• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    透骨消痛顆粒對(duì)兔骨關(guān)節(jié)炎模型作用的超微結(jié)構(gòu)研究

    2016-03-18 01:28:06馮芳芳林如輝陳文列黃云梅黃美雅吳廣文李西海吳追樂葉蕻芝劉獻(xiàn)祥
    中國骨與關(guān)節(jié)雜志 2016年2期
    關(guān)鍵詞:透骨下骨染色質(zhì)

    馮芳芳 林如輝 陳文列 黃云梅 黃美雅 吳廣文 李西海 吳追樂 葉蕻芝 劉獻(xiàn)祥

    ?

    透骨消痛顆粒對(duì)兔骨關(guān)節(jié)炎模型作用的超微結(jié)構(gòu)研究

    馮芳芳 林如輝 陳文列 黃云梅 黃美雅 吳廣文 李西海 吳追樂 葉蕻芝 劉獻(xiàn)祥

    【摘要】目的 觀察透骨消痛顆粒干預(yù)兔骨關(guān)節(jié)炎模型軟骨和軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu)變化情況,探討藥物對(duì)關(guān)節(jié)微觀結(jié)構(gòu)的作用機(jī)理。方法 18 只新西蘭大白兔分 3 組,模型組與藥物組按改良 Hulth 法建立膝骨關(guān)節(jié)炎模型。建模后 1 周藥物組以 1 g·ml-1透骨消痛顆粒溶液 20 ml·d-1灌胃,正常組和模型組給予等量生理鹽水,持續(xù) 12 周。脛骨標(biāo)本采用透射電鏡觀察軟骨和軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果 正常組軟骨細(xì)胞及核橢圓形,常染色質(zhì)為主,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器發(fā)達(dá);骨細(xì)胞近梭形,核扁橢圓形,核質(zhì)比大,異染色質(zhì)散在;成骨細(xì)胞扁長形,見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器,核異染色質(zhì)散在。模型組軟骨細(xì)胞及核不規(guī)則,固縮變性,異染色質(zhì)分布不均,細(xì)胞器模糊;骨細(xì)胞核固縮或不規(guī)則,異染色質(zhì)聚集;成骨細(xì)胞呈橢圓形,核不規(guī)則,異染色質(zhì)斑塊狀多位于核膜下,細(xì)胞器較少、模糊。藥物組軟骨細(xì)胞多正常,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較發(fā)達(dá);骨細(xì)胞核近橢圓形,異染色質(zhì)散在或部分聚集;成骨細(xì)胞呈扁長形,核近橢圓形,異染色質(zhì)散在,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可見擴(kuò)張。結(jié)論 透骨消痛顆粒能夠改善骨關(guān)節(jié)炎軟骨與軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu),主要作用表現(xiàn)于細(xì)胞核染色質(zhì)、參與合成細(xì)胞外基質(zhì)成分的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器的變化。

    【關(guān)鍵詞】骨關(guān)節(jié)炎;顯微鏡檢查,電子,透射;藥物療法;軟骨細(xì)胞;骨細(xì)胞;透骨消痛顆粒

    骨關(guān)節(jié)炎 ( osteoarthritis,OA) 是復(fù)雜的退行性關(guān)節(jié)疾病,關(guān)節(jié)軟骨完整性破壞、晚期軟骨下骨硬化、骨贅增生等是其主要特征[1]。骨關(guān)節(jié)炎屬于中醫(yī)“痹癥”范疇,基于“腎主骨、肝主筋”的理論,已形成治痿、祛痹與痹痿同治的治療理念[2]。透骨消痛顆粒以中醫(yī)筋骨理論為指導(dǎo),補(bǔ)腎柔肝作為根本法則,善于祛邪活血、健脾止痛,是有效防治骨關(guān)節(jié)炎的臨床驗(yàn)方。前期藥理研究顯示該組方有消炎止痛、抑制炎性介質(zhì)、清除氧自由基和改善微循環(huán)等功效[3],可減少骨關(guān)節(jié)炎軟骨蛋白多糖的丟失,明顯改善組織結(jié)構(gòu),而達(dá)到減輕軟骨纖維化,延緩關(guān)節(jié)軟骨退變、軟骨下骨硬化的作用[4-5]。本研究旨在通過對(duì)軟骨細(xì)胞、骨細(xì)胞等超微結(jié)構(gòu)觀察,進(jìn)一步闡述透骨消痛顆粒對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨和軟骨下骨微觀結(jié)構(gòu)的影響。

