基質(zhì)金屬蛋白酶在類風濕性關(guān)節(jié)炎患者血清中的表達及意義

周瓊竦

[摘 要] 目的：探討基質(zhì)金屬蛋白酶在類風濕性關(guān)節(jié)炎患者血清中的表達及意義。方法：選取我院2011年7月—2014年10月收治的類風濕性關(guān)節(jié)炎病患125例作為研究組，按照配對方式選取我院同期健康體檢者125例為對照組。檢測2組MMP-9、MMP-3、MMP-2、MMP-1水平，并觀察分析RA病患血清高表達MMPs與PA、CRP、ES、WBC及PLT等血清生化學指標的相關(guān)性。觀察比較高活動度RA病患與中低活動度RA病患血清MMPs水平。結(jié)果：觀察組血清MMP-3、MMP-2與MMP-9水平明顯高于對照組，差異存在統(tǒng)計學意義（P<0.05）?；顒悠赗A血清MMP-3、MMP-2 、MMP-9水平顯著高于穩(wěn)定期RA，差異存在統(tǒng)計學意義。MMP-3、MMP-2 、MMP-9水平與CRP、PLT、ESR及WBC呈正相關(guān)（P<0.05）；與PA呈負相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：MMP-3、MMP-2與MMP-9在類風濕性關(guān)節(jié)炎血清中高表達，同時與RA進展評估指標呈正相關(guān)，能夠預(yù)測疾病嚴重程度。

[關(guān)鍵詞] 基質(zhì)金屬蛋白酶；類風濕性關(guān)節(jié)炎；活動度

中圖分類號：R593.22 文獻標識碼：B 文章編號：2095-5200（2016）02-055-03

DOI：10.11876/mimt201602020

類風濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一類以關(guān)節(jié)軟骨及骨質(zhì)破壞為特點的慢性炎癥性與自身免疫性疾病，以關(guān)節(jié)滑膜受累為主，臨床多表現(xiàn)為反復(fù)不愈的增生反應(yīng)、炎癥反應(yīng)軟骨及其下方骨質(zhì)遭到破壞，病情最終進展至骨關(guān)節(jié)不可逆性畸形[1]。文獻報道，過度降解細胞外基質(zhì)致使病患關(guān)節(jié)軟骨發(fā)生不可逆性退行性變是RA的一個重要特征[2]?；|(zhì)金屬蛋白酶 （Matrix Metallo proteinases，MMPs ）是和細胞外基質(zhì)及其功能存在緊密相關(guān)性的一類蛋白酶家族，同時，從RA病患采集的關(guān)節(jié)液中可發(fā)現(xiàn)MMP-2 與MMP-3高表達[3]。但采集關(guān)節(jié)液樣本是有創(chuàng)檢查，采集操作步驟也稍顯煩瑣。本次實驗采集RA病患外周血樣本，分析MMPs家族在血清中表達情況及其臨床運用價值，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2011年7月—2014年10月收治的類風濕性關(guān)節(jié)炎病患125例作為研究組，診斷按照1987年美國風濕病學會制定的RA診斷標準，其中高活動度RA病患[4]（DAS28≥5.1）67例，中低活動度RA病患（DAS28<5.1）58例。排除標準：1）確診為其他免疫風濕疾病者；2）合并糖尿病、高血壓等慢性疾病者；3）病患及其家屬不愿參與本次實驗或病患依從性較差者。按照配對方式選取我院同期健康體檢者125例為對照組，使2組年齡、性別等一般臨床資料差異不存在統(tǒng)計學意義。

1.2 方法

采2組空腹清晨靜脈血2mL，離心，提取上層血清，將其分裝入1.5mL的EP管中，并置入-70℃冰箱保存。

ELISA法檢測MMPs水平，操作嚴格按照試劑盒的使用操作說明書進行。前白蛋白 （PA）使用日本的Hitachi7600自動生化儀進行檢測，C反應(yīng)蛋白 （CRP）使用Beckman Coulter公司（美國）的全自動免疫分析儀進行檢測，血沉 （ESR）使用ALIFAX公司（意大利）的全自動血沉分析儀進行檢測，白細胞 （WBC）及血小板 （platelet， PLT）使用Sysmex公司（日本）的全自動血液分析儀進行檢測。

比較2組血清MMP-9、MMP-3、MMP-2、MMP-1水平，并觀察分析RA病患血清高表達MMPs蛋白與PA、CRP、ES、WBC及PLT等血清生化學指標的相關(guān)性。觀察比較高活動度RA病患與中低活動度RA病患血清MMPs水平。

