2型糖尿病大鼠主動脈Wnt/β-catenin信號通路的變化及SIRT1的調(diào)節(jié)作用

尹茂山，許淑紅，王 燕，孫曉慧，梁 辰，李 杰，牟艷玲

（1.山東省醫(yī)學科學院藥物研究所，山東濟南 250062；2.濟南大學山東省醫(yī)學科學院醫(yī)學與生命科學學院，山東濟南 250062；3.中國藥科大學，江蘇南京 211198）

2型糖尿病大鼠主動脈Wnt/β-catenin信號通路的變化及SIRT1的調(diào)節(jié)作用

尹茂山1，2，許淑紅3，王 燕1，孫曉慧1，2，梁 辰1，2，李 杰1，牟艷玲1

（1.山東省醫(yī)學科學院藥物研究所，山東濟南 250062；2.濟南大學山東省醫(yī)學科學院醫(yī)學與生命科學學院，山東濟南 250062；3.中國藥科大學，江蘇南京 211198）

目的 檢測Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白及沉默信息調(diào)節(jié)因子（SIRT1）在2型糖尿病大鼠主動脈中的表達變化，探究SIRT1對Wnt/β-catenin信號通路的調(diào)節(jié)作用，明確二者在糖尿病主動脈病變發(fā)生發(fā)展中的作用。方法 高脂飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，實驗將大鼠分為空白對照組、糖尿病2、4、8和12周模型組，血清檢測空腹血糖（FBG），總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C），空腹胰島素（FINS），HE染色法觀察主動脈病理結(jié)構(gòu)變化，RT-PCR法和Western blot法檢測主動脈Wnt2、β-catenin、TCF4、SIRT1和sFRP2等相關(guān)蛋白基因轉(zhuǎn)錄及表達變化。結(jié)果 與正常組比較，2型糖尿病大鼠TC、TG、LDL-C水平明顯升高，HDL-C水平明顯降低，隨著時間延長，糖尿病大鼠各時間點模型組與2周模型組相比較，TC、TG、LDL-C水平升高越來越明顯，HDL-C水平降低更明顯，差異均具有顯著性（P＜0.01）；顯微鏡下糖尿病組大鼠主動脈可見不同程度局灶性內(nèi)皮細胞空泡變性、甚至壞死。糖尿病組大鼠相對于正常對照組主動脈Wnt2和β-catenin的表達在2周及4周明顯增加（P＜0.01），4周后維持在較高水平；而TCF4、SIRT1的表達與正常對照組相比表現(xiàn)為持續(xù)的增加（P＜0.01）；sFRP2的表達在持續(xù)的降低（P＜0.01）。結(jié)論 2型糖尿病大鼠主動脈病變發(fā)生發(fā)展過程中，SIRT1通過調(diào)節(jié)sFRP2的表達來調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路的激活，參與糖尿病主動脈損傷的發(fā)生發(fā)展過程，進一步研究其在糖尿病主動脈損傷中的作用機制可能為糖尿病主動脈病找到新的治療靶點。