    材料與方法

    一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    普通級(jí) 6 個(gè)月齡新西蘭大白兔 18 只,雌雄各半,體重 ( 2.1±0.1) kg,上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供,許可證號(hào) SCXK ( 滬) 2012-0002。福建中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施,普通級(jí) ( 合格證號(hào):醫(yī)動(dòng)學(xué)第 23-016 號(hào))。實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物的處置符合中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部頒發(fā)的“關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見”。

    二、動(dòng)物分組與造模

    適應(yīng)性喂養(yǎng)后 1 周編號(hào),18 只新西蘭大白兔采用抽簽法隨機(jī)分為 3 組:正常組對(duì)照、模型組和藥物組,每組 6 只。除正常組 6 只外,其余 12 只根據(jù)改良 Hulth 法[6]建立骨關(guān)節(jié)炎模型,造模方法:兔麻醉后,從左膝內(nèi)側(cè)入路,切斷內(nèi)側(cè)副韌帶,摘除內(nèi)側(cè)半月板,切斷前交叉韌帶。術(shù)后連續(xù) 3 天大腿肌肉注射 20 萬 U 青霉素,術(shù)后 1 周驅(qū)趕兔活動(dòng)0.5 h·d-1,連續(xù) 12 周。

    三、動(dòng)物給藥

    造模后 1 周,藥物組以 1 g·ml-1透骨消痛顆粒水溶液 20 ml·d-1灌胃,正常組和模型組以等量生理鹽水灌胃,持續(xù) 12 周。透骨消痛顆粒 ( 含巴戟天、杭白芍、川芎等多味中藥,生產(chǎn)批號(hào) 20100302)由福州屏山藥廠制作。

    四、光鏡制樣觀察

    兔麻醉,取膝關(guān)節(jié)脛骨平臺(tái)內(nèi)側(cè)軟骨及軟骨下骨,置于 4% 多聚甲醛固定,10% EDTA 脫鈣;梯度乙醇脫水,二甲苯透明,石蠟包埋;切片 5 μm,HE染色。光鏡下觀察軟骨和軟骨下骨形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。

    五、透射電鏡制樣觀察

    切取脛骨平臺(tái)軟骨及軟骨下骨組織 1 mm× 1 mm×3 mm ( 長軸與軟骨面平行),3% 戊二醛-1.5% 多聚甲醛前固定,5.5% EDTA -1.5% 戊二醛脫鈣-固定,1% 四氧化后固定 2 h,梯度乙醇、丙酮脫水,環(huán)氧樹脂 618 包埋劑包埋;半薄切片1 μm,美蘭-天青染色,光鏡輔助觀察并定位;超薄切片 90 nm,鈾-鉛染色;日立 H-7650 型透射電鏡觀察軟骨與軟骨下骨的超微結(jié)構(gòu)變化,SIS 公司2K×2K CCD 相機(jī)拍攝。

    結(jié) 果

    一、顯微結(jié)構(gòu)觀察

    1. 正常對(duì)照組:軟骨表面平滑,細(xì)胞排列規(guī)律,四層結(jié)構(gòu)較明顯 ( 圖 1)。軟骨下骨骨小梁較均勻。

    2. 模型組:軟骨面破損,局部增厚,裂隙可達(dá)中層至深層;軟骨細(xì)胞排列紊亂,四層結(jié)構(gòu)不清;軟骨基質(zhì)染色失染、不均 ( 圖 2)。骨小梁不均勻。

