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    傣藥燈臺葉化學成分、藥理作用、質量控制及臨床應用研究進展

    2016-04-06 01:23:57楊妮娜王燦紅趙應紅云南中醫(yī)學院中藥學院云南昆明650500西雙版納傣族自治州傣醫(yī)醫(yī)院云南西雙版納66600
    中成藥 2016年3期
    關鍵詞:化學成分藥理作用臨床應用

    楊妮娜, 王燦紅, 趙應紅(.云南中醫(yī)學院中藥學院,云南昆明650500;2.西雙版納傣族自治州傣醫(yī)醫(yī)院,云南西雙版納66600)

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    傣藥燈臺葉化學成分、藥理作用、質量控制及臨床應用研究進展

    楊妮娜1,2, 王燦紅1, 趙應紅2*
    (1.云南中醫(yī)學院中藥學院,云南昆明650500;2.西雙版納傣族自治州傣醫(yī)醫(yī)院,云南西雙版納666100)

    摘要:本文通過調研國內外文獻和傣醫(yī)藥相關資料,對燈臺葉的化學成分、藥理作用,質量控制和臨床應用進行整理研究,以期為該藥材及其相關新產品的開發(fā)利用提供參考,并促進化學、藥理及質量控制等現(xiàn)代研究和臨床應用的有機結合。

    關鍵詞:燈臺葉;化學成分;藥理作用;質量控制;臨床應用

    隨著空氣污染日益加重,呼吸系統(tǒng)疾病逐漸成為臨床常見病和多發(fā)病[1-3],燈臺葉作為常用傣藥,被廣泛用于此類疾病的治療與預防[4-7]。它為夾竹桃科雞骨常山屬植物糖膠樹Alstonia scholaris(L.)I.Br.的干燥樹葉,傣語習稱“擺埋丁別”,味苦、微澀、寒,入火、水塔,具有清火解毒、消腫止痛、止咳化痰的功效,主治咳嗽氣喘、百日咳、胃痛、泄瀉、瘧疾、跌打損傷、潰瘍出血等疾病,收載于《中國藥典》(1977年版)和《云南省中藥材標準》(2005年版)第七冊[8-9]?,F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn),燈臺葉主要含生物堿、黃酮、萜類等活性成分,具有止咳平喘、解痙、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗瘧疾、抗氧化、免疫調節(jié)、調節(jié)腸胃、調節(jié)血脂和血糖等藥理作用[10-16]。本文現(xiàn)將近年來國內外關于燈臺葉化學成分、藥理作用、質量控制的研究進行綜述,同時調研傣醫(yī)經(jīng)典著作,闡述其在傣醫(yī)臨床中的應用,為燈臺葉及其制劑的進一步研究提供依據(jù)和參考。

    1 化學成分研究

    1.1 生物堿成分 目前從燈臺樹不同藥用部位中分離出的生物堿有70余種,絕大多數(shù)都存在于葉中,以單萜吲哚類

    生物堿為主。按照骨架結構不同,可分為8類,即勁直胺型、糖膠樹堿、燈臺樹明堿、土波臺文堿、鴨腳木明堿、狄他樹皮堿、狄他樹皮定型、其他生物堿。其中,鴨腳樹葉堿、燈臺樹明堿、燈臺堿、雞骨常山堿、土波臺文堿是近年研究的熱點[17 -19],結構見圖1。

    從燈臺葉中分離出的生物堿有a1istonitrine A、picra1ina1、mani1amine、N4-methy1angusti1obine B、19,20-(E)-va11esamine、angusti1obine B N4-oxide、20(S)-tubotaiwine、6,7-seco-angusti1obine B、scho1aricine、19-epi-scho1aricine、sarpagine、N4-demthy1echitamine、echitamidine、strictamine、akuammidine、va11esamine、1agunamine、1osbanine、Nb-methy1scho1aricine、nare1ine ethy1 ether、19-E-picrinine、va11esamine Nb-oxide、N-formy1scho1arine、a1schomine、isoa1schomine、tubotaiwine、1agunamine、20(S)-tubotaiwine、scho1-arine-N(4)-oxide、狄他樹皮定、鴨腳嘎叮、肯樂因、N (4)-甲基阿枯米辛、花冠木堿、那瑞靈、文特品、異肯樂因、熱嗪胺、瓦勒胺、17-O-乙?;宜麡淦ざ?、吳茱萸次堿、偽阿桔米精、管臺文、勁直胺、5β-甲氧基勁直胺、糖膠樹皮堿、N4-去甲基狄他樹皮堿等[17-25]。