Wnt2；β-catenin；TCF4；SIRT1；sFRP2；2型糖尿??；主動脈損傷

糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）的發(fā)病率和死亡率呈逐年上升趨勢，心血管并發(fā)癥是DM患者死亡的主要原因。Wnt/β-catenin信號通路作為一條保守的信號傳導(dǎo)通路廣泛存在于各生物體中，參與調(diào)控細胞增殖、遷移、分化等細胞發(fā)育過程。近年來研究表明，Wnt/β-catenin信號通路參與主動脈內(nèi)皮細胞生長和分化［1］，在心血管疾病中起重要作用［2］。此外，Wnt/β-catenin信號通路的異?？赡芤鸫x綜合征［3］。沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information-regulator1，SIRT1）為哺乳動物Sirtuins家族成員之一，是一種依賴于煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）的去乙?；?，成人組織中廣泛表達。研究顯示［4－5］，SIRT1通過去乙?；嚓P(guān)因子調(diào)節(jié)作用Wnt/β-catenin在內(nèi)的多個細胞信號通路，參與血管內(nèi)皮細胞的保護作用，但在糖尿病主動脈病變過程中的作用仍不清楚。本文通過檢測Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白及SIRT1在2型糖尿病大鼠主動脈中的表達變化，探討SIRT1對該信號通路在DM主動脈中的表達調(diào)節(jié)作用，為糖尿病主動脈病變的治療提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及模型建立 健康♂SD大鼠50只，SPF級，體質(zhì)量150～180 g，購自山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司實驗動物中心。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按體重均衡的原則隨機分為正常對照組（A）10只，糖尿病模型組（B）40只。A組始終飼以普通飲食，B組采用高脂流質(zhì)（豬油30％，膽固醇2.5％，脫氧膽酸鈉1％，常規(guī)飼料66.5％）灌胃，兩組動物均自由飲水。5周后，B組大鼠禁食12 h，頸靜脈竇取血檢測血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）等生化指標，確定形成高脂模型，誘導(dǎo)出大鼠胰島素抵抗（insulin resistance，IR）狀態(tài)，聯(lián)合鏈脲菌素造模。B組大鼠一次性腹腔注射1％鏈脲菌素（30 mg·kg－1，pH＝4.5檸檬酸－檸檬酸三鈉緩沖液，4℃配制，現(xiàn)配現(xiàn)用），A組正常大鼠注射同體積檸檬酸－檸檬酸三鈉緩沖液。造模后72 h尾靜脈采血檢測空腹血糖值（fasting blood glu-cose，F(xiàn)BG），以FBG≥11.1 mmol·L－1，胰島素敏感指數(shù)降低，認為糖尿病大鼠模型成功。B組造模成功大鼠隨機分為2、4、8和12周模型組，繼續(xù)高脂飲食灌胃。A組繼續(xù)以普通飼料喂養(yǎng)4周。

1.2 材料與試劑 鏈脲佐菌素、戊巴比妥鈉（美國Sigma公司）；血糖試紙（強生中國醫(yī)療器材有限公司）；TG試劑盒、TC試劑盒、低密度脂蛋白－膽固醇（low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）試劑盒、高密度脂蛋白－膽固醇（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）試劑盒（四川邁克生物科技股份有限公司）；胰島素（insulin，INS）試劑盒（Lengton生物上海公司）；生物素標記山羊抗兔IgG/小鼠IgG二抗試劑盒（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）；Western blot一抗、二抗去除液、Western blot細胞裂解液、Western blot轉(zhuǎn)膜液、BCA蛋白濃度測定試劑盒（增強型）、SDS-PAGE凝膠配制試劑盒和SDS-PAGE電泳液均購自碧云天生物技術(shù)研究所；ProS-ieve Color ptrotein makers（美國Lonza Rockland公司）；PVDF膜（0.45 μm；美國SERVA公司）；增強型化學發(fā)光試劑（美國Millipore公司）；所用單克隆抗體為：Wnt2（美國Epitomics公司），β-catenin（美國Cell Signaling Technology公司），TCF4（英國Ab-cam公司），sFRP2（美國Cell Signaling Technology公司），β-actin（美國Ambobio公司）；PCR引物（中國BioSune）；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（美國ThermoFisher公司）。

1.3 空腹血糖及胰島素檢測 高脂灌胃5周后，大鼠一次性腹腔注射鏈脲菌素后72 h，禁食12 h，頸靜脈竇取血，離心分離血清，檢測空腹血糖及胰島素（fasting insulin，F(xiàn)INS）水平，計算胰島素敏感指數(shù)（insulin sensitive index，ISI），檢測胰島素敏感性變化，公式為ISI＝ln［1/（FINS×FBG）］。

1.4 標本收集 造模結(jié)束后，各模型組大鼠高脂灌胃，分別喂養(yǎng)至實驗設(shè)定的2、4、8和12周。大鼠麻醉，仰位固定，開胸，腹主動脈取血，5 ml/只，3 000 r ·min－1離心10 min，取上清，分裝，－20℃保存待測。生化儀檢測TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。迅速取出主動脈，用預(yù)冷生理鹽水洗凈，濾紙吸干，剔除血管周圍脂肪組織，分為兩部分：一部分用4％多聚甲醛固定，經(jīng)脫水、透明、包埋，制成主動脈組織石蠟塊；另一部分置于EP管，于液氮中保存待用。

