• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    透骨消痛顆粒對(duì)兔骨關(guān)節(jié)炎模型作用的超微結(jié)構(gòu)研究

    2016-03-18 01:28:06馮芳芳林如輝陳文列黃云梅黃美雅吳廣文李西海吳追樂葉蕻芝劉獻(xiàn)祥
    中國骨與關(guān)節(jié)雜志 2016年2期
    關(guān)鍵詞:透骨下骨染色質(zhì)

    馮芳芳 林如輝 陳文列 黃云梅 黃美雅 吳廣文 李西海 吳追樂 葉蕻芝 劉獻(xiàn)祥

    ?

    透骨消痛顆粒對(duì)兔骨關(guān)節(jié)炎模型作用的超微結(jié)構(gòu)研究

    馮芳芳 林如輝 陳文列 黃云梅 黃美雅 吳廣文 李西海 吳追樂 葉蕻芝 劉獻(xiàn)祥

    【摘要】目的 觀察透骨消痛顆粒干預(yù)兔骨關(guān)節(jié)炎模型軟骨和軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu)變化情況,探討藥物對(duì)關(guān)節(jié)微觀結(jié)構(gòu)的作用機(jī)理。方法 18 只新西蘭大白兔分 3 組,模型組與藥物組按改良 Hulth 法建立膝骨關(guān)節(jié)炎模型。建模后 1 周藥物組以 1 g·ml-1透骨消痛顆粒溶液 20 ml·d-1灌胃,正常組和模型組給予等量生理鹽水,持續(xù) 12 周。脛骨標(biāo)本采用透射電鏡觀察軟骨和軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果 正常組軟骨細(xì)胞及核橢圓形,常染色質(zhì)為主,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器發(fā)達(dá);骨細(xì)胞近梭形,核扁橢圓形,核質(zhì)比大,異染色質(zhì)散在;成骨細(xì)胞扁長形,見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器,核異染色質(zhì)散在。模型組軟骨細(xì)胞及核不規(guī)則,固縮變性,異染色質(zhì)分布不均,細(xì)胞器模糊;骨細(xì)胞核固縮或不規(guī)則,異染色質(zhì)聚集;成骨細(xì)胞呈橢圓形,核不規(guī)則,異染色質(zhì)斑塊狀多位于核膜下,細(xì)胞器較少、模糊。藥物組軟骨細(xì)胞多正常,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較發(fā)達(dá);骨細(xì)胞核近橢圓形,異染色質(zhì)散在或部分聚集;成骨細(xì)胞呈扁長形,核近橢圓形,異染色質(zhì)散在,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可見擴(kuò)張。結(jié)論 透骨消痛顆粒能夠改善骨關(guān)節(jié)炎軟骨與軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu),主要作用表現(xiàn)于細(xì)胞核染色質(zhì)、參與合成細(xì)胞外基質(zhì)成分的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器的變化。

    【關(guān)鍵詞】骨關(guān)節(jié)炎;顯微鏡檢查,電子,透射;藥物療法;軟骨細(xì)胞;骨細(xì)胞;透骨消痛顆粒

    骨關(guān)節(jié)炎 ( osteoarthritis,OA) 是復(fù)雜的退行性關(guān)節(jié)疾病,關(guān)節(jié)軟骨完整性破壞、晚期軟骨下骨硬化、骨贅增生等是其主要特征[1]。骨關(guān)節(jié)炎屬于中醫(yī)“痹癥”范疇,基于“腎主骨、肝主筋”的理論,已形成治痿、祛痹與痹痿同治的治療理念[2]。透骨消痛顆粒以中醫(yī)筋骨理論為指導(dǎo),補(bǔ)腎柔肝作為根本法則,善于祛邪活血、健脾止痛,是有效防治骨關(guān)節(jié)炎的臨床驗(yàn)方。前期藥理研究顯示該組方有消炎止痛、抑制炎性介質(zhì)、清除氧自由基和改善微循環(huán)等功效[3],可減少骨關(guān)節(jié)炎軟骨蛋白多糖的丟失,明顯改善組織結(jié)構(gòu),而達(dá)到減輕軟骨纖維化,延緩關(guān)節(jié)軟骨退變、軟骨下骨硬化的作用[4-5]。本研究旨在通過對(duì)軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞等超微結(jié)構(gòu)觀察,進(jìn)一步闡述透骨消痛顆粒對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨和軟骨下骨微觀結(jié)構(gòu)的影響。

    材料與方法

    一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    普通級(jí) 6 個(gè)月齡新西蘭大白兔 18 只,雌雄各半,體重 ( 2.1±0.1) kg,上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供,許可證號(hào) SCXK ( 滬) 2012-0002。福建中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施,普通級(jí) ( 合格證號(hào):醫(yī)動(dòng)學(xué)第 23-016 號(hào))。實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物的處置符合中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部頒發(fā)的“關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見”。

    二、動(dòng)物分組與造模

    適應(yīng)性喂養(yǎng)后 1 周編號(hào),18 只新西蘭大白兔采用抽簽法隨機(jī)分為 3 組:正常組對(duì)照、模型組和藥物組,每組 6 只。除正常組 6 只外,其余 12 只根據(jù)改良 Hulth 法[6]建立骨關(guān)節(jié)炎模型,造模方法:兔麻醉后,從左膝內(nèi)側(cè)入路,切斷內(nèi)側(cè)副韌帶,摘除內(nèi)側(cè)半月板,切斷前交叉韌帶。術(shù)后連續(xù) 3 天大腿肌肉注射 20 萬 U 青霉素,術(shù)后 1 周驅(qū)趕兔活動(dòng)0.5 h·d-1,連續(xù) 12 周。

