蜂蜜中的抗生素的研究意義及檢驗(yàn)方法分析

□ 姚煥潔　額敏縣質(zhì)量與計(jì)量檢測所

蜂蜜中的抗生素的研究意義及檢驗(yàn)方法分析

□ 姚煥潔額敏縣質(zhì)量與計(jì)量檢測所

在最近幾年中，蜂蜜產(chǎn)品存在許多抗生素殘留問題。這種抗生素殘留不僅不利于人體的健康，還阻礙了蜂產(chǎn)品的出口。所以，社會廣泛關(guān)注蜂蜜中的抗生素的問題。本文論述了蜂蜜中抗生素的研究意義、蜂蜜中的抗生素種類以及檢驗(yàn)蜂蜜中的抗生素的一些主要方法，最后預(yù)測了蜂蜜中抗生素檢測技術(shù)的未來發(fā)展趨勢。

蜂蜜中抗生素的研究意義

蜂蜜屬于天然營養(yǎng)佳品，受到了很多人的青睞。2002年以來，歐盟因?yàn)槲覈目股貧埩舫瑯?biāo)，禁止我國蜂蜜進(jìn)入歐盟市場，極大地影響了我國蜂產(chǎn)品的出口。目前，大多數(shù)國家都對抗生素殘留含量進(jìn)行了嚴(yán)格要求，同時，發(fā)達(dá)國家相對于發(fā)展中國家來說，有較為嚴(yán)格的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)來限制蜂蜜的進(jìn)口。所以，食品安全領(lǐng)域中最重要的研究課題就是要對蜂蜜中的抗生素進(jìn)行檢測。

蜂蜜中常見抗生素的種類

氯霉素

氯霉素對于大多數(shù)的病原菌都有較強(qiáng)的抑制作用，是首次用化學(xué)合成法生產(chǎn)的抗生素。因?yàn)槠漭^高的效用和較低的價(jià)格，可以對蜜蜂傳染性疾病進(jìn)行有效地治療與預(yù)防。但是，氯霉素也存在較大的毒副作用，潛在威脅人類的健康，因此，國家及地區(qū)都急切關(guān)注蜂蜜中氯霉素的殘留問題。在近幾年，歐盟、美國等發(fā)達(dá)國家或地區(qū)嚴(yán)格要求動物源性食品中不能出現(xiàn)氯霉素，并明確指出限量為不得檢出氯霉素，我國農(nóng)業(yè)部規(guī)定農(nóng)業(yè)也不能使用氯霉素。

四環(huán)素類

管譜抗菌是四環(huán)素類抗生素中的最大特性，由天然品與半合成品兩類組成。天然品包括金霉素、土霉素、四環(huán)素等其他因素，半合成品包括多西環(huán)素和米諾環(huán)素等因素。土霉素、金霉素、四環(huán)素是四環(huán)素類最常用的抗生素，主要對由蜜蜂幼蟲感染的腐臭病有很大用途，所以蜂產(chǎn)品中有可能會存在四環(huán)素類藥物。歐盟、日本對蜂蜜中四環(huán)素的要求為總量均小于100 ng/g。

磺胺類

磺胺類抗生素的應(yīng)用非常廣泛，經(jīng)肝臟代謝完成后，磺胺類形成乙?；x物然后隨著尿液排出。但代謝產(chǎn)物的溶解度會有所下降，容易在尿液中析出，極大可能會損壞血尿、結(jié)晶尿及腎臟。歐美等國家規(guī)定食品中磺胺的含量不得超過100 μg/kg。

硝基呋喃類

硝基呋喃類藥物屬于廣譜抗菌藥物，由人工合成。硝基呋喃類抗生素是由呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因等因素組成，但硝基呋喃類藥物會潛伏在人體中，對人體有一定的危害，現(xiàn)在對此類藥物已經(jīng)明令禁止。

