EZH- 2在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其與肌層浸潤的相關(guān)性研究

沈曉萍，王娟，藤銀成

(上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科，上?！?02150)

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EZH- 2在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其與肌層浸潤的相關(guān)性研究

沈曉萍，王娟，藤銀成

(上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科，上海202150)

[摘要]目的：分析果蠅zeste基因增強(qiáng)子同源物2(EZH2)在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)，探討將EZH2作為子宮內(nèi)膜癌演進(jìn)的臨床監(jiān)測指標(biāo)的可行性。方法:應(yīng)用免疫組化 SP法檢測正常子宮內(nèi)膜組織(25例)、子宮內(nèi)膜不典型增生組織(30例)、子宮內(nèi)膜癌組織(60例)及相應(yīng)的癌旁正常組織(56例)中EZH2蛋白的表達(dá)，對不同類型的子宮內(nèi)膜組織中EZH2的表達(dá)情況進(jìn)行比較并分析子宮內(nèi)膜癌組中EZH2的表達(dá)與臨床病理特征關(guān)系。結(jié)果:EZH2陽性表達(dá)率子宮內(nèi)膜不典型增生和子宮內(nèi)膜癌組織顯著高于正常子宮內(nèi)膜和癌旁正常組織(均P<0.05)，且子宮內(nèi)膜癌組織顯著高于子宮內(nèi)膜不典型增生組織(P<0.05)。EZH2表達(dá)與國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)病理分期、組織學(xué)分級及肌層浸潤深度有顯著關(guān)系(P<0.05)。結(jié)論:EZH2能有效反映子宮內(nèi)膜癌的惡性程度，有利于子宮內(nèi)膜癌的臨床監(jiān)測和診療指導(dǎo)，可作為子宮內(nèi)膜癌的新檢測指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞]子宮內(nèi)膜癌； EZH2； 相關(guān)性研究

子宮內(nèi)膜癌(endometrial carcinoma)又稱子宮體癌，為現(xiàn)代女性生殖系統(tǒng)最常見的三大惡性腫瘤之一。其患病率約占女性生殖道惡性腫瘤的25%，并正逐年升高，子宮內(nèi)膜癌的罹患率已有接近甚至超過宮頸癌的趨勢。隨著生物科技的迅速發(fā)展，對于疾病的研究越來越多的涉及到了基因和分子水平[1]。大量研究表明，果蠅zeste基因增強(qiáng)子同源物2(enhancer of zeste homolog2，EZH2)的高表達(dá)與人體多種惡性腫瘤的增殖、浸潤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有密切聯(lián)系，包括血液系統(tǒng)惡性腫瘤、消化系統(tǒng)惡性腫瘤、泌尿系統(tǒng)及呼吸系統(tǒng)等[2]。本研究旨在通過觀察EZH2在子宮內(nèi)膜癌的表達(dá)情況及其與肌層浸潤的相關(guān)性，來探討EZH2與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展及臨床預(yù)后的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇上海第六人民醫(yī)院病理科2012年4月至2014年4月存檔的石蠟包埋標(biāo)本。排除有放療、化療史或性激素類藥物治療史的患者標(biāo)本。符合上述標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)本共115例，其中包括正常子宮內(nèi)膜25例、子宮內(nèi)膜不典型增生30例和子宮內(nèi)膜癌60例，且60例子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本中有56例有相應(yīng)的癌旁正常組織標(biāo)本。手術(shù)病理分期采用2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)關(guān)于內(nèi)膜癌的標(biāo)準(zhǔn)，60例子宮內(nèi)膜癌中，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分別有17例、14例、23例、6例；病理分級G1、G2、G3分別有30例、21例、9例；肌層浸潤深度≤1/2者22例，>1/2者38例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移17例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移43例；絕經(jīng)48例，未絕經(jīng)12例。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本的處理[3]所有石蠟切片置37 ℃恒溫箱孵育過夜之后60 ℃烘烤60 min。采用免疫組化(SP)法進(jìn)行染色，上述操作均嚴(yán)格按照相應(yīng)說明書進(jìn)行。其中陰性對照選用的一抗為1%的磷酸鹽緩沖液(PBS)，陽性對照則選用已知EZH2蛋白陽性的切片。本研究所用的兔抗人EZH2多克隆抗體、免疫組化SP試劑盒及PBS均選購于北京中杉生物技術(shù)公司。

1.3標(biāo)本結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)[4]

染色結(jié)果的判定方法選用雙盲法。判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：(1) 染色強(qiáng)度共分4級：無著色為0級、淺著色為1級、中度著色為2級、棕黃色或棕色為3級；(2) 陽性細(xì)胞占比可分4級：無著色為0級、< 25%為1級、≥25%而<50%為2級、≥50%為3級；兩種積分相加，采用半定量法進(jìn)行判定：0級為-，1～2級為+，3～4級為++，5～6級為+++，其中>2級為陽性，≤2級為陰性。所有切片均由兩位病理科專家進(jìn)行獨(dú)立判定，當(dāng)結(jié)果不一致時，由第三位專家進(jìn)行判定。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2結(jié)果

