門(mén)診患者血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

吳慶，陳櫟江，徐春泉，周翠，張雪青，余方友，周鐵麗（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院　醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，浙江　溫州　325015）

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門(mén)診患者血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

吳慶，陳櫟江，徐春泉，周翠，張雪青，余方友，周鐵麗
（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，浙江溫州325015）

[摘 要]目的：了解本院門(mén)診患者血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理使用抗菌藥物提供依據(jù)。方法：采用BacT/Alert 3D全自動(dòng)血培養(yǎng)儀進(jìn)行血培養(yǎng)，VITEK 2 COMPACT全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)進(jìn)行菌株的鑒定和藥敏試驗(yàn)，使用Whonet 5.6軟件進(jìn)行耐藥率分析。結(jié)果：從7 774瓶門(mén)診血培養(yǎng)送檢標(biāo)本中共分離出病原菌1 221株，培養(yǎng)陽(yáng)性率為15.7%，剔除重復(fù)株后陽(yáng)性菌株為569株。其中革蘭陰性菌325株（占57.1%），包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌，分別占25.0%、12.8%和3.3%，并檢出沙門(mén)菌12株、創(chuàng)傷弧菌5株和布魯氏菌3株；革蘭陽(yáng)性菌237株（占41.7%），包括表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和人葡萄球菌等，分別占10.5%、6.2%和5.1%；真菌7株（占1.2%）。病原菌的耐藥率相對(duì)來(lái)說(shuō)較低，肺炎克雷伯菌的產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）陽(yáng)性率為11.1%，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的分離率為28.6%，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)抗菌藥物耐藥率小于1.0%，未發(fā)現(xiàn)耐萬(wàn)古霉素葡萄球菌。結(jié)論：門(mén)診患者血培養(yǎng)的主要病原菌為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和金黃色葡萄球菌，并且這些細(xì)菌對(duì)臨床常用抗菌藥物有較好的敏感性。

[關(guān)鍵詞]血培養(yǎng)；血流感染；病原菌；耐藥性

血流感染（bloodstream infection，BSI）屬?lài)?yán)重感染性疾病，病情兇險(xiǎn)，病死率高。血培養(yǎng)是BSI診斷、治療和病情監(jiān)測(cè)的關(guān)鍵，對(duì)臨床醫(yī)師合理使用抗菌藥物，控制BSI病原菌耐藥株的產(chǎn)生和發(fā)展，具有十分重要的臨床意義[1]。為此，本研究對(duì)溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2011年7月-2014年6月期間從門(mén)診BSI患者的血培養(yǎng)標(biāo)本中分離到的非重復(fù)病原菌569株，對(duì)其菌群分布及耐藥性進(jìn)行回顧性分析?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1　材料和方法

1.1菌株來(lái)源 收集2011年7月-2014年6月期間溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院門(mén)診送檢的7 774瓶血培養(yǎng)標(biāo)本。

1.2儀器與試劑 BacT/Alert 3D全自動(dòng)血培養(yǎng)儀及其配套血培養(yǎng)瓶，VITEK 2 COMPACT型全自動(dòng)微生物分析儀及配套用細(xì)菌鑒定卡和藥敏卡均購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司。頭孢哌酮-舒巴坦和替考拉寧藥敏紙片購(gòu)自英國(guó)Oxoid公司。

1.3菌株培養(yǎng)鑒定及藥敏 按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行操作。無(wú)菌操作抽取靜脈血10～20 mL迅速注入到血培養(yǎng)瓶（需氧瓶和厭氧瓶）中（有條件者，可采集兩套或三套的血培養(yǎng)），立即送檢，將血培養(yǎng)瓶置于全自動(dòng)血培養(yǎng)儀中進(jìn)行培養(yǎng)，對(duì)陽(yáng)性報(bào)警標(biāo)本接種分離細(xì)菌。使用全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行菌株鑒定及藥敏試驗(yàn)。頭孢哌酮-舒巴坦和替考拉寧的藥敏試驗(yàn)采用紙片擴(kuò)散法（K-B法），藥敏結(jié)果判斷根據(jù)CLSI 2011年標(biāo)準(zhǔn)[2]判讀，質(zhì)量控制以金黃色葡萄球菌ATCC 25923、大腸埃希菌ATCC 25922和銅綠假單胞菌ATCC 27853（均購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心）為標(biāo)準(zhǔn)菌株。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 使用Whonet5.6軟件進(jìn)行耐藥率分析。

2　結(jié)果

2.1病原菌的檢出與分布 從7 774瓶門(mén)診患者血培養(yǎng)標(biāo)本中培養(yǎng)分離病原菌1 221株，陽(yáng)性率為15.7%，剔除重復(fù)菌株后為569株。其分布及構(gòu)成比見(jiàn)表1。

2.2多藥耐藥菌檢出率 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的檢出率分別為49.6%和11.9%；耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林的表皮葡萄球菌和耐甲氧西林人葡萄球菌的檢出率分別為28.6%、57.1%和76.0%。

2.3耐藥率 主要革蘭陰性菌及革蘭陽(yáng)性菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率見(jiàn)表2-3。

3　討論

BSI是一種嚴(yán)重的全身感染性疾病，如果不及時(shí)治療，患者的病死率高，危害重。國(guó)內(nèi)外有很多文獻(xiàn)關(guān)于血培養(yǎng)病原菌的菌株分布及耐藥性分析，但很少有提到門(mén)診患者血培養(yǎng)的情況。