    三、動(dòng)物給藥

    造模后 1 周,藥物組以 1 g·ml-1透骨消痛顆粒水溶液 20 ml·d-1灌胃,正常組和模型組以等量生理鹽水灌胃,持續(xù) 12 周。透骨消痛顆粒 ( 含巴戟天、杭白芍、川芎等多味中藥,生產(chǎn)批號(hào) 20100302)由福州屏山藥廠制作。

    四、光鏡制樣觀察

    兔麻醉,取膝關(guān)節(jié)脛骨平臺(tái)內(nèi)側(cè)軟骨及軟骨下骨,置于 4% 多聚甲醛固定,10% EDTA 脫鈣;梯度乙醇脫水,二甲苯透明,石蠟包埋;切片 5 μm,HE染色。光鏡下觀察軟骨和軟骨下骨形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。

    五、透射電鏡制樣觀察

    切取脛骨平臺(tái)軟骨及軟骨下骨組織 1 mm× 1 mm×3 mm ( 長軸與軟骨面平行),3% 戊二醛-1.5% 多聚甲醛前固定,5.5% EDTA -1.5% 戊二醛脫鈣-固定,1% 四氧化后固定 2 h,梯度乙醇、丙酮脫水,環(huán)氧樹脂 618 包埋劑包埋;半薄切片1 μm,美蘭-天青染色,光鏡輔助觀察并定位;超薄切片 90 nm,鈾-鉛染色;日立 H-7650 型透射電鏡觀察軟骨與軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu)變化,SIS 公司2K×2K CCD 相機(jī)拍攝。

    結(jié) 果

    一、顯微結(jié)構(gòu)觀察

    1. 正常對(duì)照組:軟骨表面平滑,細(xì)胞排列規(guī)律,四層結(jié)構(gòu)較明顯 ( 圖 1)。軟骨下骨骨小梁較均勻。

    2. 模型組:軟骨面破損,局部增厚,裂隙可達(dá)中層至深層;軟骨細(xì)胞排列紊亂,四層結(jié)構(gòu)不清;軟骨基質(zhì)染色失染、不均 ( 圖 2)。骨小梁不均勻。

    3. 藥物組:軟骨表面較為平整,損傷僅限淺層,深層細(xì)胞排列較規(guī)律,少凋亡;軟骨基質(zhì)染色較均勻 ( 圖 3)。軟骨下骨較正常。

    二、超微結(jié)構(gòu)觀察

    1. 正常對(duì)照組:軟骨細(xì)胞多呈圓形或橢圓形,細(xì)胞表面可見較多細(xì)而短的微絨毛樣突起;核圓形或橢圓形,居中,核內(nèi)常染色質(zhì)為主,異染色質(zhì)分布均勻;胞質(zhì)內(nèi)可見豐富粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體,糖原顆粒散在、多見,有的細(xì)胞微絲成束;軟骨組織基質(zhì)中有豐富纖細(xì)的膠原原纖維,排列較規(guī)律 ( 圖 4)。軟骨與軟骨下骨交界處,有低電子密度與高電子密度相鄰的骨基質(zhì)區(qū)域,其纖維排列方向不一致。低電子密度膠原纖維束中的膠原原纖維粗細(xì)相彷,與纖維束呈同一走向;高電子密度膠原纖維束中的膠原原纖維走向不規(guī)則,呈斜形、橫形交錯(cuò)。骨細(xì)胞呈近梭形或扁橢圓形,較多充滿骨陷窩,細(xì)胞表面突起明顯,核質(zhì)比較大,胞質(zhì)相對(duì)較少,細(xì)胞器少見;核扁橢圓形,異染色質(zhì)豐富、散在;骨組織基質(zhì)中橫紋明顯且較粗的膠原原纖維,分布均勻 ( 圖 5)。成骨細(xì)胞扁長形,胞質(zhì)內(nèi)可見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器;細(xì)胞核常染色質(zhì)為主,異染色質(zhì)散在 ( 圖 6)。

    2. 模型組:軟骨細(xì)胞形狀多不規(guī)則,或呈多角形,細(xì)胞表面突起較少,多見變性、壞死細(xì)胞;核不規(guī)則、偏位,多固縮呈現(xiàn)電子密度增高,或異染色質(zhì)邊聚,呈凋亡細(xì)胞核;胞質(zhì)基質(zhì)深染,部分細(xì)胞器結(jié)構(gòu)破壞或不清晰,糖原聚集,脂滴可見;軟骨基質(zhì)中膠原原纖維稀疏,排列較不規(guī)律 ( 圖 7)。骨細(xì)胞大小不一,呈不規(guī)則形,突起少;細(xì)胞核固縮或不規(guī)則,多偏位,異染色質(zhì)聚集呈斑塊狀或于核膜下;骨基質(zhì)中膠原原纖維橫紋較模糊,分布排列不均勻 ( 圖 8)。成骨細(xì)胞呈橢圓形,突起少,核不規(guī)則,異染色質(zhì)斑塊狀多于核膜下;胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器較少,結(jié)構(gòu)模糊 ( 圖 9)。