    圖1 主要生物堿結構式

    1.2 黃酮類成分 惠婷婷等[26]通過乙醇回流提取、反相硅膠色譜分離純化,結合理化及波譜鑒定等手段,從燈臺葉中分離出8個黃酮類成分,即山萘酚、槲皮素、異鼠李素、異鼠李素-3-O-β-D-半乳糖苷、山萘酚-3-O-β-D-半乳糖-(2→1)-O-β-D-木糖苷、山萘酚-3-O-β-D-半乳糖苷、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷和槲皮素-3-O-β-D-半乳糖-(2→1)-O-β-D-木糖苷。杜國順等[27]又從中分得7,3',4'-三甲氧基-5-羥基黃酮、1-羥基-3,5-二甲氧基-雙苯吡酮、3,5,7,4'-四羥基黃酮。

    1.3 萜類成分 燈臺葉中的萜類成分以三萜為主,即齊墩果酸、角鯊烯、乙酰-α-香樹醇酯、胡蘿卜苷、生育酚、燈臺葉素A、yie1ded betu1in、betu1inic acid、urso1ic acid、a1-stonic acids A、a1stonic acids B、cyc1oeuca1eno1、cyc1oartano1、1upeo1、1upeo1 acetate、betu1in等[27-31]。其中,對熊果酸、齊墩果酸、cyc1oeuca1eno1、cyc1oartano1、1upeo1的研究較多,結構見圖2。

    2 藥理作用研究

    2.1 止咳平喘 單萜吲哚類生物堿是燈臺葉止咳平喘的主要成分,同時黃酮類成分也兼有一定的平喘作用,這與抑制平滑肌細胞的外鈣內流、內鈣釋放及蛋白激酶C信號傳導系統(tǒng)有關,而鎮(zhèn)咳以外周作用為主[32]。楊坤芬和趙云麗[33]采用豚鼠枸櫞酸引咳法及組胺和氯化乙酰膽堿引喘法,探索燈臺葉堿對鎮(zhèn)咳、平喘的最低有效劑量,發(fā)現(xiàn)其平喘的最低有效劑量為7.5 mg/kg。楊泳等[34]以豚鼠為實驗對象,噴霧枸櫞酸制造咳嗽模型,記錄從噴霧結束到出現(xiàn)第一次咳嗽的時間和5 min內的咳嗽次數(shù),選擇5 min內咳嗽大于10次的豚鼠,灌胃給予燈臺葉生物堿,發(fā)現(xiàn)該成分有顯著的止咳作用(P<0.01)。然后,將0.2%組胺和1%乙酰膽堿等體積混合,給豚鼠噴霧30 s,記錄從噴霧開始至出現(xiàn)驚厥的時間,篩選潛伏期合格的動物,灌胃給予燈臺葉黃酮類成分,1 h后再進行致喘實驗,記錄“引喘潛伏期”,發(fā)現(xiàn)該成分有明顯平喘作用(P<0.01)。

    2.2 抗炎鎮(zhèn)痛 燈臺葉生物堿抗炎鎮(zhèn)痛作用與抑制炎性遞質COX、5-LOX有關,而與中樞無關,其乙醇提取物可顯著減少FCA法誘導關節(jié)炎大鼠關節(jié)組織脂質過氧化水平,明顯增加抗氧化酶谷胱甘肽、谷胱甘肽過氧化物酶和超氧

    化物歧化酶活力,該作用與其抗氧化活性密切相關[35]。燈臺葉堿不同劑量連續(xù)灌胃給藥3 d后,均能明顯抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹,抑制蛋清所致大鼠足跖腫脹,抑制大鼠皮下棉球肉芽腫生成,減少醋酸扭體反應,增強SOD的活性,減少一氧化氮、前列腺素E2、MDA水平[35-36]。Aru1mozhi等[37]以FCA法誘導關節(jié)炎大鼠模型,觀察燈臺葉乙醇提取物的抗關節(jié)炎作用,發(fā)現(xiàn)其活性良好,可降低關節(jié)炎指數(shù)、體質量和白細胞浸潤,明顯減少關節(jié)組織脂質過氧化水平,顯著增加谷胱甘肽過氧化物酶和超氧化物歧化酶活力。