本研究結(jié)果顯示，7 774例門(mén)診患者血培養(yǎng)中，共檢出病原菌1 221株，檢出率為15.7%，遠(yuǎn)高于國(guó)內(nèi)一些文獻(xiàn)[3-4]的報(bào)道；革蘭陰性菌的檢出率高于革蘭陽(yáng)性菌，與文獻(xiàn)[5-7]報(bào)道血培養(yǎng)分離病原菌的分布趨勢(shì)較為一致。其中，檢出的革蘭陰性菌以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、沙門(mén)菌屬為主；革蘭陽(yáng)性菌以表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌及人葡萄球菌為主，表皮葡萄球菌和人葡萄球菌等凝固酶陰性葡萄球菌是導(dǎo)管相關(guān)性血流感染（catheter related blood stream infection，CRBSI）的主要病原菌，因?yàn)殚T(mén)診患者大多沒(méi)有留置導(dǎo)管，并且這些凝固酶陰性葡萄球菌都是以單瓶血培養(yǎng)報(bào)陽(yáng)性為主，所以筆者認(rèn)為從門(mén)診患者血培養(yǎng)中檢到的凝固酶陰性葡萄球菌大部分是由于消毒不完全而導(dǎo)致的污染菌，而并非正常的病原菌；共檢出了7株真菌，只占所有病原菌的1.2%，這提示門(mén)診患者由真菌引起的BSI的比例是比較低的。

表1　血培養(yǎng)陽(yáng)性病原菌的分布及構(gòu)成比

本次研究還檢出了5株創(chuàng)傷弧菌和3株布魯氏菌。創(chuàng)傷弧菌所致的敗血癥病死率超過(guò)50.0%，所以如果檢到創(chuàng)傷弧菌一定要及時(shí)通知臨床，為患者的及時(shí)治療提供病原學(xué)依據(jù)。布魯氏菌是布魯氏菌病的病原體，布魯氏菌病主要發(fā)生在我國(guó)西部和北部的牧區(qū)，而我們本次研究的所在地為溫州市，屬

于我國(guó)的東南沿海城市，過(guò)去很少發(fā)現(xiàn)布魯氏菌病，而近3年，我院門(mén)診發(fā)現(xiàn)了3例該病例，因此臨床醫(yī)師尤其是感染科的醫(yī)師對(duì)此一定要特別關(guān)注。布魯氏菌對(duì)人有極強(qiáng)致病力，常導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室獲得性感染。為了減少實(shí)驗(yàn)室感染的發(fā)生，所有的血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本的操作都應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

表2　主要革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

表3　主要革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率

本次研究的藥敏結(jié)果顯示，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)抗菌藥物高度敏感，對(duì)厄他培南和亞胺培南的耐藥率均小于1.0%，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs檢出率分別為49.6%和11.9%，遠(yuǎn)低于衛(wèi)生部全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)的數(shù)據(jù)[8]。除了大腸埃希菌對(duì)部分臨床常用的抗菌藥物的耐藥率在50.0%以上，其他的腸桿菌科細(xì)菌如肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌和沙門(mén)菌屬細(xì)菌的耐藥率大部分都在20.0%以下。提示臨床常用抗菌藥物對(duì)門(mén)診BSI患者分離到的腸桿菌科細(xì)菌具有較好的抗菌活性。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的檢出率為28.6%，也遠(yuǎn)低于衛(wèi)生部全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)的數(shù)據(jù)[8]；金黃色葡萄球菌除了對(duì)青霉素、克林霉素和紅霉素的耐藥率較高外，對(duì)于其他的臨床常用抗菌藥物都有較好的敏感性。

綜上所述，門(mén)診BSI患者的常見(jiàn)病原菌以腸桿菌科細(xì)菌和金黃色葡萄球菌為主，并且這些病原菌的耐藥率遠(yuǎn)低于住院BSI患者的病原菌，所以臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗菌藥物，從而減緩或避免耐藥菌株的出現(xiàn)。

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（本文編輯：吳昔昔）

·消息·

Distribution and drug resistance of pathogenic bacteria isolated from blood culture in outpatients

WU Qing,CHEN Lijiang,XU Chunquan,ZHOU Cui,ZHANG Xueqing,YU Fangyou,ZHOU Tieli.Center for Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou,325015

Abstract:Objective:To investigate distribution and drug resistance of pathogenic bacteria isolated from blood culture in outpatients,to provide reference for the clinical rational use of antibiotics.Methods:Blood samples were cultured by BacT/Alert 3D automated system,the identification of strains and the drug susceptibility testing were performed by VITEK 2 COMPACT system,the data were analyzed with Whonet 5.6 software.Results:Totally 1 221 strains were isolated from 7 774 blood culture specimens in outpatients,with the positive rate of 15.7%,there were 569 positive cultures after the repeated strains were get rid of.Among the bacterial strains ,the percentages of the gram-negative bacteria,gram-positive bacteria and fungi were 57.1% (325 strains),41.7% (237 strains) and 1.2% (7 strains),respectively.Pathogenic bacteria resistance rate was relatively low,the positive rate of ESBLs in Klebsiella pneumoniae was 11.1%,resistance of methicillin-resistant Staphylococcus aureus isolation rate was 28.6%; separation of Enterobacteriaceae to carbapenem antibacterial drug resistance＜1.0%,vancomycin resistant Staphylococcus aureus did not be found.Conclusion:The main pathogens of outpatient blood culture are Staphylococcus aureus,Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae,and these bacteria are better sensitivity to commonly used antibiotics in clinical practice.

Key words:blood culture; bloodstream infection; pathogen; drug resistance

作者簡(jiǎn)介：吳慶（1979-），男，浙江溫州人，主管技師。

基金項(xiàng)目：溫州市科技局科研基金資助項(xiàng)目（Y20130286）。

收稿日期：2015-05-19

[中圖分類(lèi)號(hào)]R378

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]B

DOI:10.3969/j.issn.2095-9400.2016.03.014