高偉,史源,馬寧,韓俊峰,丁梅,劉蕾,鄭虹(天津市第一中心醫(yī)院器官移植中心,天津 300192)
健康巴馬小型豬30只,雌雄不限,12月齡以上,體重為30~35 kg,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為供體組和受體組。
2.1 麻醉及體位:供受體術(shù)前均禁食24小時(shí),禁水12小時(shí)。經(jīng)臀大肌注射戊巴比妥鈉30 mg/kg、地西泮0.4 mg/kg、阿托品0.03 mg/kg行基礎(chǔ)麻醉。麻醉后取仰臥位固定于恒溫手術(shù)臺(tái)上,豬尾連接血氧飽和度探頭監(jiān)測(cè)脈搏、血氧飽和度,胸前連接5導(dǎo)聯(lián)心電監(jiān)護(hù)。通過(guò)耳緣靜脈建立靜脈通路,并給予氯化琥珀膽堿注射液(1 mg/kg)麻醉誘導(dǎo)后行氣管插管連接麻醉機(jī)行間歇正壓(IPPV)通氣,七氟烷快速吸入(濃度3%~4%),3~5分鐘后以2%~3%濃度作麻醉維持,吸入麻醉開(kāi)始時(shí)瑞芬太尼0.08~0.1 μg / (kg·h) 通過(guò)靜脈通路連續(xù)泵入。吸入氧氣濃度為30%~50%,氧流量1 L/min,潮氣量10~12 ml/kg,呼吸頻率16~18次/分,I/E吸呼比1:2,間斷靜脈注射維庫(kù)溴銨維持肌肉松弛。
2.2 術(shù)中監(jiān)測(cè):受體豬麻醉完成后經(jīng)右側(cè)頸部切口游離頸內(nèi)靜脈、頸內(nèi)動(dòng)脈。頸內(nèi)靜脈插入三腔中心靜脈導(dǎo)管,以此完成術(shù)中中心靜脈壓(CVP)監(jiān)測(cè)以及作為術(shù)中和術(shù)后給藥補(bǔ)液的通路,頸內(nèi)動(dòng)脈插管監(jiān)測(cè)有創(chuàng)動(dòng)脈壓(IABP),采用心電監(jiān)護(hù)監(jiān)測(cè)心電圖及心率。
2.3 供肝獲取及修整:① 切口:取腹部正中縱行切口,長(zhǎng)度30~35 cm,切口上端達(dá)劍突水平,逐層切開(kāi)皮膚、皮下組織及腹白線,注意避免損傷尿道,放置腹腔自動(dòng)拉鉤,充分暴露手術(shù)野。② 供肝的游離:開(kāi)腹后以濕紗布?jí)|保護(hù)腸管,將肝左葉向右下方牽拉,以電刀切開(kāi)肝左葉與膈肌間的韌帶,然后將肝左葉牽向右上方,顯露肝胃韌帶,以電刀離斷肝胃韌帶。解剖肝十二指腸韌帶,于肝十二指腸韌帶下緣以電刀切開(kāi)其表面腹膜,游離、切斷膽總管,切斷結(jié)扎肝十二指腸韌帶內(nèi)的神經(jīng)結(jié)締組織,解剖出肝動(dòng)脈及門(mén)靜脈。向近心端游離肝動(dòng)脈至腹腔干,游離門(mén)靜脈至脾靜脈與腸系膜上靜脈匯合處。助手將肝臟推向左側(cè),顯露肝后下腔靜脈與后腹壁之間的韌帶,以電刀離斷此韌帶,向上達(dá)下腔靜脈進(jìn)入膈肌處,向下達(dá)腎靜脈水平。下腔靜脈周?chē)鼓げ灰鬃鲞^(guò)多游離,以免血管壁過(guò)薄增加血管重建的難度。在腹主動(dòng)脈分叉上方游離腹主動(dòng)脈,以備動(dòng)脈插管灌注。③ 供肝的切?。焊闻K游離完畢后行全身肝素化(100 U/kg),5分鐘后將灌注管路分別置入腹主動(dòng)脈和腸系膜上靜脈,4℃乳酸林格液(腹主動(dòng)脈及腸系膜上靜脈各1 500 ml)快速灌注供肝,與此同時(shí),剪開(kāi)膈肌夾閉膈上主動(dòng)脈,距膈肌孔上方2 cm離斷肝上下腔靜脈作為灌注液流出道。肝周置入冰屑協(xié)助肝臟快速降溫。