    3. 藥物組:軟骨表面較為平整,損傷僅限淺層,深層細(xì)胞排列較規(guī)律,少凋亡;軟骨基質(zhì)染色較均勻 ( 圖 3)。軟骨下骨較正常。

    二、超微結(jié)構(gòu)觀察

    1. 正常對(duì)照組:軟骨細(xì)胞多呈圓形或橢圓形,細(xì)胞表面可見較多細(xì)而短的微絨毛樣突起;核圓形或橢圓形,居中,核內(nèi)常染色質(zhì)為主,異染色質(zhì)分布均勻;胞質(zhì)內(nèi)可見豐富粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體,糖原顆粒散在、多見,有的細(xì)胞微絲成束;軟骨組織基質(zhì)中有豐富纖細(xì)的膠原原纖維,排列較規(guī)律 ( 圖 4)。軟骨與軟骨下骨交界處,有低電子密度與高電子密度相鄰的骨基質(zhì)區(qū)域,其纖維排列方向不一致。低電子密度膠原纖維束中的膠原原纖維粗細(xì)相彷,與纖維束呈同一走向;高電子密度膠原纖維束中的膠原原纖維走向不規(guī)則,呈斜形、橫形交錯(cuò)。骨細(xì)胞呈近梭形或扁橢圓形,較多充滿骨陷窩,細(xì)胞表面突起明顯,核質(zhì)比較大,胞質(zhì)相對(duì)較少,細(xì)胞器少見;核扁橢圓形,異染色質(zhì)豐富、散在;骨組織基質(zhì)中橫紋明顯且較粗的膠原原纖維,分布均勻 ( 圖 5)。成骨細(xì)胞扁長形,胞質(zhì)內(nèi)可見粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器;細(xì)胞核常染色質(zhì)為主,異染色質(zhì)散在 ( 圖 6)。

    2. 模型組:軟骨細(xì)胞形狀多不規(guī)則,或呈多角形,細(xì)胞表面突起較少,多見變性、壞死細(xì)胞;核不規(guī)則、偏位,多固縮呈現(xiàn)電子密度增高,或異染色質(zhì)邊聚,呈凋亡細(xì)胞核;胞質(zhì)基質(zhì)深染,部分細(xì)胞器結(jié)構(gòu)破壞或不清晰,糖原聚集,脂滴可見;軟骨基質(zhì)中膠原原纖維稀疏,排列較不規(guī)律 ( 圖 7)。骨細(xì)胞大小不一,呈不規(guī)則形,突起少;細(xì)胞核固縮或不規(guī)則,多偏位,異染色質(zhì)聚集呈斑塊狀或于核膜下;骨基質(zhì)中膠原原纖維橫紋較模糊,分布排列不均勻 ( 圖 8)。成骨細(xì)胞呈橢圓形,突起少,核不規(guī)則,異染色質(zhì)斑塊狀多于核膜下;胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器較少,結(jié)構(gòu)模糊 ( 圖 9)。

    3. 藥物組:軟骨細(xì)胞圓形或橢圓形,細(xì)胞表面突起較多;核圓形或橢圓形,常染色質(zhì)為主,分布均勻;胞質(zhì)內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)、豐富,明顯擴(kuò)張成池狀,內(nèi)見中等電子密度合成物,膜表面結(jié)合型核糖體明顯,糖原顆粒散在、多見,微絲豐富;同源軟骨細(xì)胞多見,未見明顯細(xì)胞變性 ( 圖 10)。骨細(xì)胞及其核呈橢圓形或梭形,核居中,核內(nèi)異染色質(zhì)散在或部分聚集;骨組織基質(zhì)中有豐富的橫紋,膠原原纖維較粗且分布較均勻 ( 圖 11)。成骨細(xì)胞呈扁長形,突起較少,核近橢圓形,常染色質(zhì)多見,異染色質(zhì)散在;粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可見,以核周為多,有些擴(kuò)張成池狀 ( 圖 12)。

    圖1 正常組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40)  Fig.1 Normal cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖2 模型組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40)  Fig.2 Model group of cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖3 藥物組軟骨與軟骨下骨的顯微結(jié)構(gòu) ( HE × 40)  Fig.3 Drug group of cartilage and subchondral bone microstructure ( HE × 40)圖4 正常組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.4 Normal cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖5 正常組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM ×12000)  Fig.5 Normal bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖6 正常組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.6 Normal osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)圖7 模型組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.7 Model group of cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖8 模型組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 12000)  Fig.8 Model group of bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖9 模型組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.9 Model group of osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)

    討 論

    本研究是光鏡與電鏡技術(shù)相結(jié)合,在顯微結(jié)構(gòu)觀察的基礎(chǔ)上,再進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)觀察,其結(jié)果相吻合,可從細(xì)胞及其胞外基質(zhì)的超微結(jié)構(gòu),闡釋組織顯微結(jié)構(gòu)的變化。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果從軟骨和軟骨下骨的微觀變化,進(jìn)一步提供了透骨消痛方對(duì)骨關(guān)節(jié)炎療效的細(xì)胞形態(tài)學(xué)證據(jù),闡釋了藥物作用的細(xì)胞與亞細(xì)胞形態(tài)學(xué)機(jī)理。

    一、藥物對(duì)骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨超微結(jié)構(gòu)的影響