2.14種不同類型的子宮內(nèi)膜組織中EZH2的表達(dá)情況比較見表1。

表14種不同類型的子宮內(nèi)膜組織中EZH2的表達(dá)情況

例

注：括號內(nèi)為百分比

與正常子宮內(nèi)膜組比較，aP<0.05；與癌旁正常組織組比較，bP<0.05；與子宮內(nèi)膜不典型增生組比較，cP<0.05

EZH2陽性表達(dá)率子宮內(nèi)膜不典型增生組、子宮內(nèi)膜癌組均顯著高于正常子宮內(nèi)膜組和癌旁正常組織組(P<0.05)；子宮內(nèi)膜癌組的EZH2陽性表達(dá)率顯著高于子宮內(nèi)膜不典型增生組(P<0.05)。

2.2子宮內(nèi)膜癌組中EZH2的表達(dá)與其臨床病理特征關(guān)系見表2。

EZH2在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與FIGO的手術(shù)病理分期、組織學(xué)分級和肌層浸潤深度有顯著關(guān)系(P<0.05)；但與是否絕經(jīng)、是否有淋巴轉(zhuǎn)移及患者術(shù)后生存率關(guān)系不明顯(P>0.05)。

表2子宮內(nèi)膜癌中EZH2的表達(dá)與其臨床病理特征關(guān)系(n=60)

例

注：括號內(nèi)為百分比

3討論

子宮內(nèi)膜癌是婦科最常見的惡性腫瘤之一，尋找適合、可靠的腫瘤指標(biāo)對于子宮內(nèi)膜癌的早期診斷、個體治療方案的制定和臨床預(yù)后的判斷均有重要意義。

EZH2基因是這幾年腫瘤領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。EZH2與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)；EZH2首先發(fā)現(xiàn)于血液系統(tǒng)疾病，隨后在大腸癌、肝癌、前列腺癌、非小細(xì)胞肺癌、宮頸癌及乳腺癌等腫瘤組織中也發(fā)現(xiàn)高表達(dá)的EZH2蛋白。

本研究結(jié)果表明：EZH2陽性表達(dá)率子宮內(nèi)膜不典型增生組、子宮內(nèi)膜癌組均顯著高于正常子宮內(nèi)膜組和癌旁正常組織組(P<0.05)，且子宮內(nèi)膜癌組的EZH2陽性表達(dá)率顯著高于子宮內(nèi)膜不典型增生組(P<0.05)，表明EZH2基因在惡性組織中高表達(dá)，在正常組織中低表達(dá)，與已有研究[5]結(jié)果一致。

本研究結(jié)果顯示：EZH2在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與FIGO的手術(shù)病理分期、組織學(xué)分級和肌層浸潤深度有顯著關(guān)系(P<0.05)。EZH2的高表達(dá)可促使細(xì)胞增殖異常。EZH2蛋白普遍存在于正常胚胎組織中，使得基因表達(dá)處于被抑制的狀態(tài)，從而有利于胚胎的正常發(fā)育；而在正常衰老的細(xì)胞中低表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞復(fù)制性衰老的進(jìn)程[6]；EZH2蛋白可能對DNA的損傷修復(fù)產(chǎn)生抑制作用，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的發(fā)生[7]。本研究結(jié)果還表明，EZH2在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與是否絕經(jīng)、是否有淋巴轉(zhuǎn)移及患者術(shù)后生存率無顯著關(guān)系(P>0.05)，該結(jié)果與李蘭玉等[8]的研究結(jié)果有一定的差異，因此，EZH2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和術(shù)后生存率的關(guān)系還需進(jìn)一步擴(kuò)大組織標(biāo)本量和延長術(shù)后隨訪時間來進(jìn)一步深入探討。

綜上所述，EZH2編碼的蛋白可運(yùn)用于子宮內(nèi)膜癌的檢測，對子宮內(nèi)膜癌的早期診治具有很好的指導(dǎo)意義，同時也可以考慮將EZH2作為子宮內(nèi)膜癌基因治療的新靶點(diǎn)。

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doi：10.3969/j.issn.1671- 6264.2016.02.024

[中圖分類號]R737.33

[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]B

[文章編號]1671- 6264(2016)02- 0244- 03

[作者簡介]沈曉萍(1971-)，女，上海人，主治醫(yī)師,醫(yī)學(xué)碩士。E- mail: shenxhyhgd@163.com

[收稿日期]2015- 09- 01[修回日期] 2015- 12- 24

[引文格式] 沈曉萍，王娟，藤銀成.EZH- 2在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其與肌層浸潤的相關(guān)性研究[J].東南大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版，2016,35(2)： 244- 246.

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