    2.3 抗氧化作用 燈臺葉水提物和醇提物均能有效抑制氧化自由基,表現(xiàn)出明顯的抗氧化活性。Antony等[38]采用DPPH、ABTS和FIAP法,研究燈臺葉水、正丁醇、乙酸乙酯提取物的抗氧化活性,發(fā)現(xiàn)水和正丁醇提取物作用較明顯。戴云等[39]采用分光光度法,研究醇提物的體外抗氧化能力,以清除活性氧、抑制DNA損傷、抑制脂質過氧化能力為指標,與茶多酚相關能力進行對比,發(fā)現(xiàn)燈臺葉乙醇和正丁醇提取物的以上指標與茶多酚相當。莫菁蓮[40]在研究燈臺葉醇提物抗腫瘤機制時發(fā)現(xiàn),高劑量給藥組荷瘤小鼠中H22腫瘤細胞活性氧(IOS)的水平明顯低于陰性對照組。同時其血清中GI、GSH-PX、CAT、SOD活力均有所升高,機體抗氧化能力增強,MDA水平下降,表明高劑量給藥組小鼠體內脂質過氧化的程度較低。

    2.4 免疫調節(jié)作用 莫菁蓮[40]探究燈臺葉醇提物對H22肝癌移植小鼠免疫的影響時發(fā)現(xiàn),高劑量醇提物能增強小鼠的碳廓清能力,提高機體體液免疫能力。韓芳[41]研究燈臺葉醇提物對C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能的影響時發(fā)現(xiàn),高、中劑量組能顯著提高小鼠血清白細胞介素-6、白細胞介素-10、干擾素-γ的水平,而且高劑量組還能增強T淋巴細胞增殖能力,降低CD4+/CD8+比例,從免疫分子和免疫細胞水平提高荷瘤小鼠免疫功能。

    圖2 主要萜類結構式

    2.5 調節(jié)血糖的作用 Aru1mozhi[42]在研究燈臺葉乙醇提取物對鏈脲霉素誘導糖尿病大鼠的降糖作用過程中發(fā)現(xiàn),它能顯著降低血糖、糖化血紅蛋白和脂質過氧化水平,同時具有增加體質量、肝糖原、肌糖原和抗氧化的能力。Iagasa等[43]從燈臺葉二氯甲烷提取物中分離到cyc1oeuca1eno1、cyc1oartano1、1upeo1、1upeo1 acetate和betu1in等萜類成分,通過葡萄糖耐受實驗(OGTT)發(fā)現(xiàn),前三者的混合物具有降血糖活性。

    2.6 抗腫瘤作用 燈臺葉醇提物對人卵巢癌細胞C200、人乳腺癌細胞MNK-7及MCF-7、人肝癌細胞SNU-398及H22、Lewis肺癌細胞、人宮頸癌細胞、HepG2、KB、HL-60、人皮膚癌細胞等具有明顯的抑制作用,但機制尚不明確[40-41,44-49]。韓芳[49]采用MTT法和PI/Annexin-V染色法,研究燈臺葉醇提物對體外培養(yǎng)的腫瘤細胞增殖和凋亡的影響,發(fā)現(xiàn)其質量濃度在0.1~2.0 mg/mL時,能劑量依賴性地顯著抑制人卵巢癌、乳腺癌和肝癌細胞的增殖,具有一定細胞毒作用,可能是燈臺葉抗腫瘤的機制之一;在1~1

    000 μg/mL時,對雞胚尿囊膜血管生成有顯著抑制作用,也可能與其抗腫瘤作用相關。另外,其高劑量組能顯著提高C57BL/6荷瘤小鼠血清中干擾素-γ、白細胞介素-6、白細胞介素-10的水平,對腫瘤生長有明顯抑制作用,而且呈劑量依賴性增加,從免疫水平提高了荷瘤小鼠的抗腫瘤作用[41]。同時,燈臺葉醇提物還能清除自由基、降低移植瘤細胞的活性氧IOS,減輕機體氧化損傷,進而抑制腫瘤生長[40]。