    3. 藥物組:軟骨細(xì)胞圓形或橢圓形,細(xì)胞表面突起較多;核圓形或橢圓形,常染色質(zhì)為主,分布均勻;胞質(zhì)內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)、豐富,明顯擴(kuò)張成池狀,內(nèi)見中等電子密度合成物,膜表面結(jié)合型核糖體明顯,糖原顆粒散在、多見,微絲豐富;同源軟骨細(xì)胞多見,未見明顯細(xì)胞變性 ( 圖 10)。骨細(xì)胞及其核呈橢圓形或梭形,核居中,核內(nèi)異染色質(zhì)散在或部分聚集;骨組織基質(zhì)中有豐富的橫紋,膠原原纖維較粗且分布較均勻 ( 圖 11)。成骨細(xì)胞呈扁長形,突起較少,核近橢圓形,常染色質(zhì)多見,異染色質(zhì)散在;粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可見,以核周為多,有些擴(kuò)張成池狀 ( 圖 12)。

    圖1 正常組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40)  Fig.1 Normal cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖2 模型組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40)  Fig.2 Model group of cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖3 藥物組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40)  Fig.3 Drug group of cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖4 正常組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.4 Normal cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖5 正常組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM ×12000)  Fig.5 Normal bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖6 正常組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.6 Normal osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)圖7 模型組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.7 Model group of cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖8 模型組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 12000)  Fig.8 Model group of bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖9 模型組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.9 Model group of osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)

    討 論

    本研究是光鏡與電鏡技術(shù)相結(jié)合,在顯微結(jié)構(gòu)觀察的基礎(chǔ)上,再進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察,其結(jié)果相吻合,可從細(xì)胞及其胞外基質(zhì)的超微結(jié)構(gòu),闡釋組織顯微結(jié)構(gòu)的變化。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果從軟骨和軟骨下骨的微觀變化,進(jìn)一步提供了透骨消痛方對(duì)骨關(guān)節(jié)炎療效的細(xì)胞形態(tài)學(xué)證據(jù),闡釋了藥物作用的細(xì)胞與亞細(xì)胞形態(tài)學(xué)機(jī)理。

    一、藥物對(duì)骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨超微結(jié)構(gòu)的影響

    軟骨退變是骨關(guān)節(jié)炎的最基本病變,軟骨細(xì)胞是軟骨中唯一的細(xì)胞,疾病狀態(tài)下,軟骨細(xì)胞在炎癥狀態(tài)下出現(xiàn)功能性紊亂,最終導(dǎo)致軟骨結(jié)構(gòu)病理改變[7]。病變?cè)缙谲浌羌?xì)胞可對(duì)外界刺激產(chǎn)生應(yīng)激現(xiàn)象,本實(shí)驗(yàn)中模型組軟骨細(xì)胞出現(xiàn)局部增殖現(xiàn)象,而使局部軟骨層增厚,但軟骨細(xì)胞排列紊亂。透射電鏡見軟骨細(xì)胞及核出現(xiàn)固縮、變性,甚至壞死,直接影響軟骨細(xì)胞的代謝和遺傳;軟骨表面微絨毛樣突起減少,細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換能力下降,營養(yǎng)代謝發(fā)生障礙;合成膠原蛋白、蛋白多糖等基質(zhì)成分的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器變化,將相應(yīng)影響相關(guān)功能。藥物組軟骨形態(tài)完整,未見明顯裂隙、破損,軟骨細(xì)胞與模型組相比,分布較為規(guī)律,透射電鏡下軟骨細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)多正常,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá),明顯擴(kuò)張成池狀,表現(xiàn)出活躍的細(xì)胞功能,合成蛋白質(zhì)能力增強(qiáng)。同源軟骨細(xì)胞明顯增多,增殖能力增強(qiáng),可促進(jìn)軟骨的進(jìn)一步修復(fù)。

    II 型膠原是軟骨基質(zhì)中最主要膠原表型,參與關(guān)節(jié)軟骨組織生理重建和病理破壞過程[8]。骨關(guān)節(jié)炎過程中,II 型膠原降解,導(dǎo)致軟骨基質(zhì)成分改變,進(jìn)一步介導(dǎo)軟骨細(xì)胞病變。軟骨基質(zhì)膠原原纖維排列方向紊亂的區(qū)域軟骨細(xì)胞退變程度重,細(xì)胞凋亡多見,說明軟骨細(xì)胞衰亡會(huì)影響基質(zhì)成分的正常維持;反之,軟骨細(xì)胞依賴軟骨基質(zhì)成分的完整,病變軟骨細(xì)胞由于膠原纖維網(wǎng)的破壞也會(huì)促使退變、死亡,軟骨的自我修復(fù)能力也將減弱,軟骨破壞[9]。以往的骨關(guān)節(jié)炎研究中發(fā)現(xiàn)部分基質(zhì)金屬蛋白酶 MMPs 使關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)特別是使 II 型膠原變性裂解,關(guān)節(jié)軟骨變腫脹,抗外力作用下降,最終導(dǎo)致軟骨破壞、軟骨細(xì)胞退行性改變,甚至死亡,用藥后 MMPs 含量明顯下降[10],保護(hù) II 型膠原,維持軟骨基質(zhì)穩(wěn)定。藥物組膠原原纖維與模型組相比,分布較為規(guī)律,提示 II 型膠原降解減輕,軟骨細(xì)胞微環(huán)境改善。本次實(shí)驗(yàn)通過對(duì)軟骨的超微結(jié)構(gòu)觀察,說明透骨消痛顆??蓽p輕軟骨基質(zhì)的降解,緩解骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變。