其他類抗生素

上述抗生素除外，蜂蜜中還會有泰樂菌素、林可胺類、大環(huán)內(nèi)脂類和羥甲基糠醛等抗生素。

蜂蜜中的抗生素的檢測方法

微生物檢測法

微生物檢測方法的相應(yīng)原理：依據(jù)蜂蜜中的抗生素使微生物有一定的生理轉(zhuǎn)化、生物代謝功能，在采用定量或定性的方法對抗生素藥物的殘留進(jìn)行檢驗(yàn)。方法主要有氯化三苯基三氮唑法又稱為TTC法、紙片法又稱為PD法等。

氯化三苯基三氮唑法的特點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)成本較低，不足之處是需要的時間較長，并且實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)該具有較高的專業(yè)知識和能力，實(shí)驗(yàn)中會用到一定的菌液和水，對于它們的制備過程要嚴(yán)格操作，以免出現(xiàn)較大的誤差，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。紙片法檢測的極限是0.008～0.01 IU/ml，檢測結(jié)果大多情況下在4 h內(nèi)得到。紙片法的特點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)成本低，缺點(diǎn)是需要的檢測時間長，而結(jié)果也容易成為偽陽性來干擾正確結(jié)果，所以需要做進(jìn)一步的檢測才能確定是否為真正的陽性。

理化檢測法

利用抗生素中基因的特殊反應(yīng)、性質(zhì)來測定蜂蜜中抗生素的含量是理化檢測法的原理所在。蜂蜜的殘留抗生素檢測中應(yīng)用方法一般有高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜法（GC）、液相色譜-質(zhì)譜法（LC-MS）、氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）等分析方法，這些方法的特點(diǎn)是靈敏度高、準(zhǔn)確性強(qiáng)、不會出現(xiàn)偽陽性的結(jié)果，但是也存在許多缺點(diǎn)。--蜂蜜中含有大量的蛋白、脂肪等，如果對樣品提取不好將會直接影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，因此在實(shí)驗(yàn)之前必須將樣品充分混合，再按照實(shí)驗(yàn)的步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，經(jīng)過凈化得到實(shí)驗(yàn)所需的溶液。

有研究學(xué)者將四環(huán)素、土霉素、多西環(huán)素、金霉素和氯霉素5種常用的抗生素進(jìn)行了分離實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在合理的濃度范圍內(nèi)，峰面積和樣品濃度呈現(xiàn)相關(guān)關(guān)系。這些方法在抗生素殘留檢驗(yàn)中不太常用，但是由于各有各的特性，靈敏度又高，所以也不失為幾種不錯的檢測方法。這些方法的不足之處也是實(shí)驗(yàn)的成本比較高、對人員的要求嚴(yán)格，操作過程復(fù)雜，并且只能對單個樣本進(jìn)行檢驗(yàn)。

免疫分析法

利用抗體的特異結(jié)合特性來測定物質(zhì)中抗生素的方法稱為免疫分析法。免疫分析法在食品的檢測中應(yīng)用廣泛。當(dāng)前，對物質(zhì)中殘留抗生素的檢測技術(shù)中大體分為兩類，一種是免疫測定法，這是一種相對獨(dú)立的檢測方法。第二種是免疫分析技術(shù)與常規(guī)理化分析技術(shù)結(jié)合分析的方法。蜂蜜的殘留抗生素檢測方法中經(jīng)常采用酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）、膠體金免疫層析法、蛋白芯片法，酶聯(lián)免疫吸附分析法是國內(nèi)外使用最多的一種方法，膠體金免疫層析法常常被用于需要盡快得到結(jié)果的情況，蛋白芯片法是以后免疫檢測的發(fā)展方向。

結(jié)語

藥物殘留的危害已經(jīng)是當(dāng)今社會迫在眉睫需要解決的問題。因此在蜂蜜的飼養(yǎng)過程中，蜂農(nóng)也應(yīng)該盡量減少使用抗生素，國家也應(yīng)該出臺一系列的法律條文嚴(yán)格檢測蜂蜜中抗生素含量。