氣相色譜-質(zhì)譜法檢測食品中膽固醇含量的研究

□ 董曉尉　金華市食品藥品檢驗檢測研究院

氣相色譜-質(zhì)譜法檢測食品中膽固醇含量的研究

□ 董曉尉金華市食品藥品檢驗檢測研究院

膽固醇作為人體中維持個人機體正常生理功能所必須的重要物質(zhì)，而人體內(nèi)所需的膽固醇含量約為140 g，若人體每天攝入膽固醇的量過高則會形成高脂血癥，從而引起動脈粥樣硬化，進而誘發(fā)冠心病、高血壓等一系列心腦血管疾病，預防動脈粥樣硬化及心腦血管疾病的重要措施是適度控制外源性膽固醇攝入。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）具有色譜分離效率高，定性、定量準確及質(zhì)譜的靈敏度高、進樣量少、分析速度快等特點，適用于易揮發(fā)或易衍生化合物的檢測和分析。由于色譜的高分離能力和質(zhì)譜的鑒別特性，對復雜的混合物樣品進行分離、定性和定量分析一次完成，是一種完美的現(xiàn)代檢測分析方法。

食品中的膽固醇

膽固醇的介紹

膽固醇是一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物，其又稱為膽甾醇?；瘜W式為C27H46O，是存在動物組織中的一種白色蠟狀物質(zhì)。膽固醇不溶于水，易溶于氯仿、乙醚等溶劑，其溶解性與脂肪類似。膽固醇是動物不可缺少的重要物質(zhì)，不僅參與形成組織細胞的細胞膜，而且是合成維生素D，膽汁酸以及甾體激素的主要原料。膽固醇同時也是合成幾種重要荷爾蒙及膽酸的材料。

高膽固醇的危害

人體每天都需要攝入大量的各類食品，如果長期食用膽固醇含量極高的食品會使人體血液中膽固醇的含量升高。人體每天攝入膽固醇的正常值在0～5.2mmol/L，如果超過這個水平就表現(xiàn)為高膽固醇，而高膽固醇會誘發(fā)高血壓、心腦血管疾病、腎衰竭疾病、心臟病和牙周病等疾病的發(fā)生。

氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)

基本原理

氣相色譜是利用被測物質(zhì)各組分在不同兩相間的微小化學性質(zhì)差異對物質(zhì)進行分離的一種方法，這些物質(zhì)在兩相作相對運動時進行反復多次的分配，使不同組分由于原來只有微小的性質(zhì)差異產(chǎn)生很大的效果而得到分離。實際為通過樣品組分沸點之間的差異先后進柱，然后在氣體流動相和固定相之間分配系數(shù)的差異進一步分離。各組分分子會被柱子保留，隨后在不同的保留時間內(nèi)流出柱子，流出的分子被質(zhì)譜吸收并測定其離子化。

特點

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)可以將待測樣品進行高效分離后直接導入質(zhì)譜進行檢測，滿足了對樣品單一性的要求，還可以避免樣品的制備和轉(zhuǎn)移的復雜過程，極大地減少了對樣品的污染，同時最大限度地提高了對化合物的分離程度和定性、定量的分析效率。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)中的多種電離方式可使各種分子得到有效的電離，所得的離子經(jīng)質(zhì)量分析器分離后均可以被檢測。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有高效分離、高靈敏度、高準確度及操作簡便的特點。

氣相色譜-質(zhì)譜法對食品中膽固醇含量的檢測分析

彭春喜等建立一種簡單、快速而又重現(xiàn)性好的膽固醇測定方法，以監(jiān)測食品中膽固醇的確切含量。氣相色譜的條件：色譜柱選擇DB-5MS其柱長30 m，內(nèi)徑0.25 mm，膜厚0.25 μm的不分流模式，不分流時間1.00 min；進樣口溫度280℃，流量為2 mL/ min；初始溫度設(shè)定為220℃并保持1 min，隨后以30℃/ min的速度上升至280℃并保持8 min；載氣為He，載氣流量2 mL/min。質(zhì)譜條件為EI電離方式，70 eV電子能量，450 V電子倍增器電壓，設(shè)定離子源的溫度為250 ℃；質(zhì)譜掃描的范圍在50～650 u；傳輸線溫度為270℃。

實驗過程：樣品經(jīng)石油醚萃取后用50% KOH-乙醇進行皂化，然后用乙醚二次萃取，氮氣吹干后用正己烷溶解，注入GC-MS進行定量分析。研究結(jié)果顯示，該方法膽固醇的回收率在96.64%～100.13%，此方法的檢出限為0.065 9 μg/mL，定量限為0.22 μg/mL。

喻文娟 等建立了外標-氣相色譜-質(zhì)譜法測定食品中膽固醇的簡易方法。通過單因素實驗，優(yōu)化了實驗過程的前處理條件，確定乙醚為提取劑，設(shè)定皂化溫度為70 ℃，皂化時間為50 min。色譜柱的選擇條件：DB-5MS其柱長30 m，內(nèi)徑0.25 mm，膜厚0.25 μm；保持進樣的溫度為290 ℃；進樣量為1 μL；載氣為He；流量為1 mL/min；設(shè)定初始柱溫為150 ℃并保持5 min，并以20℃/min的速度升至300 ℃，保持12.5 min；接口溫度設(shè)定為260 ℃；離子源溫度設(shè)定為200 ℃；采用EI電離方式，使用70 eV的電子能量，450 V的關(guān)電倍增管電壓；質(zhì)譜范圍在33～500 u；溶劑延遲4 min。實驗結(jié)果表明，測定樣品的檢出限為1.05 μg/g、相對標準偏差RSD小于7.0%、不同水平的回收率大于76.0%。

總結(jié)

綜上所述，氣相色譜-質(zhì)譜法主要用于多種組分組成的混合物分離及檢測，在混合物分離分析方面具有十分重要的地位，對于食品中膽固醇含量的檢測是可行的。氣相色譜-質(zhì)譜法具有快速、操作簡便、環(huán)保，并具有高效分離、高靈敏度、高精密度等的優(yōu)點，滿足了現(xiàn)代分析方法的要求。氣相色譜-質(zhì)譜法在分析檢測和研究中起著越來越重要的作用，是許多有機化合物常規(guī)檢測分析工作中的一種必備的工具。氣相色譜-質(zhì)譜法在食品的檢測中也將發(fā)揮著重大的作用。