    二、藥物對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)的影響

    軟骨代謝紊亂、局部降解被認(rèn)為是骨關(guān)節(jié)炎的始發(fā)因素,而軟骨下骨改變?cè)诠顷P(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮著重要作用[11]。軟骨下骨包括軟骨下骨板、骨小梁、血管和小梁間腔隙,對(duì)關(guān)節(jié)軟骨起機(jī)械性和代謝性的保護(hù)作用[12],在骨關(guān)節(jié)炎早期就可見骨小梁稀疏等骨質(zhì)疏松的結(jié)構(gòu)變化。骨小梁結(jié)構(gòu)對(duì)骨強(qiáng)度至關(guān)重要[13],是骨脆性的決定因素,還起支持造血組織的作用,與骨的生成有關(guān);骨小梁內(nèi)部有骨細(xì)胞及其膠原和鈣鹽沉積;骨小梁表面被覆成骨細(xì)胞,成骨細(xì)胞主要負(fù)責(zé)骨基質(zhì)合成、分泌和礦化,控制骨重建的激活或終止[14],維持機(jī)體正常骨量。

    本研究模型組成骨細(xì)胞核發(fā)生明顯變化,異染色質(zhì)增多,細(xì)胞器數(shù)量減少,功能退化,細(xì)胞的新陳代謝和增殖分化能力明顯降低,通過物質(zhì)運(yùn)輸通道促進(jìn)軟骨細(xì)胞 MMPs 合成,加快軟骨細(xì)胞退變;而藥物組成骨細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張成池,蛋白質(zhì)合成能力增加,推測透骨消痛顆??赏ㄟ^改善成骨細(xì)胞功能形態(tài),影響骨重塑平衡,而達(dá)到對(duì)軟骨下骨的保護(hù),與前期研究結(jié)果一致[15]。

    圖10 藥物組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.10 Drug group of cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖11 藥物組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 12000)  Fig.11 Drug group of bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖12 藥物組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.12 Drug group of osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)

    骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞,細(xì)胞的合成活動(dòng)停止,胞質(zhì)減少。骨細(xì)胞的骨陷窩-小管系統(tǒng)提供微環(huán)境系統(tǒng),骨間隙液可以營養(yǎng)骨組織。本實(shí)驗(yàn)?zāi)P徒M骨細(xì)胞變形,特別是核固縮、偏位,細(xì)胞新陳代謝障礙,由骨細(xì)胞分泌的膠原蛋白等含量減少,影響整個(gè)微環(huán)境;基質(zhì)中膠原原纖維結(jié)構(gòu)紊亂,橫紋模糊,骨骼韌性降低,脆性增加,骨質(zhì)變得疏松,更易發(fā)生微骨折。藥物組骨細(xì)胞功能形態(tài)改善,繼續(xù)指揮、協(xié)調(diào)骨重建,改善骨質(zhì);膠原原纖維變粗,排列規(guī)律,骨組織得到修復(fù)。

    本實(shí)驗(yàn)藥物組軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)比模型組明顯改善,提示透骨消痛顆粒能使病理狀態(tài)下機(jī)體成骨細(xì)胞重新達(dá)到平衡,骨細(xì)胞微環(huán)境改善,從而進(jìn)一步延緩骨關(guān)節(jié)炎向晚期進(jìn)展。

    參 考 文 獻(xiàn)

    [1] Poulet B, de Souza R, Kent AV, et al. Intermittent applied mechanical loading induces subchondral bone thickening that may be intensifiedlocally by contiguous articular cartilage lesions. Osteoarthritis Cartilage, 2015, 23(6):940-948.

    [2] 李西海, 劉獻(xiàn)祥. 骨關(guān)節(jié)炎的核心病機(jī)--本痿標(biāo)痹. 中醫(yī)雜志, 2014, 55(14):1248-1249,1252.

    [3] 李西海, 劉獻(xiàn)祥. 透骨消痛顆粒的現(xiàn)代藥理學(xué)基礎(chǔ). 福建中醫(yī)藥, 2006, 37(1):50-52.

    [4] 吳廣文, 葉錦霞, 鄭春松, 等. 骨性關(guān)節(jié)炎模型大鼠關(guān)節(jié)軟骨變化及透骨消痛膠囊干預(yù)的作用. 中國組織工程研究, 2014, 18(49):7924-7929.

    [5] 黃云梅, 陳文列, 劉獻(xiàn)祥, 等. 透骨消痛顆粒對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎影響的組織化學(xué)研究. 中國中醫(yī)骨傷科雜志, 2011, 19(1):1-3.

    [6] 劉獻(xiàn)祥, 李西海, 周江濤, 等. 改良Hulth造模法復(fù)制膝骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2005, 25(12): 1104-1108.

    [7] Hoff P, Buttgereit F, Burmester GR, et al. Osteoarthritis synovial fluid activates pro-inflammatory cytokines in primary human chondrocytes. Int Orthop, 2013, 37(1):145-151.

    [8] Hu W, Zhang W, Li F, et al. Bortezomib prevents the expression of MMP-13 and the degradation of collagen type 2 in human chondrocytes. Biochem Biophys Res Commun, 2014, 452(3): 526-530.

