）， 3（3）：183-186.

Fierer N，Jackson J A，Vilgalys R，Jackson R B. 2005. Assessment of soil microbial community structure by use of taxon-specific quantitative PCR assays[J]. Applied and Environmental Microbiology，71（7）：4117-4120.

Larkin R P. 2003. Characterization of soil microbial communities under different potato cropping systems by microbial population dynamics，substrate utilization，and fatty acid profiles[J]. Soil Biology & Biochemistry，35（11）：1451-1466.

（責任編輯 王 暉）