□ 程相玲 商丘市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心
轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)展研究
□ 程相玲商丘市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心
伴隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)基因檢測(cè)技術(shù)在農(nóng)業(yè)中的運(yùn)用范圍也在逐步加強(qiáng)。轉(zhuǎn)基因食品為我國(guó)的發(fā)展帶來了很大的經(jīng)濟(jì)收益,提高了農(nóng)業(yè)發(fā)展空間。近幾年來,我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)在不斷發(fā)展,逐漸成熟,然而很多人也對(duì)轉(zhuǎn)基因食品的安全問題表示質(zhì)疑。
轉(zhuǎn)基因食品工程是應(yīng)用基因工程技術(shù)把一種或多種外源性基因從生物體外挪用到一種設(shè)定的生物體中,使其能夠進(jìn)行蛋白質(zhì)的表達(dá),此過程就是“轉(zhuǎn)基因技術(shù)”。轉(zhuǎn)基因食品是在轉(zhuǎn)基因原料上生產(chǎn)的食品。
轉(zhuǎn)基因食品作為當(dāng)前的一種爭(zhēng)議食品,一直到現(xiàn)在,轉(zhuǎn)基因食品的安全問題也很難給出準(zhǔn)確的答案,更沒有科學(xué)的依據(jù)證實(shí)轉(zhuǎn)基因食品的安全性,所以,轉(zhuǎn)基因食品的安全問題也成為國(guó)際關(guān)注的焦點(diǎn)問題。在不斷完成市場(chǎng)化的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品迫切需要建立一套精確、高效的轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)方法,不斷改進(jìn)我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品監(jiān)管方面的科學(xué)規(guī)范。
轉(zhuǎn)基因食品外援蛋白質(zhì)印記檢測(cè)法的運(yùn)用發(fā)展
蛋白質(zhì)印記法是轉(zhuǎn)基因食品外源蛋白質(zhì)檢測(cè)方法的一種。蛋白質(zhì)印記法的檢測(cè)依據(jù)是指具備高分離能力的電泳以及具備特殊性的抗體和具備靈敏性的顯色酶反應(yīng)完全融合起來,然后完成包含復(fù)雜混合物的食品中特殊的蛋白質(zhì)的檢測(cè),完成食品雜質(zhì)的分離。這不但便于完成對(duì)靈敏度為2~6 ng的特殊蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè),而且便于準(zhǔn)確判定轉(zhuǎn)基因食品中目標(biāo)蛋白質(zhì)的檢測(cè),特別是不可溶蛋白質(zhì)的深入研究,例如針對(duì)轉(zhuǎn)基因大豆合成酶的檢測(cè)。
復(fù)合擴(kuò)增PCR轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)運(yùn)用
復(fù)合擴(kuò)增PCR檢測(cè)法是現(xiàn)在廣泛運(yùn)用的轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)方法,通常來講,普通PCR技術(shù)1次只能檢測(cè)1種目標(biāo)片段,PCR技術(shù)就是在PCR的反應(yīng)系統(tǒng)中加入2對(duì)或2對(duì)以上的引物,完成PCR反應(yīng)的多個(gè)靶序列。食品檢測(cè)者想要獲取詳細(xì)的轉(zhuǎn)基因信息,就要對(duì)待檢測(cè)的轉(zhuǎn)基因食品經(jīng)過利用PCR反應(yīng)試劑以及PCR反應(yīng)原理,不斷進(jìn)行PCR檢測(cè),和一般的PCR檢測(cè)方式比較,更加便于完成多個(gè)靶位點(diǎn)的統(tǒng)一檢測(cè),提高轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)速度。由于常規(guī)的PCR食品檢測(cè)技術(shù)在進(jìn)行檢測(cè)時(shí)過程比較復(fù)雜,并且投入成本較高,對(duì)于環(huán)境也存在潛在的污染問題,這些種種原因都迫使常規(guī)的PCR轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)的使用受到阻礙。然而復(fù)合PCR方式又能很好的防治這些不利因素的出現(xiàn),而且能夠獲取眾多基因片段信息,加強(qiáng)符合PCR檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用范圍,讓PCR檢測(cè)技術(shù)在操作步驟上更加簡(jiǎn)單,減小了轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品污染程度,使轉(zhuǎn)基因食品的檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確和高效。
外源DNA檢測(cè)技術(shù)
轉(zhuǎn)基因的外源基因包含目的基因、標(biāo)記基因以及調(diào)控基因3個(gè)主要成分。轉(zhuǎn)基因食品的調(diào)控基因包含啟動(dòng)子和終止子。轉(zhuǎn)基因食品的外源檢測(cè)技術(shù)的依據(jù)就是以被插入轉(zhuǎn)基因生物中的特異外源基因?yàn)橹黧w,依照轉(zhuǎn)基因食品DNA序列為目標(biāo)開展DNA檢測(cè)的方式。
轉(zhuǎn)基因食品核算檢測(cè)是重要的轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù),重點(diǎn)檢測(cè)啟動(dòng)子、終止子以及基因,便于為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因食品制造良好的條件。
基因芯片檢測(cè)技術(shù)
基因芯片是把眾多DNA集中排布在玻片或者硅片載體上所構(gòu)成的微炬陣。它能把抗性基因、啟動(dòng)子以及終止子的靶片段排列在玻片上刺成芯片,把從要檢查的樣品中抽取的DNA擴(kuò)增,進(jìn)行標(biāo)記后再和芯片交融,掃描儀對(duì)雜交后的信號(hào)進(jìn)行檢測(cè),再通過計(jì)算機(jī)軟件研究判別,從而獲得樣品里的基因序列特點(diǎn)或是基因表達(dá)特點(diǎn)等信息?;蛐酒膽?yīng)用能夠?qū)悠烽_展平行處理。然而成本昂貴,致使此方法很難開展。
LAMP檢測(cè)
LAMP就是環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),是在恒溫核酸擴(kuò)增方式。這種技術(shù)能在恒溫下實(shí)現(xiàn)反應(yīng),所以只需要水浴鍋就能實(shí)現(xiàn)。此外LAMP擴(kuò)增產(chǎn)物在染料過高的條件下能夠顯現(xiàn)顏色反應(yīng),用肉眼能夠進(jìn)行觀察,而且在反應(yīng)中能夠產(chǎn)生白色沉淀產(chǎn)品,能夠經(jīng)過濁度儀檢查其渾濁程度進(jìn)行判別,使檢測(cè)過程變得簡(jiǎn)單。然而此技術(shù)在現(xiàn)階段運(yùn)用中還不成熟,條件摸索還需要不斷進(jìn)行深入研究。
聯(lián)用檢測(cè)技術(shù)
每個(gè)檢測(cè)方法都有其自身的優(yōu)、缺點(diǎn),把有關(guān)聯(lián)的技術(shù)進(jìn)行聯(lián)用是一種很好的互補(bǔ)方法,現(xiàn)階段已出現(xiàn)將ELISA技術(shù)和PCR技術(shù)聯(lián)用,PCR和基因芯片技術(shù)融合,PCR技術(shù)和等離子共振技術(shù)融合等。
近幾年來,我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)技術(shù)在不斷發(fā)展、成熟,在不斷完成市場(chǎng)化的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品需要迫切建立一套精確、高效的轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)方法,不斷改進(jìn)我國(guó)轉(zhuǎn)基因食品監(jiān)管方面的科學(xué)規(guī)范。