    3 燈臺葉及其制劑的質量控制研究

    3.1 我國現(xiàn)行中藥質量控制概述 目前,中藥質量控制模式借鑒了西藥的相關方法,以鑒別、檢查和含有量測定為主[50],但中藥成分復雜,構效關系不明確,療效是多成分協(xié)同作用的結果,故僅以單個或多個成分的含有量來評價中藥質量具有一定局限性,不能滿足現(xiàn)代中藥質量控制的需要。近年來,指紋圖譜技術應運而生,其注重宏觀規(guī)律的特征分析,強調多個成分相對穩(wěn)定的比例關系及位置順序相互制約的完整色譜或綜合光譜特征[51],憑借“整體性”和“模糊性”的特點,在中藥質量控制中得到廣泛應用,主要有紫外光譜、紅外光譜、薄層色譜、液相色譜、氣相色譜、毛細管電泳及相關聯(lián)用技術。但由于中藥化學成分受產地、采收期、加工方法、氣候、土壤等因素影響較大,在指紋圖譜中選擇合理的指紋信息進行中藥質量控制和評價相對困難,部分藥物的化學成分難以用一般的光譜和色譜來體現(xiàn)[52]。因此,研究者又提出了“譜效學研究”、“等效成分群”、“生物效價研究”、“組分結構理論”、“中藥基因組學”、“中藥代謝組學”、“中藥蛋白質組學”等理論和方法,應用于中藥質量控制研究[53-54]。

    3.2 燈臺葉及其制劑質量控制 目前,燈臺葉及其制劑的質量標準滯后。該藥材曾收載于《云南省藥品標準》1974年版和《中國藥典》1977年版,在2013年納入《云南省中藥材標準》2005年版第七冊,其質量控制僅涉及以對照藥材為參照的薄層鑒別[55]。1977年至2013年之間,由于相關質量控制僅局限于顏色反應,導致市場上燈臺葉的質量參差不齊,安全性和有效性無法得到保障。燈臺葉片和燈臺葉顆粒分別收載于《國家中成藥標準匯編(中成藥地方標準上升國家標準部分),內科,肺系(二)分冊》和《中國藥典》2015年版(一部),在薄層鑒別的基礎上,增加了鴨腳樹葉堿含有量測定[56]。另外,有關燈臺葉及其制劑的質量控制研究鮮有報道[57-59]。梁聶彥、陳學松建立面條樹中鴨腳樹葉堿的HPLC含有量測定法[57]。饒高雄等[58]建立燈臺葉顆粒中鴨腳樹葉堿含有量分析的HPLC法。劉璇等[59]建立同時測定燈臺葉中鴨腳樹葉堿、齊墩果酸和熊果酸含有量的方法。藥材的質量直接決定了制劑的質量,進而影響到臨床用藥的安全性和有效性,如今燈臺葉及其制劑的質量標準在不斷提升,但仍處于較低的水平。

    4 臨床應用

    4.1 燈臺葉在呼吸系統(tǒng)疾病治療中的應用 燈臺葉是傣醫(yī)臨床常用藥物,被廣泛地用于治療攏答兒(頜下淋巴結腫大)、攏達兒(腮腺腫大)、乃多皇邁唉列習特來(肺熱咳嗽,痰多)、攏唉(嗽),習火(哮喘)、攏唉習火(咳嗽,喘息不定)等呼吸系統(tǒng)疾?。?0]。傣醫(yī)經(jīng)典著作《檔哈雅龍》中記載到,咳嗽者取擺埋丁別(燈臺樹葉)30 g煎湯,以紅糖為引內服;小兒咳喘病取賀麻年(苦卡拉)15 g,擺埋丁別(燈臺樹葉)15 g,毫懷咪王(鉤藤對鉤)15 g,穿心蓮10 g,搗細粉,化水調勻,藥粉搓成小丸藥內服;《傣醫(yī)方劑學》中治療攏達兒(腮腺腫大)時,取擺埋丁別(燈臺樹葉)鮮品適量,加少許青黛,搗爛外敷患處;攏唉習火(咳嗽,喘息不定)取賀羅呆哼(黃姜花根)20 g,擺埋丁別(燈臺樹葉)20 g,煎湯服;西雙版納州傣醫(yī)醫(yī)院制劑室生產的燈臺葉止咳合劑和棉榔青口服液均為燈臺葉制劑,十幾年來由于療效顯著,備受廣大患者認可[61-62]。