1.5 HE染色 取正常對照組及各時間點模型組主動脈組織，制作石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水，蘇木精染色10 min，流水稍洗，體積分數(shù)1％的鹽酸酒精分化，流水沖洗數(shù)分鐘，伊紅染色5 min，流水稍洗，梯度酒精常規(guī)脫水，中性樹膠封片。Eclipse TE 2000-S免疫熒光顯微鏡拍照（日本Nikon），觀察主動脈組織病理結(jié)構(gòu)的改變。

1.6 Western blot 取正常組及各模型組大鼠主動脈組織，制備組織勻漿，每20 mg組織加入100～200 μL含1 mmol·L－1PMSF的裂解液，4℃下14 000×g離心10 min，取勻漿上清，用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定總蛋白濃度。20～50 μg總蛋白上樣量以濃度為8％的凝膠電泳進行分離。冰浴下恒流（300 mA）濕法轉(zhuǎn)膜2 h，體積分數(shù)5％的脫脂奶粉封閉1 h后與相應(yīng)一抗4℃共孵育過夜。TBS-T洗液洗滌，與辣根過氧化物標記的二抗共孵育，用增強型化學發(fā)光試劑進行顯色，并利用灰度分析軟件定量分析。

1.7 逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR） 取各組主動脈組織100～150 mg，均勻粉碎后按TRIzol提取程序（說明書）提取組織總RNA；按AMV逆轉(zhuǎn)錄試劑盒操作說明進行逆轉(zhuǎn)錄后，4℃保存。各目的基因的擴增引物序列，如Tab 1所示；擴增條件：94℃預(yù)變性3 min，然后94℃變性30 s，55℃變性30 s，72℃延伸60 s，共35個循環(huán)，最后72℃延伸5 min，快速冷卻至4℃保存。2％瓊脂糖凝膠電泳后，凝膠成像儀觀察，用BandScan 5.0軟件測定條帶灰度值，將mRNA、分別與β-actin mRNA灰度值的比值作為觀察指標，進行統(tǒng)計學分析。

1.8 統(tǒng)計學分析 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)以±s表示，組間差異比較采用方差分析及t檢驗。

2 結(jié)果

Tab 1 Primers used for qRT-PCR

Tab 2 The general characteristics of rats after DM model established（±s）

Tab 2 The general characteristics of rats after DM model established（±s）

ΔBW＝Body Weight（after 2 wks）-Body Weight（before）；*P＜0.05，**P＜0.01 vs control

Group n ΔBW/g FBG/mmol·L－1 FINS/mU·L－1ISI Control 10 29.360±2.336 5.776±0.267 19.712±0.836 －4.735±0.465 DM Model 36 －3.552±0.426** 32.150±0.997** 29.545±1.342* －6.856±0.761**

Tab 3 Changes of biochemical parameters in DM rats（±s）

Tab 3 Changes of biochemical parameters in DM rats（±s）

*P＜0.05，**P＜0.01 vs control；△P＜0.05 vs 2 week DM

Group n FBG/mmol·L－1 TG/mmol·L－1 TC/mmol·L－1 HDL-C/mmol·L－1 LDL-C/mmol·L －1 .225 0.638±0.077 0.117±0.021 2 week DM 9 30.612±4.375** 1.211±0.076** 2.323±0.167* 0.555±0.109* 0.178±0.029**4 week DM 9 34.078±6.715**△ 1.299±0.098** 2.776±0.096**△ 0.506±0.023* 0.221±0.016**△8 week DM 9 36.676±6.112**△ 1.374±0.097** 2.998±0.116**△ 0.499±0.036* 0.240±0.009**△12 week DM 9 36.118±5.733**△ 1.394±0.108** 3.332±0.109**△ 0.421±0.034*△ 0.249±0.015 Control 10 5.776±0.2671 1.107±0.023 2.151±0**△