    [9] 吳志宏, 邱貴興. 骨關(guān)節(jié)炎髕骨軟骨中II型膠原的表達(dá)和超微結(jié)構(gòu)研究. 中華骨科雜志, 2005, 25(5):311-315.

    [10] 劉獻(xiàn)祥, 李西海, 周江濤, 等. 透骨消痛顆粒防治膝骨性關(guān)節(jié)炎的機(jī)理研究. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2007, 27(1):50-54.

    [11] Yang T, Zhang J, Cao Y, et al. Wnt5a/Ror2 mediates temporomandibular joint subchondral bone remodeling. J Dent Res, 2015, 94(6):803-812.

    [12] Madry H, van Dijk CN, Mueller-Gerbl M. The basic science of the subchondral bone. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc, 2010, 18(4):419-433.

    [13] Hernandez CJ, Keaveny TM. A biomechanical perspective on bone quality. Bone, 2006, 39(6):1173-1181.

    [14] 陳賽楠, 廖乃順, 陳文列, 等. OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)在調(diào)控骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨骨重建中的作用. 骨科, 2013, 4(4): 214-217.

    [15] 黃云梅, 陳文列, 林如輝, 等. 透骨消痛膠囊促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和分化. 中國組織工程研究, 2013, 17(33):5923-5928.

    ( 本文編輯:李貴存)

    . 作者須知 Instruction for authors .

    A ultrastructural study of Touguxiaotong Granule on osteoarthritis rabbit model FENG Fang-fang, LIN Ru-hui, CHEN Wen-lie, HUANG Yun-mei, HUANG Mei-ya, WU Guang-wen, LI Xi-hai, WU Zhui-le, YE Hong-zhi, LIU Xianxiang. Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou, Fujian, 350122, PRC

    【Abstract】Objective To explore the microcosmic mechanism of Touguxiaotong Granule ( TXG) on ultrastructure in cartilage by observing cartilage and subchondral bone of TXG-treated rabbit osteoarthritis model with transmission electron microscope ( TEM). Methods Eighteen New Zealand rabbits of 6-month old were randomly divided into 3 groups: the control group, the model group and the drug group. The knee osteoarthritis model was replicated using modified Hulth method. Rabbits in the drug group were applied 1 g · ml-1TXG solution by intragastric administration. While rabbits in the control group and model group were given the same amount of 0.9% physiological saline by intragastric administration. All rabbits had been given the dosage of 20 ml · d-1for 12 weeks. Obtained samples of tibia were observed by TEM. Results In the control group, the chondrocytes were characterized as subelliptic shape, abundant rough endoplasmic reticulum and mainly euchromatin in oval nucleus. Osteocytes appeared as fusiform shape and flat oval nucleus, with big karyoplasmicratio and scattered heterochromatin. Osteoblasts displayed prolate shape, rough endoplasmic reticulum and scattered heterochromatin. Compared with the control group, chondrocytes and nucleus in the model groups of osteoarthritis showed irregular shape, pyknosis and degeneration. The cellular organelles were fuzzy or unclear in the chondrocytes while the nucleus was accompanied by unevenly distributed heterochromatin. Irregular karyopyknosis and aggregated heterochromatin appeared in osteocytes. Osteoblasts appeared to be oval. The organelles were reduced and fuzzy and the patchy heterochromatin was under the nuclear membrane in irregular nucleus. Compared with the model group, chondrocytes in drug group were characterized as regular morphology with abundant rough endoplasmic reticulum. The nucleus of osteocytes showedbook=130,ebook=55subelliptic shape, scattered or partial aggregated heterochromatin. Osteoblasts showed elongated shape, expanded rough endoplasmic reticulum, and scattered heterochromatin in oval-like nucleus. Conclusions Touguxiaotong Granule can significantly improve the ultrastructure of the cartilage and subchondral bone in osteoarthritis. It plays an important role in the change of the nuclear chromatin and the rough endoplasmic reticulum which is involved in the synthesis of extracellular matrix components.

    【Key words】Osteoarthritis; Microscopy, electron, transmission; Drug therapy; Chondrocytes; Osteocytes; Touguxiaotong granule

    ( 收稿日期:2015-05-13)

    Corresponding author:CHEN Wen-lie, Email: chen.wl@163.com

    通信作者:陳文列,Email: chen.wl@163.com

    基金項(xiàng)目:福建省自然科學(xué)基金 ( 2014J01356),陳可冀中西醫(yī)結(jié)合發(fā)展基金 ( CKJ2011004)
    作者單位:350122 福州,福建中醫(yī)藥大學(xué) ( 馮芳芳、陳文列);350122 福州,福建中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合研究院 ( 林如輝、陳文列、黃美雅、吳廣文、葉蕻芝、劉獻(xiàn)祥);350122 福州,國家中醫(yī)藥三級(jí)科研實(shí)驗(yàn)室-中藥藥理 ( 細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能) 實(shí)驗(yàn)室 ( 陳文列、黃云梅、吳追樂);350108 福州,福建省中西醫(yī)結(jié)合老年性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室( 李西海、劉獻(xiàn)祥)