    4.2 燈臺葉在疑難雜癥治療中的應用 “風病理論”是傣醫(yī)基礎理論的重要組成部分,燈臺葉除被用于治療呼吸系統(tǒng)疾病外,還常應用于風病等疑難雜癥,如農桿農暖(乳腺炎、乳腺腫痛)、“攏匹勒”(月子病致頭昏目眩,周身酸痛麻木)、攏夢曼(蕁麻疹)、攏洞烘(斑疹瘙癢)、納勒冒麻、納勒冒沙么(婦女閉經(jīng)、痛經(jīng))、攏梅接路多火檔(風濕肢體關節(jié)疼痛)、攏沙力壩(狂躁型精神病)和“攏匹把母”(癲癇?。??!稒n哈雅龍》中寫到,治療“攏匹把母”(癲癇?。r取擺埋丁別(燈臺樹葉)搗細蒸熟,加分因(阿魏),地利糯過(犀鳥唾液)15 g,喃麻威(佛手葉)調勻外包;“農兵桿兵飛”(乳房包塊、生瘡)取擺埋丁別(燈臺樹葉)搗爛,加紅糖外包;“沙力壩”不言不語,取擺莊(酸桔葉)、擺埋丁別(燈臺樹葉)搗爛外包[61,63]。

    5 小結與展望

    燈臺葉為我國傳統(tǒng)傣藥材,在民間藥用歷史悠久,主產于廣東、廣西、海南、福建、云南、臺灣等地,收載于《中國藥典》(1977年版)和《云南省中藥材標準》(2005年版)第七冊,被廣泛地用于攏答兒(頜下淋巴結腫大)、乃多皇賣唉列習特來(肺熱咳嗽)、習火(哮喘)等呼吸系統(tǒng)疾病和農桿農暖(乳腺疾?。?、“攏匹勒”(月子病)、攏夢曼(蕁麻疹)、“攏匹把母”(癲癇?。┑纫呻y雜癥的治療與預防。燈臺葉富含生物堿、萜類和黃酮,其中以生物堿和萜類的研究較為深入,是其主要活性成分。其中,單萜吲哚類生物堿(鴨腳樹葉堿、雞骨常山堿、燈臺堿、土波臺文堿)是燈臺葉止咳平喘、抗炎的主要物質基礎;熊果酸、齊墩果酸、cyc1oeuca1eno1、cyc1oartano1、1upeo1與其抗腫瘤、調節(jié)血脂、血糖、免疫等藥理作用相關。

    雖然燈臺葉在化學和藥理研究方面取得了一定進展,但仍然存在一些問題。首先,燈臺葉執(zhí)行標準較低,質量控制研究較少,因此建立該藥材的質量控制及評價方法是亟待解決的問題,也是保證臨床療效的關鍵。其次,燈臺葉現(xiàn)代研究不能脫離傣醫(yī)藥基礎理論的指導,但目前大多數(shù)相關研究是從天然產物的角度出發(fā),對臨床的指導意義較?。?4-65]。例如,燈臺葉治療農桿農暖(乳腺疾病)、“攏匹勒”(月子?。?、攏洞烘(斑疹瘙癢)、攏沙力壩(狂躁型精神?。?、“攏匹把母”(癲癇?。┑燃膊〔]有得到現(xiàn)代研究的證明。同時,燈臺葉醇提物抗腫瘤、調節(jié)血脂血糖等作用不易在臨床上推廣,因其提取方法與傳統(tǒng)水煎煮相違背[40-42,66]?;谝陨蠁栴},本課題組今后將借助現(xiàn)代手段,以傣醫(yī)藥基礎理論為指導,探索燈臺葉的質量控制方法和治病防病的物質基礎與作用機制,為開發(fā)相關新藥提供實驗依據(jù),使民族醫(yī)藥為人類的健康事業(yè)貢獻一份力量。

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    [科研報道]

    *通信作者:趙應紅(1968—),女(佤族),主任藥師,研究方向為藥物制劑。Te1:15887797260,E-mai1:328664811@qq.com

    作者簡介:楊妮娜(1988—),女,碩士,研究方向為中藥質量控制與評價。Te1:15887615937,E-mai1:547018935@qq.com

    收稿日期:2015-10-08

    doi:10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.035

    中圖分類號:I284.1;I285.5

    文獻標志碼:A

    文章編號:1001-1528(2016)03-0645-06

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