無(wú)償獻(xiàn)血人群HIV初篩反應(yīng)性樣本的確認(rèn)結(jié)果分析

聶湘輝

(河源市中心血站，廣東河源517000)

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無(wú)償獻(xiàn)血人群HIV初篩反應(yīng)性樣本的確認(rèn)結(jié)果分析

聶湘輝

(河源市中心血站，廣東河源517000)

摘要:目的探討無(wú)償獻(xiàn)血者人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）初篩反應(yīng)性結(jié)果與免疫印跡確認(rèn)試驗(yàn)（WB）結(jié)果的關(guān)系。方法收集2013年6月-2015年6月本血站常規(guī)ELISA初篩檢測(cè)HIV結(jié)果為反應(yīng)性的73份無(wú)償獻(xiàn)血者血漿，進(jìn)一步行WB確認(rèn)試驗(yàn)，對(duì)比分析初篩和確認(rèn)結(jié)果。結(jié)果經(jīng)WB確認(rèn)，23份HIV雙試劑反應(yīng)性樣本中確認(rèn)陽(yáng)性16份，陽(yáng)性符合率為21.9%（16/73），單試劑反應(yīng)性樣本確認(rèn)結(jié)果均為陰性。隨著ELISA初篩檢測(cè)S/CO值的增大，初篩結(jié)果與WB確認(rèn)結(jié)果符合率增加。S/CO比值為1～6時(shí)，與WB確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性符合率為0%（0/25）；S/CO值為6～10時(shí)，與WB確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性符合率為13.8%(4/29)；S/CO值>10時(shí)，與WB確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性符合率為63.2%(12/19)。結(jié)論無(wú)償獻(xiàn)血者HIV ELISA初篩結(jié)果存在一定假陽(yáng)性結(jié)果，HIV檢測(cè)結(jié)果報(bào)告及獻(xiàn)血者的管理可參照WB確認(rèn)結(jié)果及ELISA初篩S/CO值。

關(guān)鍵詞：人類免疫缺陷病毒；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；免疫印跡確認(rèn)試驗(yàn)

艾滋病是一個(gè)全球性的疾病，病死率高，傳染性強(qiáng)，其病原體為人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)。輸血是HIV病毒傳播的主要途徑之一。由于缺乏有效的HIV疫苗和抗HIV藥物，切斷HIV傳播途徑，準(zhǔn)確檢測(cè)艾滋病和攜帶者是目前防治HIV感染的重要手段。檢測(cè)HIV的主要方法有HIV抗體檢測(cè)，包括初篩試驗(yàn)和確認(rèn)試驗(yàn)。目前初篩試驗(yàn)普遍采用高敏感性和特異性的第四代酶聯(lián)免疫吸附（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）試劑檢測(cè)，即同時(shí)檢測(cè)HIV抗原和抗-HIV1+2。HIV初篩反應(yīng)性結(jié)果需進(jìn)一步確認(rèn)試驗(yàn)，常采用免疫印跡確認(rèn)試驗(yàn)（western blot，WB）。無(wú)償獻(xiàn)血人群中HIV感染率低，HIV初篩假陽(yáng)性率較高[1]，易造成血液資源的浪費(fèi)及獻(xiàn)血者的流失。本研究擬通過(guò)分析本站收集的HIV初篩檢測(cè)結(jié)果為反應(yīng)性的73份血漿的WB確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果，探討無(wú)償獻(xiàn)血者HIV ELISA初篩結(jié)果與WB確認(rèn)結(jié)果的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1研究對(duì)象收集2013年6月至2015年6月期間本血站采集的29816份無(wú)償獻(xiàn)血者血漿，進(jìn)行HIV常規(guī)ELISA初篩檢測(cè)。ELISA初篩檢測(cè)結(jié)果為反應(yīng)性的73份樣本送河源市疾病預(yù)防控制中心（CDC）進(jìn)一步做WB確證試驗(yàn)。

