兒童反復(fù)肺炎與機體免疫功能和炎性相關(guān)因子的關(guān)系研究

張立梅

075700　河北省蔚縣人民醫(yī)院兒科

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·論著·

兒童反復(fù)肺炎與機體免疫功能和炎性相關(guān)因子的關(guān)系研究

張立梅

075700河北省蔚縣人民醫(yī)院兒科

【摘要】目的研究兒童反復(fù)肺炎與機體免疫功能和炎性相關(guān)因子的關(guān)系。方法選取兒童反復(fù)肺炎46例作為反復(fù)肺炎組，選取同期查體健康患兒50例作為對照組，抽取受檢患兒清晨空腹肘靜脈血，比較2組血清免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)水平，并對IgG亞類(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)水平進行測定，比較2組外周血T細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD(25)+Treg、CD(19)+、CD4+/CD8+)、炎性因子[血白介素-8(IL-8)、IL-17]和人β防御素(hBD-1、hBD-2)水平，同時測定NK細胞的比例。結(jié)果反復(fù)肺炎組患兒IgG和IgA水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，反復(fù)肺炎組IgM水平低于對照組，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。反復(fù)肺炎組IgG1水平高于對照組，而IgG2和IgG4水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。2組IgG3水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。反復(fù)肺炎組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD(25)+Treg、CD4+/CD8+水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，反復(fù)肺炎組CD19+水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。反復(fù)肺炎組IL-8、IL-17水平高于對照組，hBD-1、NK細胞水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，2組hBD-2水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論反復(fù)肺炎患兒存在免疫球蛋白IgG和IgA、T淋巴細胞、B細胞、NK細胞、hBD-1細胞低水平表達，IL-8和IL-17高水平表達，說明反復(fù)肺炎患兒存在體液、細胞免疫功能紊亂，同時呼吸系統(tǒng)防御能力降低，這可能是兒童反復(fù)肺炎病程遷延的原因之一。

【關(guān)鍵詞】兒童；肺炎，反復(fù)；免疫功能；炎性因子；人β防御素

研究發(fā)現(xiàn)，肺炎已成為兒童致死的主要病因，由于細菌對抗生素耐藥性的升高，其發(fā)病率無下降趨勢[1-3]。兒童肺炎中反復(fù)肺炎由于病因復(fù)雜、患兒病情反復(fù)，給患兒生長發(fā)育和家庭造成一定影響。兒童反復(fù)肺炎的病因一般是先天性或獲得性呼吸系統(tǒng)解剖異常、先天性心臟病、呼吸道吸入、免疫缺陷、哮喘、支原體肺炎治療不愈、原發(fā)性纖毛不動綜合征、囊性纖維化、微量元素缺乏等，其中免疫功能紊亂一直是研究的熱點[4]。免疫系統(tǒng)是機體的防護屏障，研究表明，反復(fù)肺炎患兒其免疫系統(tǒng)受到不同程度的影響，患者應(yīng)用增強免疫的中藥制劑后患兒免疫球蛋白、CD3+、CD4+T細胞水平明顯增高，治療效果顯著[5]。本研究檢測反復(fù)肺炎兒童外周血免疫球蛋白、T細胞亞群和相關(guān)炎性因子和人β防御素(hBD)水平，探討上述指標與兒童反復(fù)肺炎的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料選取我院2014年12月至2015年12月住院治療的反復(fù)肺炎患兒46例(反復(fù)肺炎組)，入選患者均符合“反復(fù)呼吸道感染的臨床概念和處理原則”[6]，其中男28例，女18例；年齡1～5歲，平均年齡(20.7±2.5)歲；其中1～3歲23例，4～5歲23例；病程0.5～1年，平均病程(0.4±0.3)年；發(fā)病時間0.4～4 d，平均發(fā)病時間(2.2±0.8)d。選取同期健康查體兒童50例作為對照組，其中男30例，女20例；年齡1～5歲，平均年齡(15.0±2.5)月。2組患兒性別比、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究經(jīng)過醫(yī)院臨床研究倫理委員會審查批準。

1.2入選與排除標準

1.2.1入選標準：①年齡≤5歲；②肺炎發(fā)作次數(shù)≥2次/年，或肺炎發(fā)作次數(shù)>3次；③ 2次肺炎發(fā)作間隔>7 d；④符合“反復(fù)呼吸道感染的臨床概念和處理原則”的相關(guān)診斷標準；⑤患兒監(jiān)護人知情同意，并簽署知情同意書。

