小葉黑柴胡的研究進展

張瑞漢+李文菊

【摘要】臨床常用中藥柴胡因品種來源繁多，化學(xué)成分復(fù)雜，品種之間有效成分含量懸殊，導(dǎo)致質(zhì)量良莠不齊，臨床療效不穩(wěn)。筆者收集自1993年以來公開發(fā)表的小葉黑柴胡相關(guān)文獻22篇，從品種來源、藥材鑒定、化學(xué)成分和藥理毒理等方面進行整理總結(jié)，認為小葉黑柴胡屬于優(yōu)質(zhì)野生資源，藥用價值大。

【關(guān)鍵詞】小葉黑柴胡；藥材鑒定；化學(xué)成分；藥理毒理；研究進展

【中圖分類號】R282.7 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2016）08-0026-03

柴胡是傘形科柴胡屬植物，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，位列上品。具有疏散退熱，舒肝解郁，升舉陽氣的作用。用于感冒發(fā)熱，寒熱往來，胸肋脹痛，月經(jīng)不調(diào)，子宮脫垂，脫肛，為常用中藥材。中醫(yī)臨床常用藥柴胡除藥典正品外，品種來源繁多，質(zhì)量良莠不齊?，F(xiàn)野生資源枯竭、價格昂貴，市場流通以家種品為主。而傳統(tǒng)中藥以野生為主，現(xiàn)市場流通的家種品木質(zhì)化嚴重，質(zhì)量堪憂。主流觀點認為野生品品質(zhì)優(yōu)于家種品，現(xiàn)商品柴胡非經(jīng)典記載柴胡。為探討藥用柴胡來源之一的小葉黑柴胡的藥用價值，筆者收集自1993年以來公開發(fā)表的小葉黑柴胡相關(guān)文獻22篇，就其藥材鑒定、化學(xué)成分和藥理毒理進行綜述，現(xiàn)報道如下。

1藥用柴胡的種類

2010版中國藥典僅收載了柴胡（Bupleurum chinense DC.）和狹葉柴胡（Bupleurum scorzonerifolium Willd.） 2種的干燥根為藥用柴胡的原植物，按性狀不同，分別習(xí)稱 “北柴胡”及“南柴胡”，并明確指出大葉柴胡（Bupleurum longiradiatum Turcz.）有毒，不可當(dāng)柴胡藥用[1]?！陡拭C省中藥材標準（2009年版）》[2]、《寧夏中藥材標準（1993年版）》[3]均收載“黑柴胡”藥材，前者品種為黑柴胡（Bupleurum smithii Woiff.）、小葉黑柴胡（Bupleurum smithii Woiff.var.parvifolium Shan et.Y.Li）或黃花鴨跖柴胡（Bupleurum commelynoideum Boiss.var.flaviflorum Shan et.Y.Li）的干燥根或根莖，后者品種為小葉黑柴胡（Bupleurum smithii Woiff.var.parvifolium Shan et.Y.Li）的干燥根或根莖。兩省標準均收載小葉黑柴胡。

2小葉黑柴胡的流通和分布

小葉黑柴胡在甘肅、寧夏等省區(qū)屬有臨床習(xí)用歷史的品種和主流種類，藥用歷史悠久。兩省藥品監(jiān)管部門認為和正品有相似功效，分別收入本省中藥材標準，允許在市場流通，代正品柴胡藥用。要求中藥飲片生產(chǎn)、經(jīng)營企業(yè)以“黑柴胡”命名，但不得以藥典正品“柴胡”命名，以示區(qū)別。據(jù)文獻報道，小葉黑柴胡在浙江平陽按偽品對待[4]，寧波按混淆品對待[5]。

小葉黑柴胡為傘形科柴胡屬植物。分布于我國甘肅、寧夏、青海、內(nèi)蒙古等地，生長于海拔2700～3700m的地區(qū)，常生長在山坡草地或林下，目前尚未由人工引種栽培。潘勝利等[6]在對小葉黑柴胡的產(chǎn)地調(diào)查中發(fā)現(xiàn)其分布于甘肅、寧夏、青海、內(nèi)蒙古等省區(qū)及河北、山西、陜西的北部等地。生于1400～3000m的山坡草地、山谷、山頂陰處。小葉黑柴胡在甘肅主要分布于張掖、武威、蘭州、定西、甘南及隴南等地[2]。