    軟骨退變是骨關(guān)節(jié)炎的最基本病變,軟骨細(xì)胞是軟骨中唯一的細(xì)胞,疾病狀態(tài)下,軟骨細(xì)胞在炎癥狀態(tài)下出現(xiàn)功能性紊亂,最終導(dǎo)致軟骨結(jié)構(gòu)病理改變[7]。病變?cè)缙谲浌羌?xì)胞可對(duì)外界刺激產(chǎn)生應(yīng)激現(xiàn)象,本實(shí)驗(yàn)中模型組軟骨細(xì)胞出現(xiàn)局部增殖現(xiàn)象,而使局部軟骨層增厚,但軟骨細(xì)胞排列紊亂。透射電鏡見軟骨細(xì)胞及核出現(xiàn)固縮、變性,甚至壞死,直接影響軟骨細(xì)胞的代謝和遺傳;軟骨表面微絨毛樣突起減少,細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換能力下降,營養(yǎng)代謝發(fā)生障礙;合成膠原蛋白、蛋白多糖等基質(zhì)成分的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器變化,將相應(yīng)影響相關(guān)功能。藥物組軟骨形態(tài)完整,未見明顯裂隙、破損,軟骨細(xì)胞與模型組相比,分布較為規(guī)律,透射電鏡下軟骨細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)多正常,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá),明顯擴(kuò)張成池狀,表現(xiàn)出活躍的細(xì)胞功能,合成蛋白質(zhì)能力增強(qiáng)。同源軟骨細(xì)胞明顯增多,增殖能力增強(qiáng),可促進(jìn)軟骨的進(jìn)一步修復(fù)。

    II 型膠原是軟骨基質(zhì)中最主要膠原表型,參與關(guān)節(jié)軟骨組織生理重建和病理破壞過程[8]。骨關(guān)節(jié)炎過程中,II 型膠原降解,導(dǎo)致軟骨基質(zhì)成分改變,進(jìn)一步介導(dǎo)軟骨細(xì)胞病變。軟骨基質(zhì)膠原原纖維排列方向紊亂的區(qū)域軟骨細(xì)胞退變程度重,細(xì)胞凋亡多見,說明軟骨細(xì)胞衰亡會(huì)影響基質(zhì)成分的正常維持;反之,軟骨細(xì)胞依賴軟骨基質(zhì)成分的完整,病變軟骨細(xì)胞由于膠原纖維網(wǎng)的破壞也會(huì)促使退變、死亡,軟骨的自我修復(fù)能力也將減弱,軟骨破壞[9]。以往的骨關(guān)節(jié)炎研究中發(fā)現(xiàn)部分基質(zhì)金屬蛋白酶 MMPs 使關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)特別是使 II 型膠原變性裂解,關(guān)節(jié)軟骨變腫脹,抗外力作用下降,最終導(dǎo)致軟骨破壞、軟骨細(xì)胞退行性改變,甚至死亡,用藥后 MMPs 含量明顯下降[10],保護(hù) II 型膠原,維持軟骨基質(zhì)穩(wěn)定。藥物組膠原原纖維與模型組相比,分布較為規(guī)律,提示 II 型膠原降解減輕,軟骨細(xì)胞微環(huán)境改善。本次實(shí)驗(yàn)通過對(duì)軟骨的超微結(jié)構(gòu)觀察,說明透骨消痛顆??蓽p輕軟骨基質(zhì)的降解,緩解骨關(guān)節(jié)炎軟骨退變。

    二、藥物對(duì)骨關(guān)節(jié)炎軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)的影響

    軟骨代謝紊亂、局部降解被認(rèn)為是骨關(guān)節(jié)炎的始發(fā)因素,而軟骨下骨改變?cè)诠顷P(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮著重要作用[11]。軟骨下骨包括軟骨下骨板、骨小梁、血管和小梁間腔隙,對(duì)關(guān)節(jié)軟骨起機(jī)械性和代謝性的保護(hù)作用[12],在骨關(guān)節(jié)炎早期就可見骨小梁稀疏等骨質(zhì)疏松的結(jié)構(gòu)變化。骨小梁結(jié)構(gòu)對(duì)骨強(qiáng)度至關(guān)重要[13],是骨脆性的決定因素,還起支持造血組織的作用,與骨的生成有關(guān);骨小梁內(nèi)部有骨細(xì)胞及其膠原和鈣鹽沉積;骨小梁表面被覆成骨細(xì)胞,成骨細(xì)胞主要負(fù)責(zé)骨基質(zhì)合成、分泌和礦化,控制骨重建的激活或終止[14],維持機(jī)體正常骨量。