Fig 1 HE staining of aorta of DM rats（×400）

2.1 大鼠模型建立情況 實驗期間，正常對照組大鼠狀態(tài)良好、健壯、皮毛油亮有光澤，自主活動正常，對外界反應(yīng)靈敏，無死亡。與正常對照組大鼠相比較，DM組大鼠逐漸消瘦，精神萎靡，皮毛無光澤，腥臊臭味加重等；且隨著時間延長，多飲、多食、多尿和消瘦表現(xiàn)加重，大鼠生存狀態(tài)越來越差，造模成功大鼠36只，成功率為90％。

2.2 造模后大鼠體重變化及FBG、FINS、ISI情況注射STZ造模72 h后，正常對照組大鼠體重增加，糖尿病組大鼠糖尿病模型組大鼠與對照組大鼠比較血清FBG、FINS明顯升高，ISI下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），表明2型糖尿病大鼠造模成功。見Tab 2。

2.3 大鼠血生化指標檢測 與正常對照組比較，模型組大鼠血清中FBG、TG、TC、LDL-C明顯升高（P ＜0.05）。而4、8周模型組與2周DM模型組相比較，大鼠血清TG含量略有升高，HDL-C略有降低，二者之間比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），8周和12周DM模型組各生化指標變化不大；FBG、TC、LDL-C繼續(xù)升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見Tab 3。

2.4 大鼠主動脈內(nèi)皮病理觀察結(jié)果 正常對照組大鼠主動脈內(nèi)皮細胞形態(tài)正常，內(nèi)皮細胞排列整齊，細胞核均勻分布，無變性、壞死等病理結(jié)構(gòu)改變。DM組大鼠主動脈內(nèi)皮細胞，胞質(zhì)豐富，細胞核由正常的圓形或橢圓形不同程度的出現(xiàn)變?yōu)殚L桿狀，排列紊亂，8周和12周DM大鼠內(nèi)皮細胞出現(xiàn)局部的細胞變性、細胞空泡化，甚至壞死（Fig 1）。

2.5 Wnt/β-catenin信號通路及SIRT1相關(guān)蛋白在大鼠主動脈中的表達 Westem blot實驗結(jié)果表明，糖尿病組大鼠相對于正常對照組主動脈Wnt2 和β-catenin的表達在2周及4周明顯增加（P＜0.01），4周后維持在較高水平，8周及12周相關(guān)蛋白表達變化差異沒有顯著性（P＞0.05）；糖尿病大鼠從2周到12周過程中，TCF4、SIRT1蛋白表達與正常對照組相比表現(xiàn)為持續(xù)的增加（P＜0.05），sFRP2蛋白的表達在持續(xù)的降低（P＜0.01）（Fig 2、3）。

2.6 Wnt/β-catenin信號通路及SIRT1 mRNA在大鼠主動脈中的轉(zhuǎn)錄水平 正常組大鼠主動脈組織細胞有一定量的Wnt2、β-catenin、TCF4及SIRT1 mRNA的表達，但表達量不隨時間的變化而變化（P ＞0.05），而sFRP2 mRNA始終維持在較高的轉(zhuǎn)錄水平。與正常組相比，各糖尿病組大鼠主動脈組織中Wnt2，β-catenin mRNA明顯增高（P＜0.01），且各模型組中，2周和4周組mRNA表達持續(xù)增加，8周和12周組維持在高表達水平，二者之間差異沒有顯著性（P＞0.05）；與此同時，各模型組中SIRT1和TCF4 mRNA的表達持續(xù)增高，sFRP2 mRNA表達水平持續(xù)降低，各組別之間差異也具有顯著性（P＜0.05）。見Fig 4。

Fig 2 The protein levels of Wnt2，β-catenin and TCF4 in total protein extracts of aorta from control and DM rats analyzed by Western blot（±s，n＝9）

3 討論

糖尿病可引起機體多個臟器的損害，主動脈等大血管疾病是2型糖尿病致死或致殘的主要原因。糖尿病主動脈內(nèi)皮細胞病變的發(fā)病機制及相關(guān)信號通路的研究也較少，探索血管內(nèi)皮功能異常的病理生理機制，并有效改善血管內(nèi)皮功能，可能是防治2型糖尿病心血管事件的靶點。