1.3 統(tǒng)計學方法

使用SPSS18.0軟件對所采集數(shù)據(jù)進行分析，計量資料使用（x±s）表示，采用2組間t檢驗；使用Spearman相關(guān)分析對MMPs與血清生化指標進行分析，以P<0.05為差異存在統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 比較2組受試者血清MMPs水平

2組血清MMP-1水平差異不存在統(tǒng)計學意義（P>0.05）；觀察組血清MMP-3、MMP-2與MMP-9水平明顯高于對照組，差異存在統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 中低活動度與高活動度RA病患MMPs水平比較

活動期RA病患血清MMP-3、MMP-2 、MMP-9水平顯著高于穩(wěn)定期RA病患，差異存在統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表2。

2.3 MMPs與生化指標相關(guān)性分析

如上所述，MMPs家族中MMP-2 、MMP-3、MMP-9在RA病患血清中高表達。3者水平與CRP、PLT、ESR及WBC呈正相關(guān)（P<0.05）；與PA呈負相關(guān)（P<0.05），見表3。

3 討論

現(xiàn)今對RA病因及發(fā)病機制尚未研究清楚，這既限制了RA疾病的早期診斷和篩查，也使得臨床缺少特異性的治療藥物與手段[5]。RA機制研究的推進，為臨床早期診斷與篩查及病情進展判斷提供檢測依據(jù)，也將為臨床靶向治療靶點。目前認為，關(guān)節(jié)軟骨及其周圍骨質(zhì)退行性病變及不斷破壞與作為軟骨細胞生存基礎(chǔ)的細胞外基質(zhì)持續(xù)降解存在極為緊密聯(lián)系[6-7]。

MMPs家族主要參與細胞外基質(zhì)降解及結(jié)構(gòu)改型與重塑，現(xiàn)已有二十多種家族成員被發(fā)現(xiàn)和研究[8]。

文獻[9-10]報道，細胞外基質(zhì)降解關(guān)鍵步驟是活化MMPs，在RA病患關(guān)節(jié)液中存在著異常增高MMPs及其相關(guān)蛋白，其中以MMP-3與MMP-2升高最為顯著，其能夠直接降解骨質(zhì)與關(guān)節(jié)軟骨來推進RA病情發(fā)展。Avdeeva等[11]對MMPs家族在骨關(guān)節(jié)液中含量分析檢測，發(fā)現(xiàn)其對風濕免疫相關(guān)疾病診斷篩查及病情活動與否判斷具有較高價值。但當臨床檢測出MMPs明顯升高時，關(guān)節(jié)滑膜、軟骨及其相關(guān)骨質(zhì)已經(jīng)遭受嚴重損害，治療效果已經(jīng)大打折扣[12]。研究證實[13]，在RA病患外周血清樣本中可同樣檢測出異常增高MMPs家族，同時發(fā)現(xiàn)其與血管形成相關(guān)步驟存在密切關(guān)系，而在關(guān)節(jié)囊內(nèi)及滑膜表面形成新生血管翳能夠促進對炎癥細胞及相關(guān)因子募集，且可直接引起關(guān)節(jié)軟骨及其周圍骨質(zhì)慢性炎癥反應(yīng)。

本研究進一步對不同活動度患者進行分析發(fā)現(xiàn)高活動度患者血清MMP-9、MMP-3、MMP-2水平顯著高于中低活動度患者，這與國內(nèi)外相關(guān)研究[14-15]結(jié)果相似，表明MMPs水平與RA嚴重程度存在緊密聯(lián)系。MMP-2作用底物包含Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅺ型膠原及蛋白多糖、層黏連蛋白、纖維結(jié)合素等重要關(guān)節(jié)軟骨組成成分，直接破壞和損傷關(guān)節(jié)軟骨[16]。MMP-3作為一種水解蛋白酶，能夠直接破壞軟骨組織，同時使間質(zhì)膠原酶與膠原蛋白酶等激活而引發(fā)瀑布式軟骨組織破壞反應(yīng)，進一步促進形成血管翳及降解軟骨組織[17]。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)MMP-9、MMP-3和MMP-2與CRP、PLT、ESR及WBC等血清生化指標呈正相關(guān)，與PA呈負相關(guān)。這表明血清MMPs高表達蛋白水平與RA病情進展緊密關(guān)聯(lián)，其能夠較好反映病情進展程度。

綜上所述，MMP-9、MMP-3與MMP-2在RA病患血清中表達異常，能夠客觀準確對RA病病情及活動與否進行判斷。

參 考 文 獻

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