1.2主要儀器與試劑法國(guó)伯樂(lè)試劑采用夾心兩步法檢測(cè)血漿中HIV抗原和HIV1、HIV2相關(guān)各種抗體，檢測(cè)儀器：Tecan RSP 100-8全自動(dòng)加樣儀完成加樣、BEPIII全自動(dòng)酶免分析儀；英科新創(chuàng)試劑采用雙抗原夾心兩步法檢測(cè)血漿中HIV1/ HIV2抗體，檢測(cè)儀器：UranusAE150全自動(dòng)酶免儀。質(zhì)控品由北京康徹思坦生物技術(shù)有限公司提供。以上試劑和質(zhì)控品均經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)，檢定合格，且在有效期內(nèi)使用。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1初篩試驗(yàn)依照各試劑使用說(shuō)明書(shū)及《血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范》要求，每個(gè)樣本采用上述兩種不同ELISA試劑由不同操作人員在同一時(shí)間檢測(cè)。判定標(biāo)準(zhǔn)：任一種試劑樣本結(jié)果S/CO<1則判定該樣本為無(wú)反應(yīng)性；S/CO值≥1時(shí)，用同種試劑做3孔復(fù)檢，復(fù)檢3孔均有S/CO值≥1則判為反應(yīng)性，以3孔檢測(cè)S/CO均值為統(tǒng)計(jì)值（排除試驗(yàn)操作原因后復(fù)檢3孔S/CO值相差較大，判定結(jié)果不一致的樣本被剔除）。

1.3.2確證試驗(yàn)參照中國(guó)疾病預(yù)防控制中心《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》[2](2004年)以及試劑說(shuō)明書(shū)。HIV-1抗體陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：至少有2條ENV帶(gp160/gp120和gp41)出現(xiàn)，或者至少1條ENV帶和p24帶同時(shí)出現(xiàn)。HIV-2抗體陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)至少2條ENV帶(gp140/gp105和gp36)（符合WHO陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)），同時(shí)符合試劑盒提供的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。HIV抗體不確定標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)HIV抗體特異帶，但不足以判定陽(yáng)性。HIV抗體陰性標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)HIV抗體特異帶。

1.4統(tǒng)計(jì)方法計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，應(yīng)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)比分析兩種ELISA初篩結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果，以a=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1 ELISA初篩檢測(cè)反應(yīng)性樣本的WB確認(rèn)結(jié)果分析ELISA初篩檢測(cè)結(jié)果為反應(yīng)性共73份樣本，法國(guó)伯樂(lè)、英科新創(chuàng)試劑檢測(cè)反應(yīng)性樣本分別為54份、42份。其中雙試劑反應(yīng)性樣本23份中經(jīng)WB確證結(jié)果陽(yáng)性16份，陽(yáng)性符合率為21.9%（16/ 73），單試劑反應(yīng)性樣本經(jīng)WB確證結(jié)果均為陰性。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析兩種初篩試劑檢測(cè)HIV的WB確證陽(yáng)性率無(wú)顯著性差異（χ2=0.762，P=0.383）。見(jiàn)表1。

表1　ELISA初篩檢測(cè)反應(yīng)性樣本的WB確認(rèn)結(jié)果分析

2.2 ELISA初篩檢測(cè)S/CO比值與WB確認(rèn)結(jié)果的關(guān)系隨著ELISA初篩檢測(cè)S/CO值的增大，初篩結(jié)果與WB確認(rèn)結(jié)果符合率增加。S/CO比值為1～6時(shí)，與WB確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性符合率為0%（0/25）；S/ CO值為6～10時(shí)，與WB確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性符合率為13.8%(4/29)；S/CO值>10時(shí)，與WB確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性符合率為63.2%(12/19)。WB結(jié)果陽(yáng)性的16份樣本S/CO比值均>6，S/CO比值<6樣本W(wǎng)B結(jié)果均為陰性，見(jiàn)表2。

表2　S/CO比值分布與WB確證試驗(yàn)結(jié)果

3　討論

1981年全球首例艾滋病病毒感染患者被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，全世界各地區(qū)均有HIV流行，已成為重大的社會(huì)問(wèn)題和公共衛(wèi)生問(wèn)題。我國(guó)HIV感染出現(xiàn)由高危人群轉(zhuǎn)向普通人的流行趨勢(shì)[3]，這樣對(duì)我們輸血工作造成了很大的壓力。為確保血液安全，采供血機(jī)構(gòu)選用較高靈敏度和特異性的初篩試劑尤為重要。本站選用法國(guó)伯樂(lè)、英科新創(chuàng)兩種不同ELISA試劑篩查HIV，如任一試劑出現(xiàn)反應(yīng)性結(jié)果將報(bào)廢其血液及屏蔽淘汰其獻(xiàn)血者資格。