    本研究模型組成骨細(xì)胞核發(fā)生明顯變化,異染色質(zhì)增多,細(xì)胞器數(shù)量減少,功能退化,細(xì)胞的新陳代謝和增殖分化能力明顯降低,通過物質(zhì)運(yùn)輸通道促進(jìn)軟骨細(xì)胞 MMPs 合成,加快軟骨細(xì)胞退變;而藥物組成骨細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張成池,蛋白質(zhì)合成能力增加,推測透骨消痛顆??赏ㄟ^改善成骨細(xì)胞功能形態(tài),影響骨重塑平衡,而達(dá)到對(duì)軟骨下骨的保護(hù),與前期研究結(jié)果一致[15]。

    圖10 藥物組軟骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.10 Drug group of cartilage cell ultrastructure ( TEM × 10000)圖11 藥物組骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 12000)  Fig.11 Drug group of bone cell ultrastructure ( TEM × 12000)圖12 藥物組成骨細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) ( TEM × 10000)  Fig.12 Drug group of osteoblasts ultrastructure ( TEM × 10000)

    骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞,細(xì)胞的合成活動(dòng)停止,胞質(zhì)減少。骨細(xì)胞的骨陷窩-小管系統(tǒng)提供微環(huán)境系統(tǒng),骨間隙液可以營養(yǎng)骨組織。本實(shí)驗(yàn)?zāi)P徒M骨細(xì)胞變形,特別是核固縮、偏位,細(xì)胞新陳代謝障礙,由骨細(xì)胞分泌的膠原蛋白等含量減少,影響整個(gè)微環(huán)境;基質(zhì)中膠原原纖維結(jié)構(gòu)紊亂,橫紋模糊,骨骼韌性降低,脆性增加,骨質(zhì)變得疏松,更易發(fā)生微骨折。藥物組骨細(xì)胞功能形態(tài)改善,繼續(xù)指揮、協(xié)調(diào)骨重建,改善骨質(zhì);膠原原纖維變粗,排列規(guī)律,骨組織得到修復(fù)。

    本實(shí)驗(yàn)藥物組軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)比模型組明顯改善,提示透骨消痛顆粒能使病理狀態(tài)下機(jī)體成骨細(xì)胞重新達(dá)到平衡,骨細(xì)胞微環(huán)境改善,從而進(jìn)一步延緩骨關(guān)節(jié)炎向晚期進(jìn)展。

    參 考 文 獻(xiàn)

    [1] Poulet B, de Souza R, Kent AV, et al. Intermittent applied mechanical loading induces subchondral bone thickening that may be intensifiedlocally by contiguous articular cartilage lesions. Osteoarthritis Cartilage, 2015, 23(6):940-948.

    [2] 李西海, 劉獻(xiàn)祥. 骨關(guān)節(jié)炎的核心病機(jī)--本痿標(biāo)痹. 中醫(yī)雜志, 2014, 55(14):1248-1249,1252.

    [3] 李西海, 劉獻(xiàn)祥. 透骨消痛顆粒的現(xiàn)代藥理學(xué)基礎(chǔ). 福建中醫(yī)藥, 2006, 37(1):50-52.

    [4] 吳廣文, 葉錦霞, 鄭春松, 等. 骨性關(guān)節(jié)炎模型大鼠關(guān)節(jié)軟骨變化及透骨消痛膠囊干預(yù)的作用. 中國組織工程研究, 2014, 18(49):7924-7929.

    [5] 黃云梅, 陳文列, 劉獻(xiàn)祥, 等. 透骨消痛顆粒對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎影響的組織化學(xué)研究. 中國中醫(yī)骨傷科雜志, 2011, 19(1):1-3.

    [6] 劉獻(xiàn)祥, 李西海, 周江濤, 等. 改良Hulth造模法復(fù)制膝骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2005, 25(12): 1104-1108.

    [7] Hoff P, Buttgereit F, Burmester GR, et al. Osteoarthritis synovial fluid activates pro-inflammatory cytokines in primary human chondrocytes. Int Orthop, 2013, 37(1):145-151.

    [8] Hu W, Zhang W, Li F, et al. Bortezomib prevents the expression of MMP-13 and the degradation of collagen type 2 in human chondrocytes. Biochem Biophys Res Commun, 2014, 452(3): 526-530.