3小葉黑柴胡的藥材性狀

寧夏標準[3]記載：本品性狀呈圓柱形或圓錐形，常彎曲，稀有分枝，主根長4～7cm，直徑0.2～0.5cm。表面黑褐色或棕褐色，粗糙，有多數(shù)突起的須根痕，根頭膨大，多分枝，常殘留莖基及棕褐色膜質(zhì)葉基。質(zhì)較松脆，易折斷，斷面略平坦，皮部淺棕色，具多數(shù)裂隙，木部黃白色，有放射狀列隙。氣微香，味微苦辛，具敗油氣。

潘勝利等[6]認為小葉黑柴胡根頭部常有數(shù)個莖基成指狀叢生，莖基部具多數(shù)片狀殘留葉柄，有時還帶有少量殘留的葉。根圓柱形至長圓錐形，長6～12cm，直徑0.4～0.8cm，側(cè)根2～3個；表面黑褐色至灰褐色，偶可見較疏的橫紋，具皮孔，有時可見支根痕形成的瘤狀突起。質(zhì)松脆，易折斷，斷面較平坦，皮部黃棕色，常有較多空隙；木部淺黃色，輻射狀排列明顯。氣微香。胡雙豐[5]認為小葉黑柴胡根呈圓柱形，較小，長5～7cm，直徑0.3～0.5cm，根頭分歧，頂端殘留多數(shù)莖基和綠色葉基，下側(cè)具兩行呈疣狀突起的不定芽，根下部多分枝，有的中間驟然膨大形成棗核樣突起。表面黑褐色，有淺色支根痕及橫向皮孔。質(zhì)較松脆，易折斷，斷面顯纖維性，栓皮層易剝落。油腥氣較濃。甘肅標準與寧夏標準不同的地方是甘肅標準直徑略大，約0.2～0.7cm，筆者分析與甘肅標準中有其他兩個品種有關(guān)。潘勝利等認為長度和直徑較大，筆者分析與產(chǎn)地不同有關(guān)，其他特征基本相同。

4小葉黑柴胡的化學(xué)成分

4.1柴胡皂甙王英華等[7]從小葉黑柴胡根中分得5個三萜皂甙和2個三萜皂甙元。根據(jù)理化性質(zhì)和波譜分析，分別鑒定為柴胡皂甙a、柴胡皂甙d、柴胡皂甙b2、柴胡皂甙b4、chikusaikosideI、柴胡皂甙元F、柴胡皂甙元G，均為首次從該植物中分離得到。曹緯國等[8]測定青海產(chǎn)小葉黑柴胡中總皂苷含量大于2.77%，柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量分別高于0.54%和0.14%，其中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量遠高于中國藥典中柴胡含量項下的標準。提示青海產(chǎn)小葉黑柴胡具有較高的藥用價值。寧夏標準[3]報告，寧夏產(chǎn)小葉黑柴胡含總皂甙1.415%，略低于北柴胡，高于同屬其他柴胡。其中柴胡皂甙a為0.18%，柴胡皂甙d為0.20%。潘勝利等[6]曾對云南省的8種藥用柴胡及北柴胡和紅柴胡，通過組織化學(xué)鑒定法，發(fā)現(xiàn)柴胡皂甙在柴胡根中主要存在于韌皮部和射線部位，而木質(zhì)部中存在極少。

4.2揮發(fā)油楊永健等[9]從小葉黑柴胡揮發(fā)油中分離鑒定出27個化合物，主要成分有5-甲基麝香草醚（18.22%）、對-聚傘花素（9.75%）、環(huán)己烷（7.79%）、2-戊基呋喃（2.71%）、二甲基乙縮醛己醛（2.69%）等。寧夏標準[3]報告甘肅臨夏產(chǎn)者含揮發(fā)油0.05%。脂肪族化合物特別是其中的烷烴類化合物，可作為柴胡屬植物揮發(fā)油的特征性成分而與其它揮發(fā)油相區(qū)別[6]。

4.3黃酮周偉等[10]對小葉黑柴胡地上莖葉部分化學(xué)成分進行研究，分離鑒定了5黃酮類成分：水仙苷、蘆丁、異鼠李素、廣寄生苷、槲皮素，均系首次從該植物中分離獲得。潘勝利[6]報道柴胡的地上部分存在較多的黃酮類成分。

4.4甾醇徐秀珍等[11]采用薄層掃描法測定小葉黑柴胡與北柴胡中甾醇類成分的含量，結(jié)果小葉黑柴胡與北柴胡的含量分別為0.5125mg/g和0.2408mg/g，小葉黑柴胡的甾醇含量高于北柴胡一倍，提示小葉黑柴胡的抗炎作用優(yōu)于北柴胡。