本研究收集的無(wú)償獻(xiàn)血者29816份樣本中，法國(guó)伯樂(lè)、英科新創(chuàng)試劑檢測(cè)反應(yīng)性樣本分別為54份、42份，陽(yáng)性率分別為0.18%、0.14%，與WB確認(rèn)結(jié)果陽(yáng)性符合率分別為29.6%（16/54）、38.1% （16/42），兩種試劑WB確證陽(yáng)性率無(wú)顯著性差異（χ2=0.762，P=0.383）。ELISA初篩檢測(cè)結(jié)果為反應(yīng)性共73份樣本中，WB確證陽(yáng)性16份，均為初篩雙試劑[4]反應(yīng)性樣本。提示本站將來(lái)擬采取一遍ELISA加一遍核酸[5]的檢測(cè)模式思路可行，可以減少血液篩查成本。HIV抗體ELISA初篩反應(yīng)性結(jié)果與WB的陽(yáng)性符合率為21.9%（16/73），假陽(yáng)性率為78.1%（57/73），與呂蓉[6]曾報(bào)道血站初篩檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性率基本一致。

本研究中S/CO值1～6，與WB陽(yáng)性符合率為0%，S/CO值6～10，陽(yáng)性符合率為13.8%，S/CO值> 10，陽(yáng)性符合率為63.2%，WB結(jié)果陽(yáng)性的16份樣本S/CO值均>6，S/CO值<6樣本W(wǎng)B結(jié)果均為陰性。結(jié)果與李英輝[7]曾報(bào)道相符合，隨ELISA檢測(cè)結(jié)果S/CO值的增高，與WB確證試驗(yàn)的陽(yáng)性符合率也相應(yīng)增高。報(bào)廢假陽(yáng)性結(jié)果血液易造成血液資源的浪費(fèi)，屏蔽其獻(xiàn)血者資格導(dǎo)致獻(xiàn)血者流失，這些問(wèn)題與獻(xiàn)血安全的矛盾一直是采供血機(jī)構(gòu)研究的重點(diǎn)。孫昂[1]曾提出將HIV初篩結(jié)果S/CO值≥6.23時(shí)，報(bào)廢血液同時(shí)淘汰獻(xiàn)血者資格，對(duì)于S/CO值<6.23時(shí)，僅報(bào)廢本次血液，并且對(duì)獻(xiàn)血者定期隨訪、復(fù)查，最后確定淘汰或者追回。為避免初篩假陽(yáng)性的結(jié)果而造成血液資源的浪費(fèi)和獻(xiàn)血者的流失，HIV檢測(cè)結(jié)果報(bào)告及獻(xiàn)血者的管理可參照S/CO值及WB確認(rèn)結(jié)果這種模式可以借鑒[8]。

綜上所述，本血站采取以篩查為目的的HIV檢測(cè)策略，根據(jù)HIV初篩結(jié)果報(bào)廢血液可以最大程度的防止其經(jīng)輸血途徑傳播[9]。HIV檢測(cè)結(jié)果報(bào)告及獻(xiàn)血者的管理[10]則以WB確認(rèn)結(jié)果為主，同時(shí)參照ELISA檢測(cè)S/CO值大小，定期隨訪、復(fù)查，可以保護(hù)獻(xiàn)血者的利益及減少獻(xiàn)血者的流失。

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·輸血與檢驗(yàn)·

·輸血與檢驗(yàn)·

(收稿日期2015－12－10；修回日期2016－02－04)

基金項(xiàng)目：廣東省河源市社會(huì)發(fā)展科技計(jì)劃項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)20158081

DOI：10.3969/j.issn.1674-1129.2016.02.043

中圖分類號(hào)：R457.1+2，R512.91，R193.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1674-1129(2016)02-0244-02