    DOI:10.3969/j.issn.2095-252X.2016.02.012

    中圖分類號(hào):R684.3

    猜你喜歡
    透骨下骨染色質(zhì)
    X線與CT引導(dǎo)下骨病變穿刺活檢的臨床應(yīng)用
    染色質(zhì)開放性與動(dòng)物胚胎發(fā)育關(guān)系的研究進(jìn)展
    哺乳動(dòng)物合子基因組激活過程中的染色質(zhì)重塑
    軟骨下骨重塑與骨關(guān)節(jié)炎綜述
    透骨的事物
    山花(2020年7期)2020-07-18 16:11:39
    悼李公正中先生
    詩潮(2020年6期)2020-06-24 12:55:46
    追風(fēng)透骨制劑:說明書增加了“警示語”
    染色質(zhì)可接近性在前列腺癌研究中的作用
    “哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞生發(fā)泡染色質(zhì)構(gòu)型的研究進(jìn)展”一文附圖
    骨關(guān)節(jié)炎與軟骨下骨研究進(jìn)展
    成年动漫av网址| 久久综合国产亚洲精品| 久久这里有精品视频免费| 9191精品国产免费久久| 国产精品一国产av| 久久毛片免费看一区二区三区| 日本欧美国产在线视频| 成人手机av| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 一边摸一边做爽爽视频免费| 91久久精品国产一区二区三区| 欧美日韩综合久久久久久| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 不卡av一区二区三区| 午夜激情久久久久久久| 永久网站在线| 亚洲第一青青草原| 久久久久久久大尺度免费视频| 日韩免费高清中文字幕av| 欧美另类一区| 中国国产av一级| 制服诱惑二区| 黑丝袜美女国产一区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美日韩av久久| 亚洲精品av麻豆狂野| 视频区图区小说| 制服丝袜香蕉在线| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产男女内射视频| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产熟女欧美一区二区| 两个人免费观看高清视频| 国产乱来视频区| 久久国产亚洲av麻豆专区| 精品久久蜜臀av无| 国产精品一国产av| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 日韩电影二区| 国产片特级美女逼逼视频| av在线播放精品| 在线观看三级黄色| 成人手机av| 精品国产露脸久久av麻豆| 丝袜喷水一区| 亚洲av综合色区一区| 久久青草综合色| 亚洲av国产av综合av卡| 欧美人与善性xxx| 国产成人欧美| 我要看黄色一级片免费的| 成人国语在线视频| 日韩人妻精品一区2区三区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 人妻系列 视频| 久久99热这里只频精品6学生| 久久久国产一区二区| 国产精品偷伦视频观看了| 黄色配什么色好看| 男女无遮挡免费网站观看| 久久久久久久国产电影| videossex国产| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产成人精品婷婷| 亚洲av国产av综合av卡| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 男人添女人高潮全过程视频| 水蜜桃什么品种好| 久久热在线av| 国产成人精品婷婷| 国产一区二区在线观看av| 人成视频在线观看免费观看| 女性生殖器流出的白浆| 午夜福利乱码中文字幕| 少妇熟女欧美另类| 99久国产av精品国产电影| 我的亚洲天堂| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产精品二区激情视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲伊人色综图| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产黄色视频一区二区在线观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲天堂av无毛| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲欧美精品自产自拍| 精品酒店卫生间| 人妻 亚洲 视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 少妇精品久久久久久久| 18禁动态无遮挡网站| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日韩三级伦理在线观看| 只有这里有精品99| 看十八女毛片水多多多| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲国产看品久久| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲国产色片| 91精品国产国语对白视频| 国产精品女同一区二区软件| 高清不卡的av网站| 99热网站在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 免费观看av网站的网址| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 免费看av在线观看网站| 性色avwww在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 女性生殖器流出的白浆| 宅男免费午夜| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 天堂俺去俺来也www色官网| 一本大道久久a久久精品| 午夜91福利影院| 在线观看免费高清a一片| xxxhd国产人妻xxx| 2018国产大陆天天弄谢| 美女主播在线视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| av网站免费在线观看视频| 亚洲人成77777在线视频| 蜜桃在线观看..| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 欧美亚洲日本最大视频资源| 水蜜桃什么品种好| 在线 av 中文字幕| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲视频免费观看视频| 久久狼人影院| 极品少妇高潮喷水抽搐| 日韩精品免费视频一区二区三区| 十八禁高潮呻吟视频| 一级爰片在线观看| 韩国精品一区二区三区| 婷婷成人精品国产| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲国产色片| www日本在线高清视频| 日韩免费高清中文字幕av| av不卡在线播放| 久久国内精品自在自线图片| 中文字幕精品免费在线观看视频| 毛片一级片免费看久久久久| 大片免费播放器 马上看| 亚洲精品av麻豆狂野| 婷婷色综合www| 婷婷成人精品国产| 久久久久久久大尺度免费视频| 水蜜桃什么品种好| 丝袜脚勾引网站| 在线 av 中文字幕| 欧美人与性动交α欧美软件| 午夜日韩欧美国产| 亚洲国产最新在线播放| 国产免费视频播放在线视频| 久久久久人妻精品一区果冻| √禁漫天堂资源中文www| 高清av免费在线| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲综合色惰| 搡老乐熟女国产| 日韩一区二区视频免费看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 精品国产乱码久久久久久男人| 九色亚洲精品在线播放| 欧美中文综合在线视频| 国产精品 欧美亚洲| 国产av国产精品国产| 亚洲精品第二区| 久久毛片免费看一区二区三区| 午夜福利,免费看| 国产成人精品在线电影| 免费观看av网站的网址| 久久免费观看电影| 制服诱惑二区| 男人操女人黄网站| 搡女人真爽免费视频火全软件| 成年女人毛片免费观看观看9 | 美女视频免费永久观看网站| 精品视频人人做人人爽| 另类亚洲欧美激情| 免费在线观看完整版高清| 国产成人精品福利久久| 黑丝袜美女国产一区| 