待流出液清亮無(wú)血后換用4℃UW液(1 000 ml)繼續(xù)灌注,結(jié)扎脾靜脈,遠(yuǎn)離肝臟依次切斷腸系膜上靜脈、肝動(dòng)脈、肝下下腔靜脈及肝上下腔靜脈,完成肝臟切取,經(jīng)膽管插管沖洗膽管。④ 供肝的修整:供肝修整于4℃UW液中進(jìn)行。修剪肝上及肝下下腔靜脈,注意周?chē)M織不宜做過(guò)多游離,以免血管壁過(guò)薄影響吻合,保留足夠的血管長(zhǎng)度以備與受體側(cè)吻合。膽管周?chē)瑯硬灰俗鲞^(guò)多游離,修整完畢后將供肝置于4℃UW液中保存。
2.4 受體手術(shù):① 受體肝臟的游離:切口選擇和受體肝臟游離過(guò)程與供體手術(shù)基本一致,但注意解剖肝十二指腸韌帶時(shí)要貼近肝臟,以保證足夠的血管及膽管長(zhǎng)度。游離過(guò)程中將肝動(dòng)脈和膽管直接結(jié)扎切斷,向近心端游離肝動(dòng)脈以備吻合。游離下腔靜脈時(shí)注意勿損傷膈靜脈及后腹膜的小血管分支,以免產(chǎn)生難以控制的出血。② 受體肝臟的切除:無(wú)肝期前適當(dāng)加快補(bǔ)液速度,使CVP提升至8~10 cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)。以靜脈阻斷鉗依次阻斷門(mén)靜脈、肝下下腔靜脈及肝上下腔靜脈,緊貼肝臟離斷門(mén)靜脈、肝上及肝下下腔靜脈,移除受體肝臟,修剪各血管斷端以備吻合。③ 供肝植入:將供肝置入受體腹腔內(nèi),以5-0 Prolene線連續(xù)吻合肝上下腔靜脈,吻合期間經(jīng)門(mén)靜脈沖洗常溫的乳酸林格液,以排出供肝內(nèi)的UW液,并使肝臟適當(dāng)升溫,以避免冷刺激和高鉀引起的心跳驟停。肝上下腔靜脈吻合完畢后以6-0 Prolene線連續(xù)縫合門(mén)靜脈,打結(jié)時(shí)注意保留生長(zhǎng)因子,經(jīng)靜脈滴注甲潑尼龍(10 mg/kg),之后恢復(fù)肝臟血流,結(jié)束無(wú)肝期。無(wú)肝期期間應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)測(cè)學(xué)流動(dòng)力學(xué)變化,適當(dāng)補(bǔ)液以維持平均動(dòng)脈壓(MAP)不低于50 mmHg,一般情況下不需加用血管活性藥物。以5-0 Prolene線連續(xù)吻合肝下下腔靜脈后開(kāi)放下腔靜脈血流,以7-0 Prolene線端端吻合重建肝動(dòng)脈。膽總管采用套管法,以直徑約3 mm的硅膠管套管法端端吻合膽總管,將硅膠管兩端分別送入供受體膽道,分別用0號(hào)線將膽道與硅膠管一同結(jié)扎,然后將兩側(cè)結(jié)扎線結(jié)扎,使供、受體的膽總管靠在一起,再用5-0無(wú)損傷線間斷縫合兩側(cè)膽道的外膜及其外層組織。確切止血并放置腹腔引流管,逐層關(guān)腹。
2.5 術(shù)后管理:受體術(shù)后禁食48小時(shí),自由進(jìn)水。術(shù)后第1天開(kāi)始每天靜脈給予他克莫司0.04 mg/kg及甲潑尼龍琥珀酸鈉,每日遞減進(jìn)行抗排斥治療,靜脈給予頭孢呋辛鈉(0.75 g Q12 h)預(yù)防細(xì)菌感染治療3天,根據(jù)每天尿量調(diào)整補(bǔ)液量,一般于術(shù)后第1天和第2天每天補(bǔ)充液體1 000~1 500 ml,術(shù)后第3天開(kāi)始停止補(bǔ)液,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自由進(jìn)食進(jìn)水。