1.2.2排除標準：①原發(fā)性纖毛不動綜合征，先天性氣管、肺、心臟畸形，囊性纖維化和反復(fù)吸入患兒；②年齡>14歲；③不符合“反復(fù)呼吸道感染的臨床概念和處理原則”相關(guān)診斷標準；④患兒存在重度營養(yǎng)不良、哮喘、佝僂病等；⑤研究前患兒未服用免疫抑制劑、免疫調(diào)節(jié)劑及其他可以影響患兒觀察指標的藥品；⑥除外免疫系統(tǒng)缺陷、貧血等。

1.3觀察指標2組患兒均抽取清晨空腹肘靜脈血5 ml，置于真空抗凝管中，取其中3 ml，2 500 r/min，離心5 min，取上清用于免疫球蛋白測定、炎性因子和人β防御素，另外2 ml用于T細胞亞群檢測。

1.3.1血清免疫球蛋白：采用人免疫球蛋白檢測試劑盒(上?；鈱崢I(yè)有限公司提供)，采用雙抗體夾心法進行檢測IgG、IgA和IgM水平。同時應(yīng)用IgG單抗亞類鑒定試劑盒測定IgG1、IgG2、IgG3、IgG4的水平。

1.3.2外周血T細胞亞群：采用流式細胞儀測定患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg、CD19+、CD4+/CD8+。

1.3.3炎性因子和hBD：檢測患者外周血白介素-8(IL-8)、IL-17、hBD-1、hBD-2和NK細胞的水平。

2結(jié)果

2.12組血清免疫球蛋白水平比較反復(fù)肺炎組患兒IgG和IgA水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);反復(fù)肺炎組IgM水平低于對照組，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.22組IgG亞類水平比較反復(fù)肺炎組IgG1水平高于對照組，而IgG2和IgG4水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。2組IgG3水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表1　2組血清免疫球蛋白水平比較　±s

表22組IgG亞類水平比較

組別IgG1IgG2IgG3IgG4對照組(n=50)5.4±0.82.5±0.60.70±0.300.22±0.05反復(fù)肺炎組(n=46)6.0±1.72.0±0.50.60±0.210.15±0.08 t值2.24124.41461.90435.1848 P值<0.05<0.05>0.05<0.05

2.32組淋巴細胞亞群比較反復(fù)肺炎組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Treg、NK水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，反復(fù)肺炎組CD19+水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3　2組T細胞亞群比較　±s

2.42組炎性因子和hBD水平比較反復(fù)肺炎組IL-8、IL-17水平高于對照組，hBD-1細胞水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);2組hBD-2水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表4。

表4　2組炎性因子和hBD水平比較　±s

3討論

3.1兒童反復(fù)肺炎的發(fā)病原因及危險因素兒童呼吸系統(tǒng)具有呼吸頻率快、中樞調(diào)節(jié)能力差、呼吸功能儲備能力低的特點。其呼吸道特異性和非特異性免疫功能較弱、咳嗽反射較差，同時纖毛運動差，SIgA、IgG及亞類含量低，巨噬細胞、乳鐵蛋白、溶菌酶、干擾素和各種補體含量不足，這就造成兒童易發(fā)生肺炎[7，8]?！胺磸?fù)呼吸道感染的臨床概念和處理原則”中明確指出兒童反復(fù)肺炎多與患兒缺乏鍛煉、微量元素缺乏、治療不當、缺乏護理有關(guān)，少數(shù)患兒與基礎(chǔ)疾病有關(guān)[6]。研究發(fā)現(xiàn)，小兒反復(fù)肺炎多于肺炎支原體有關(guān)，感染陽性率為44.34%～57.2%[9，10]，說明肺炎支原體可能是除外基礎(chǔ)疾病，導(dǎo)致患兒反復(fù)肺炎的主要致病菌。此外，維生素D、鐵、鋅等元素缺乏也可能是導(dǎo)致兒童反復(fù)肺炎的因素之一[11，12]，研究發(fā)現(xiàn)，微量元素缺乏可影響機體免疫功能，使兒童易發(fā)呼吸道感染[12]。喘息病史、反復(fù)上呼吸道感染、濕疹、一過性粒細胞減少癥、食物和藥物過敏史、被動吸煙、戶外活動少等是增加兒童發(fā)生反復(fù)肺炎的影響因素。