满18在线观看网站| a级毛片在线看网站| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久精品国产自在天天线| 国产成人av激情在线播放| 日本av手机在线免费观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 一本久久精品| 午夜精品国产一区二区电影| 伦精品一区二区三区| 成人毛片60女人毛片免费| 一区在线观看完整版| 成人国产av品久久久| 中文字幕精品免费在线观看视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 看十八女毛片水多多多| 2022亚洲国产成人精品| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产激情久久老熟女| 9色porny在线观看| 婷婷色综合www| 黄色 视频免费看| 日本欧美视频一区| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 日本黄色日本黄色录像| 欧美激情高清一区二区三区 | 精品酒店卫生间| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产精品国产三级专区第一集| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲欧洲日产国产| 国精品久久久久久国模美| 久久久久精品性色| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 日韩一区二区视频免费看| 两个人看的免费小视频| 国产成人免费无遮挡视频| 一级a爱视频在线免费观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美人与善性xxx| 熟女电影av网| 男女免费视频国产| 亚洲人成电影观看| 中文欧美无线码| 欧美日韩视频精品一区| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产精品偷伦视频观看了| 日本vs欧美在线观看视频| 丰满乱子伦码专区| 卡戴珊不雅视频在线播放| 一本大道久久a久久精品| 少妇熟女欧美另类| 亚洲美女搞黄在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 99re6热这里在线精品视频| 波野结衣二区三区在线| 美女大奶头黄色视频| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 欧美日韩精品网址| 亚洲伊人色综图| 亚洲第一青青草原| 国产在线免费精品| 国产成人精品久久二区二区91 | 国产日韩欧美视频二区| 自线自在国产av| 免费看不卡的av| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲人成电影观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产视频首页在线观看| 精品久久久精品久久久| 一区二区三区激情视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 叶爱在线成人免费视频播放| 久久99蜜桃精品久久| 一级片'在线观看视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| a级毛片黄视频| 亚洲国产精品国产精品| kizo精华| 亚洲av日韩在线播放| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲内射少妇av| 黄色毛片三级朝国网站| 国产乱来视频区| 亚洲国产看品久久| 国产精品av久久久久免费| 日本午夜av视频| 久久久久人妻精品一区果冻| 超碰成人久久| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 精品酒店卫生间| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 99久久中文字幕三级久久日本| av在线播放精品| 久久久久国产精品人妻一区二区| 天天影视国产精品| 成人免费观看视频高清| 国产精品无大码| 精品一区在线观看国产| 国产在视频线精品| 亚洲美女搞黄在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 免费人妻精品一区二区三区视频| 日韩大片免费观看网站| 免费观看无遮挡的男女| 热re99久久精品国产66热6| 欧美97在线视频| 丝袜美腿诱惑在线| 国产熟女午夜一区二区三区| 男男h啪啪无遮挡| 晚上一个人看的免费电影| 日韩一区二区视频免费看| 国产免费福利视频在线观看| 日本vs欧美在线观看视频| 久久青草综合色| 一区二区三区激情视频| 国产精品国产av在线观看| 大话2 男鬼变身卡| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 一区二区日韩欧美中文字幕| 欧美激情高清一区二区三区 | 国产精品无大码| 中国国产av一级| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 老女人水多毛片| 亚洲av国产av综合av卡| 精品卡一卡二卡四卡免费| 男女午夜视频在线观看| 国产成人精品福利久久| 香蕉国产在线看| 欧美国产精品一级二级三级| 免费日韩欧美在线观看| av在线app专区| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产1区2区3区精品| 国产精品蜜桃在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产极品天堂在线| 成年女人毛片免费观看观看9 | 91aial.com中文字幕在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产亚洲最大av| 精品午夜福利在线看| 校园人妻丝袜中文字幕| 久久国内精品自在自线图片| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲国产精品999| 亚洲av中文av极速乱| 七月丁香在线播放| 精品少妇久久久久久888优播| 韩国高清视频一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 国产免费福利视频在线观看| 一本色道久久久久久精品综合| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲精品在线美女| 在线观看一区二区三区激情| 国产一区二区三区综合在线观看| 欧美精品一区二区大全| 性少妇av在线| 午夜福利视频精品| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 久久婷婷青草| 久久人妻熟女aⅴ| av福利片在线| 亚洲精品国产av成人精品| 热99久久久久精品小说推荐| 日韩一本色道免费dvd| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 免费日韩欧美在线观看| 丁香六月天网| 丝袜美腿诱惑在线| 色婷婷av一区二区三区视频| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲av电影在线进入| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 热re99久久国产66热| 精品人妻一区二区三区麻豆| videosex国产| 性少妇av在线| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产xxxxx性猛交| 制服丝袜香蕉在线| av网站在线播放免费| 国产精品免费视频内射| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产精品成人在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲国产日韩一区二区| 一区二区av电影网| videossex国产| 日韩一本色道免费dvd| 久久久亚洲精品成人影院| 99九九在线精品视频| 午夜免费男女啪啪视频观看| 亚洲av中文av极速乱| 高清av免费在线| 少妇熟女欧美另类| kizo精华| 一区在线观看完整版| 国产成人a∨麻豆精品| 国产深夜福利视频在线观看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 99久久精品国产国产毛片| 