本實驗采用了高脂飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素建模方法［6］，建立2型DM大鼠模型，與正常對照組相比，DM大鼠血清TC、TG、LDL-C值有明顯升高，并呈現(xiàn)持續(xù)的高血糖，胰島素抵抗出現(xiàn)，糖尿病狀態(tài)形成。本研究中，DM大鼠FBG明顯升高，體重明顯低于正常對照組，DM大鼠主動脈出現(xiàn)局灶性內(nèi)皮細胞空泡變性、甚至壞死，表明DM大鼠主動脈出現(xiàn)不同程度的大血管損傷。

Wnt/β-catenin信號通路在大血管損傷中的作用也被廣泛關(guān)注［7］。Dabernat等［8］研究Wnt/β-catenin信號通路的異常會引起糖代謝的異常，增加2型糖尿病的風險，參與高糖介導(dǎo)的腎上皮細胞轉(zhuǎn)分化過程［9］。Xi等［10］在對1型糖尿病大鼠模型的研究中發(fā)現(xiàn)，DM狀態(tài)下，大鼠心肌Wnt/β-catenin信號通路被激活。因此，我們推測Wnt/β-catenin信號通路可能在DM主動脈損傷中起重要作用。

Fig 3 The protein levels of SIRT1 and sFRP2 in total protein extracts of aorta from control and DM rats analyzed by Western blot（±s，n＝9）

SIRT1可以通過調(diào)節(jié)FOXOs、NF-κB、AMPK等相關(guān)信號通路，對多種心血管疾病的病理生理過程產(chǎn)生重要影響，發(fā)揮保護心肌、舒張血管、抑制動脈粥樣硬化等作用［6］。Takeda等［11］認為，在單核－巨噬細胞中，SIRTl失活條件下，mTOR通路介導(dǎo)NF-κB信號激活，進而誘發(fā)動脈粥樣硬化發(fā)生。Yang等［12］研究發(fā)現(xiàn)，Sirtl過表達時，去乙?；⒓せ頛KB1，隨后AMPK的去磷酸化水平升高，進而正向調(diào)節(jié)細胞壽命和能量平衡，從而保護主動脈血管內(nèi)皮細胞功能，降低了動脈粥樣硬化的發(fā)生。另有研究［13］顯示，肝缺血－再灌注損傷中，SIRT1通過調(diào)節(jié)抑制Wnt信號通路，減少氧化損傷和細胞凋亡來保護肝細胞。而Zhou等［14］在研究間充質(zhì)干細胞時發(fā)現(xiàn)，SIRT1可以通過調(diào)節(jié)sFRP2的表達來調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號通路。但是，SIRT1在心血管系統(tǒng)對Wnt/β-catenin信號通路的調(diào)節(jié)還不清楚。

Fig 4 The mRNA expression of Wnt/β-catenin signaling，SIRT1 andsFRP2 in total RNA extracts of aortic tissue from control and DM rats using qRT-PCR（±s，n＝9）

Wnt/β-catenin信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中，Wnt蛋白與細胞膜上的跨膜受體結(jié)合，促使β-catenin降解復(fù)合體軸蛋白/結(jié)腸腺瘤樣息肉蛋白/糖原合成酶激酶3β（Axin/APC/GSK-3β）解聚而失活，抑制β-catenin的磷酸化及降解，促進β-catenin發(fā)生核轉(zhuǎn)移，與核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子TCF/LEF結(jié)合，激活下游靶基因啟動基因轉(zhuǎn)錄［15］。本研究中Western blot及RT-PCR結(jié)果表明2周和4周DM大鼠心肌Wnt2的表達增加，促進β-catenin發(fā)生核轉(zhuǎn)移，核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子TCF4的表達增加，顯示W(wǎng)nt/β-catenin信號通路的激活；與此同時，早期DM大鼠主動脈內(nèi)皮細胞的空泡變性、晚期甚至出現(xiàn)壞死等病變。而SIRT1表達持續(xù)增加，Wnt/β-catenin信號通路內(nèi)源性抑制劑sFRP2在DM早期高表達，持續(xù)期表達下降；可能是因為在DM早期，主動脈組織中Wnt/β-catenin信號通路的迅速激活，體內(nèi)廣泛存在的SIRT1合成增加，直接調(diào)節(jié)sFRP2抑制Wnt/β-catenin信號通路的β-catenin的表達；高血糖狀態(tài)持續(xù)，Wnt/β-catenin信號通路持續(xù)激活狀態(tài)，sFRP2則隨之降低。而SIRT1如何作用于sFRP2而發(fā)揮作用的，還需要進一步研究。