3.2兒童反復(fù)肺炎與機體免疫功能的關(guān)系機體免疫系統(tǒng)主要由免疫器官、免疫分子和免疫細胞構(gòu)成，其在免疫應(yīng)答、調(diào)節(jié)、耐受中起重要作用。(1)免疫球蛋白中IgG具有調(diào)理、激活補體和中和作用；IgA具有黏膜局部抗感染，自然被動免疫的作用；IgM具有激活補體、發(fā)揮早期抗感染的作用。肖海妮[13]對30例反復(fù)肺炎患兒進行研究發(fā)現(xiàn)反復(fù)肺炎患兒血清中IgG、IgA水平與正常兒童比較，明顯降低(P<0.05)，說明反復(fù)肺炎患兒存在細胞免疫功能紊亂，這與本研究結(jié)果一致。IgG根據(jù)結(jié)構(gòu)不同分為IgG1、IgG2、IgG3、IgG4亞型，有研究表明，細菌或病毒抗原產(chǎn)生的抗體中IgG1占主導(dǎo)地位，可伴隨IgG3的產(chǎn)生[14]。同時本研究還發(fā)現(xiàn)，反復(fù)肺炎組IgG1水平高于對照組，而IgG2和IgG4水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。(2)淋巴細胞一般分為T細胞、B細胞、NK細胞3個亞群，其中T細胞擔負細胞免疫，B細胞擔負體液免疫，同時也是抗體合成細胞，NK細胞可直接殺傷靶細胞。三者在病毒感染、自身免疫性疾病等中均有表達水平的改變。本研究中反復(fù)肺炎組CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Treg、NK水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，反復(fù)肺炎組CD19+水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。說明患者T淋巴細胞、NK細胞表達異常，患兒免疫能力較低，而反復(fù)肺炎組CD19+水平高于對照組，可能是T淋巴細胞、NK細胞受到病毒和(或)細菌破壞，表達能力下降所致。梁巍等[15]通過對肺炎、反復(fù)上呼吸道感染患兒進行細胞免疫研究發(fā)現(xiàn)，患兒T淋巴細胞水平明顯低于正常兒童，B細胞水平升高，這與本研究結(jié)果一致。張靜等[5]采用口服中西醫(yī)結(jié)合療法提高反復(fù)上呼吸道感染患兒的免疫力，可以顯著改善患兒臨床癥狀，這也說明機體免疫功能在反復(fù)肺炎中有重要作用。CD4+CD25+Treg可以抑制免疫系統(tǒng)的功能及相關(guān)免疫細胞的活性，從而發(fā)揮免疫抑制作用。本研究中反復(fù)肺炎組CD4+CD25+Treg水平明顯低于對照組(P<0.05)，可能與感染導(dǎo)致T細胞數(shù)量減少有關(guān)。

3.3兒童反復(fù)肺炎與炎性因子的關(guān)系IL-8的主要生物學功能是炎性反應(yīng)中趨化中性粒細胞、T淋巴細胞及嗜堿粒細胞到達病灶部位，中性粒細胞與IL-8接觸后到達病灶部位可以釋放一系列活性物質(zhì)，達到殺菌和細胞損傷的目的，同時IL-8對動員T淋巴細胞參與免疫反應(yīng)有一定的促進作用[16,17]。IL-17是一種促炎因子，具有與受體特異性結(jié)合，發(fā)揮促進炎癥發(fā)展、免疫應(yīng)答等功能[18]。本研究中反復(fù)肺炎組IL-8、IL-17水平高于對照組(P<0.05)。說明反復(fù)肺炎患兒存在炎性反應(yīng)。

3.4兒童反復(fù)肺炎與hBD的關(guān)系hBD是一種陽離子抗菌肽，具有抗菌和抗病毒的作用，參與機體免疫應(yīng)答，低水平時可以趨化炎性因子表現(xiàn)出抗炎作用，高水平表達時，可以趨化T淋巴細胞引起免疫反應(yīng)[19]。張濤等[20,21]對反復(fù)肺炎嬰幼兒血清hBD-1進行研究發(fā)現(xiàn)，其表達水平明顯低于健康嬰幼兒(P<0.05)，而hBD-2水平無明顯改變(P>0.05)。本研究中反復(fù)肺炎組hBD-1細胞水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，hBD-2水平高于對照組，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。說明反復(fù)肺炎患兒存在呼吸道防御障礙。

綜上所述，反復(fù)肺炎患兒存在免疫球蛋白IgG和IgA、T淋巴細胞、B細胞、NK細胞、hBD-1細胞低水平表達，IL-8和IL-17高水平表達，說明反復(fù)肺炎患兒存在體液、細胞免疫功能紊亂，同時呼吸系統(tǒng)防御能力降低，這可能是兒童反復(fù)肺炎病程遷延的原因之一。

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(收稿日期：2016-01-14)

【中圖分類號】R 725.631

【文獻標識碼】A

【文章編號】1002-7386(2016)09-1333-03

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.09.016