久久婷婷青草| 久久99精品国语久久久| 人人澡人人妻人| 中文字幕制服av| 久久99一区二区三区| 一级毛片我不卡| 99re6热这里在线精品视频| 日韩av免费高清视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产成人精品久久二区二区91 | 日本黄色日本黄色录像| 国产一区二区三区av在线| av国产精品久久久久影院| 老熟女久久久| 久久99一区二区三区| 国产人伦9x9x在线观看 | 亚洲成人av在线免费| 色婷婷av一区二区三区视频| 老司机亚洲免费影院| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 爱豆传媒免费全集在线观看| 韩国高清视频一区二区三区| 国产成人精品在线电影| 亚洲av.av天堂| 欧美日韩精品网址| 国产伦理片在线播放av一区| 中文字幕人妻熟女乱码| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产精品无大码| 日韩欧美精品免费久久| 国产av一区二区精品久久| 一区在线观看完整版| 国产在视频线精品| 热99久久久久精品小说推荐| 国产极品粉嫩免费观看在线| 日本欧美国产在线视频| 免费看不卡的av| 日本午夜av视频| 亚洲四区av| 老汉色av国产亚洲站长工具| 99热网站在线观看| 少妇人妻精品综合一区二区| 国产一区二区激情短视频 | 久久精品国产自在天天线| 亚洲欧美清纯卡通| a级片在线免费高清观看视频| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 在现免费观看毛片| av视频免费观看在线观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 色视频在线一区二区三区| 99久久精品国产国产毛片| 在线免费观看不下载黄p国产| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日本黄色日本黄色录像| 亚洲精品日本国产第一区| 少妇 在线观看| 亚洲成色77777| √禁漫天堂资源中文www| 三上悠亚av全集在线观看| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 精品一区在线观看国产| 国产在线一区二区三区精| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲成人手机| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 青青草视频在线视频观看| tube8黄色片| 日韩中字成人| 水蜜桃什么品种好| 久久久久久久久久人人人人人人| 久久ye,这里只有精品| 91成人精品电影| 国产精品一国产av| 国产片特级美女逼逼视频| 免费大片黄手机在线观看| www.精华液| 亚洲少妇的诱惑av| 国产精品无大码| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 在线精品无人区一区二区三| 国产成人精品婷婷| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 久久免费观看电影| 午夜老司机福利剧场| 伦精品一区二区三区| 国产成人精品婷婷| 波多野结衣av一区二区av| 久久精品国产自在天天线| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产成人精品久久久久久| 99久久综合免费| 亚洲男人天堂网一区| 色哟哟·www| tube8黄色片| 亚洲av成人精品一二三区| 另类精品久久| 电影成人av| 中文字幕精品免费在线观看视频| 免费大片黄手机在线观看| 欧美另类一区| 少妇精品久久久久久久| 亚洲欧洲国产日韩| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲精品aⅴ在线观看| 一本久久精品| 亚洲中文av在线| 人人澡人人妻人| 国产av一区二区精品久久| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 一边亲一边摸免费视频| 国产在线一区二区三区精| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久久久精品性色| 免费高清在线观看日韩| 大码成人一级视频| 黄色 视频免费看| 久久久亚洲精品成人影院| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 在线观看人妻少妇| 亚洲av成人精品一二三区| 久久精品久久久久久久性| 日韩人妻精品一区2区三区| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 国产乱来视频区| 久久久亚洲精品成人影院| 色婷婷久久久亚洲欧美| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲国产欧美网| 日本黄色日本黄色录像| 国精品久久久久久国模美| 热99久久久久精品小说推荐| av网站在线播放免费| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产一区二区在线观看av| 亚洲国产成人一精品久久久| 香蕉国产在线看| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 一边摸一边做爽爽视频免费| 久久99精品国语久久久| 亚洲av综合色区一区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲精品自拍成人| 欧美日韩精品网址| 久久精品国产亚洲av高清一级| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 美女高潮到喷水免费观看| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲,欧美,日韩| 中国国产av一级| 欧美变态另类bdsm刘玥| www.精华液| 一区福利在线观看| 国产成人精品婷婷| 天天影视国产精品| 高清av免费在线| 久久毛片免费看一区二区三区| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 一级,二级,三级黄色视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 亚洲经典国产精华液单| 国产av国产精品国产| 一本一本久久a久久精品综合妖精 国产伦在线观看视频一区 | 国产av国产精品国产| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 久久久国产一区二区| 一个人免费看片子| 国产一区亚洲一区在线观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 少妇的丰满在线观看| 亚洲伊人色综图| 精品国产一区二区久久| 九九爱精品视频在线观看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产精品蜜桃在线观看| 免费观看a级毛片全部| 婷婷成人精品国产| 欧美日韩精品成人综合77777| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 美女主播在线视频| 晚上一个人看的免费电影| 婷婷色综合大香蕉| 久久久久久人人人人人| 中文字幕人妻熟女乱码| 丝袜在线中文字幕| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 欧美 日韩 精品 国产| 日韩精品有码人妻一区| 老汉色∧v一级毛片| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产精品蜜桃在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 中文字幕亚洲精品专区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产深夜福利视频在线观看| 极品人妻少妇av视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 成人国产av品久久久| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 性色avwww在线观看| 国产av精品麻豆| 在线观看免费高清a一片| 夫妻性生交免费视频一级片| 春色校园在线视频观看| 欧美黄色片欧美黄色片|