4.5多糖潘勝利等[6]進行柴胡糖類的定量分析，糖和多糖含量最高的為贊皇的北柴胡（15.97%）和汶川柴胡（15.95%），小葉黑柴胡為（13.75%）。

4.6苯提取物潘勝利等[6]進行苯提取物的定量分析，含量最高的為小葉黑柴胡（蘭州）5.06%。

5小葉黑柴胡的藥理毒理研究

5.1藥理研究趙玉珍等[12-13]通過動物（小鼠、家兔）實驗表明，小葉黑柴胡水煎劑和粗皂甙有顯著的解熱作用，相同劑量的小葉黑柴胡的水煎劑和粗皂甙之間無顯著差異。小葉黑柴胡乙醚取物和粗皂甙有顯著的抗炎作用，作用優(yōu)于北柴胡。其粗皂甙有北柴胡粗皂甙類似的鎮(zhèn)痛作用。小葉黑柴胡粗皂甙還能顯著降低四氯化碳（CCl4）肝損傷小鼠的血清轉(zhuǎn)氨酶，有顯著的保肝作用，它降轉(zhuǎn)氨酶的作用比北柴胡粗皂甙和聯(lián)苯雙酯都強。小葉黑柴胡乙醚提取物使小鼠胸腺明顯增重，使小鼠血清IgG明顯升高，有增強免疫功能的作用，而北柴胡對免疫功能無顯著作用。根據(jù)這些結(jié)果，認為小葉黑柴胡不僅可以代替北柴胡供藥用，而且在保肝、調(diào)節(jié)機體免疫功能方面也有進一步研究和開發(fā)利用價值。

潘勝利等[6]通過CCl4損傷小鼠肝法進行了6種柴胡保肝作用比較實驗，發(fā)現(xiàn)保肝作用錐葉柴胡和小葉黑柴胡最強。胡淑婷等[14]選擇小葉黑柴胡的乙醚提取物，作用于體外培養(yǎng)的人胃腺癌MGC-803細胞，觀察小葉黑柴胡誘導(dǎo)人胃腺癌MGC-803細胞的凋亡效應(yīng)。結(jié)果小葉黑柴胡可誘導(dǎo)人胃腺癌MGC-803細胞凋亡。王錚等[15]通過觀察小葉黑柴胡總多糖對小鼠多項免疫指標的影響，探討其免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果小葉黑柴胡總多糖對小鼠免疫功能有調(diào)節(jié)作用。吳梓春[16]以小葉黑柴胡莖葉中提取的黃酮類物質(zhì)為材料，對其抗氧化性能進行了體外實驗。結(jié)果小葉黑柴胡莖葉總黃酮（TFA）提取物對自由基都有較好的清除能力，并呈現(xiàn)很好的量效關(guān)系。TFA提取物具有很好的抗氧化作用。詹雪晶等[17-18]采用化學(xué)物質(zhì)α-萘異硫氰酸酯（α-naphthyl isothiocyanate，ANIT）誘發(fā)大鼠肝內(nèi)膽汁淤積模型，用TFA給大鼠灌胃給藥，觀察血清、肝組織指標變化。結(jié)果顯示，TFA能明顯提高大鼠損傷肝細胞的細胞膜Na+，K+-ATP酶活性，促進膽汁酸的分泌，膽汁排泄增加，降低大鼠血清中的中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總膽紅素（TBIL）、谷酰胺轉(zhuǎn)肽酶（GGT）的水平。采用CCl4致小鼠急性肝損傷，與模型組相比較，經(jīng)TFA預(yù)防性治療后，治療組小鼠血清中ALT、AST的水平明顯降低，同時肝組織中丙二醛（Malondialdehyde，MDA）的含量明顯下降、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）的活力明顯增強。TFA保肝降酶作用明顯，對CCl4所致急性肝損傷小鼠有很好的保護作用。劉秀芳等[19-20]采用小鼠尾靜脈注射刀豆蛋白誘發(fā)小鼠免疫肝損傷模型，觀察血清ALT和AST，并測定小鼠肝組織中MDA的含量。在光學(xué)顯微鏡下觀察肝臟病理組織的變化。與正常組相比，TFA能降低小鼠免疫肝損傷模型的ALT和AST活力和肝組織中MDA的含量，能明顯改善肝組織的病理學(xué)改變，能提高小鼠單核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬功能，使小鼠的免疫功能提高，對免疫性肝損傷小鼠有一定的保護作用。采用分光光度法，測定TFA對多種自由基的清除效果，驗證其抗氧化活性，結(jié)果TFA對DPPH·自由基活性、·OH自由基和O2-·自由基的清除率可達94.67%、93.60%和90.04%，TFA具有很好的抗氧化活性。