糖尿病主動脈病變是糖尿病心血管嚴重并發(fā)癥的重要組成部分，明確其發(fā)生發(fā)展機制，進而阻滯其發(fā)展成為研究熱點。本實驗揭示W(wǎng)nt/β-catenin信號通路的激活與SIRT1的調(diào)節(jié)作用，共同參與DM主動脈的損傷過程，我們將進一步研究二者在DM主動脈病變發(fā)展過程中的作用機制，以期為糖尿病主動脈病變的治療找到新的靶點。

（致謝：本實驗全部由山東省醫(yī)學科學院藥物研究所藥理學實驗室牟艷玲老師課題組獨立完成，感謝我的導(dǎo)師牟艷玲老師在實驗設(shè)計思路上提出的建議和意見及實驗技術(shù)上給予的指導(dǎo)。）

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Alteration of Wnt/β-catenin signaling pathway in type2 diabetic rats’aorta and regulation of SIRT1

YIN Mao-shan1，2，XU Shu-hong3，WANG Yan1，SUN Xiao-hui1，2，LIANG Chen1，2，LI Jie1，MU Yan-ling1
（1.Institute of Materia Medica，Shandong Academy of Medical Sciences，Jinan 250062，China；2.School of Medicine and Life Sciences，University of Jinan-Shandong Academy of Medical Sciences，Jinan 250062，China；3.China Pharmaceutical University，Nanjing 211198，China）

Aim To investigate the alteration of Wnt/β-catenin signaling and sirtuins 1in type 2 diabetic rats’aorta and clarify its role in the development of di-abetes aortic disease.Methods The type 2 diabetes rat model was established by injection of streptozocin after five-week of high fat diet.The rats were randomly divided into control group，DM model group of 2 weeks，4 weeks，8 weeks and 12 weeks.Fasting blood glucose（FBG），total cholesterol（TC），triglyceride （TG），high density lipoprotein-cholesterol（HDL-C），low density lipoprotein-cholesterol（LDL-C）and fast-ing insulin（FINS）levels were tested.HE staining was used to observe the pathological changes of aortal struc-tures.The alteration of Wnt2，β-catenin，TCF4，SIRT1 and sFRP2in aortawas determined by Western blot and RT-PCR.Results Compared with control group，TC，TG，LDL-C levels of type 2 diabetic rats were significantly increased，HDL-C levels were signif- icantly reduced（P＜0.01）.Aortic histological analy-sis revealed that DM induced aortic endothelial cell vacuolar degeneration and necrosis.The expression of Wnt2 and β-catenin level increased significantly in the first 4 weeks of diabetic groups compared to control group，and that in model group of 8 weeks and 12 weeks kept in the high level and showed no significant alteration（P＞0.05）.But the expression of TCF4 and SIRT1was enhanced continuously in DM compared with control group while sFRP2 decreased in the duration of DM development.Conclusions Wnt/β-catenin signa-ling pathway was activated in diabetic aortal injury by regulation of SIRT1 via sFRP2.Further researches on its mechanism of actionin DM aorta injury may find a new therapeutic target for the disease.

Wnt2；β-catenin；TCF4；SIRT1；sFRP2；type 2 diabetes；aorta injury

時間：2016－2－26 10：20 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160226.1020.018.html

10.3969/j.issn.1001－1978.2016.03.009

A

1001－1978（2016）03－0337－06

R-332；R322.121；R341；R394.2；R587.1

2015－11－18，

2015－12－28

國家自然科學基金資助項目（No 30701022）；山東省優(yōu)秀中青年科學家科研獎勵基金計劃（No BS2013SW008）

尹茂山（1987－），男，碩士生，研究方向：心血管藥理學，E-mail：maoshanyin＠126.com；牟艷玲（1975－），女，博士，副研究員，研究方向：心腦血管藥理學，通訊作者，E-mail：myling501＠hotmail.com