羅磊等[21]通過代謝物組學(xué)方法對小葉黑柴胡總黃酮防治ANIT所致大鼠急性黃疸型肝損傷過程中的尿液代謝組進行研究，結(jié)果顯示，給藥組和模型組相比，大鼠尿液代謝物中馬尿酸、庚酰肉毒堿、5β-膽甾烷-3α，7α，12α，23R，25-醇、4-羥雙氫鞘氨醇、二氫神經(jīng)鞘氨醇、溶血磷脂酰乙醇胺（0∶0/24∶0）、苯乙尿酸等含量降低，6-酮前列腺素F1α和3-磺基去氧膽酸含量升高，提示小葉黑柴胡總黃酮明顯緩解ANIT引起的大鼠急性黃疸型肝損傷，可用于防治急性黃疸型肝損傷。

5.2毒理研究趙玉珍等[12]通過動物實驗表明，小葉黑柴胡水煎劑、乙醚提取物、粗皂苷給小鼠灌胃，半數(shù)致死量（LD50）分別為大于200g/kg、（10.25±1.33）g/kg和（6.00±1.11）g/kg。小葉黑柴胡毒性較小，其水煎劑和粗皂甙小鼠灌胃毒性按原生藥計算小于北柴胡，唯其乙醚提取物小鼠灌胃毒性按原生藥計算大于北柴胡。小葉黑柴胡乙醚提取物（主要為甾醇、木質(zhì)素等）含量高于北柴胡，可能是其有毒性的原因之一。王有志等[22]曾報道小葉黑柴胡的乙醚提取物有一定的毒性。

6小結(jié)及展望

柴胡屬植物大多數(shù)品種在我國不同地區(qū)實際在供藥用或有藥用歷史，并不局限于藥典標準。有關(guān)小葉黑柴胡地方標準收載情況，筆者只查到了甘肅、寧夏收載的原始文獻，據(jù)其他文獻報道山西（1987年）、青海（1992年）標準亦有收載，但因年代久遠，未找到原始文獻。建議省級藥監(jiān)部門及時更新地方藥材標準。地方標準中藥材跨轄區(qū)銷售的合法性問題方面，國家藥品標準分為藥典標準、部頒標準和省、自治區(qū)、直轄市標準（地方標準），筆者理解只要列入國家藥品標準即為合法，但部分省區(qū)藥監(jiān)部門將小葉黑柴胡列為非法，造成中藥材資源浪費。建議國家藥監(jiān)部門出臺地方標準藥材流通相關(guān)法規(guī)。關(guān)于小葉黑柴胡的鑒定，文獻描述不一致方面，建議鑒定樣本應(yīng)注明產(chǎn)地。因同一品種，生長環(huán)境不同，性狀理化、特征則不同。藥監(jiān)部門制定標準時應(yīng)廣泛采集標本，求同存異，統(tǒng)一標準。

小葉黑柴胡根含皂苷及皂苷元、揮發(fā)油、甾醇、糖和多糖等，其中皂苷、甾醇含量高于藥典北柴胡。地上莖葉部分含水仙苷、蘆丁、異鼠李素、廣寄生苷、槲皮素等黃酮類成分。

小葉黑柴胡根部分具有解熱、抗炎、鎮(zhèn)痛、保肝、增強免疫和誘導(dǎo)胃癌細胞凋亡作用，抗炎、保肝作用優(yōu)于北柴胡，免疫增強作用顯著。莖葉黃酮類物質(zhì)對動物膽汁淤積性、化學(xué)性、免疫性肝損傷均有良好保護作用。其機制與黃酮類物質(zhì)發(fā)揮清除自由基、提高Na+、K+-ATP酶和SOD活性、促進膽汁酸分泌、增加膽汁排泄作用，進而降低血清肝酶、膽紅素和肝組織MDA水平相關(guān)。

綜上，小葉黑柴胡在臨床中應(yīng)用具有明顯療效，且毒副作用小，屬于優(yōu)質(zhì)野生資源，藥用價值大，值得進一步研究，開發(fā)利用。

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（收稿日期：2016.03.01）