    [9] 吳志宏, 邱貴興. 骨關(guān)節(jié)炎髕骨軟骨中II型膠原的表達(dá)和超微結(jié)構(gòu)研究. 中華骨科雜志, 2005, 25(5):311-315.

    [10] 劉獻(xiàn)祥, 李西海, 周江濤, 等. 透骨消痛顆粒防治膝骨性關(guān)節(jié)炎的機(jī)理研究. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2007, 27(1):50-54.

    [11] Yang T, Zhang J, Cao Y, et al. Wnt5a/Ror2 mediates temporomandibular joint subchondral bone remodeling. J Dent Res, 2015, 94(6):803-812.

    [12] Madry H, van Dijk CN, Mueller-Gerbl M. The basic science of the subchondral bone. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc, 2010, 18(4):419-433.

    [13] Hernandez CJ, Keaveny TM. A biomechanical perspective on bone quality. Bone, 2006, 39(6):1173-1181.

    [14] 陳賽楠, 廖乃順, 陳文列, 等. OPG/RANKL/RANK系統(tǒng)在調(diào)控骨性關(guān)節(jié)炎軟骨下骨骨重建中的作用. 骨科, 2013, 4(4): 214-217.

    [15] 黃云梅, 陳文列, 林如輝, 等. 透骨消痛膠囊促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和分化. 中國組織工程研究, 2013, 17(33):5923-5928.

    ( 本文編輯:李貴存)

    . 作者須知 Instruction for authors .

    A ultrastructural study of Touguxiaotong Granule on osteoarthritis rabbit model FENG Fang-fang, LIN Ru-hui, CHEN Wen-lie, HUANG Yun-mei, HUANG Mei-ya, WU Guang-wen, LI Xi-hai, WU Zhui-le, YE Hong-zhi, LIU Xianxiang. Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou, Fujian, 350122, PRC

    【Abstract】Objective To explore the microcosmic mechanism of Touguxiaotong Granule ( TXG) on ultrastructure in cartilage by observing cartilage and subchondral bone of TXG-treated rabbit osteoarthritis model with transmission electron microscope ( TEM). Methods Eighteen New Zealand rabbits of 6-month old were randomly divided into 3 groups: the control group, the model group and the drug group. The knee osteoarthritis model was replicated using modified Hulth method. Rabbits in the drug group were applied 1 g · ml-1TXG solution by intragastric administration. While rabbits in the control group and model group were given the same amount of 0.9% physiological saline by intragastric administration. All rabbits had been given the dosage of 20 ml · d-1for 12 weeks. Obtained samples of tibia were observed by TEM. Results In the control group, the chondrocytes were characterized as subelliptic shape, abundant rough endoplasmic reticulum and mainly euchromatin in oval nucleus. Osteocytes appeared as fusiform shape and flat oval nucleus, with big karyoplasmicratio and scattered heterochromatin. Osteoblasts displayed prolate shape, rough endoplasmic reticulum and scattered heterochromatin. Compared with the control group, chondrocytes and nucleus in the model groups of osteoarthritis showed irregular shape, pyknosis and degeneration. The cellular organelles were fuzzy or unclear in the chondrocytes while the nucleus was accompanied by unevenly distributed heterochromatin. Irregular karyopyknosis and aggregated heterochromatin appeared in osteocytes. Osteoblasts appeared to be oval. The organelles were reduced and fuzzy and the patchy heterochromatin was under the nuclear membrane in irregular nucleus. Compared with the model group, chondrocytes in drug group were characterized as regular morphology with abundant rough endoplasmic reticulum. The nucleus of osteocytes showedbook=130,ebook=55subelliptic shape, scattered or partial aggregated heterochromatin. Osteoblasts showed elongated shape, expanded rough endoplasmic reticulum, and scattered heterochromatin in oval-like nucleus. Conclusions Touguxiaotong Granule can significantly improve the ultrastructure of the cartilage and subchondral bone in osteoarthritis. It plays an important role in the change of the nuclear chromatin and the rough endoplasmic reticulum which is involved in the synthesis of extracellular matrix components.

    【Key words】Osteoarthritis; Microscopy, electron, transmission; Drug therapy; Chondrocytes; Osteocytes; Touguxiaotong granule

    ( 收稿日期:2015-05-13)

    Corresponding author:CHEN Wen-lie, Email: chen.wl@163.com

    通信作者:陳文列,Email: chen.wl@163.com

    基金項(xiàng)目:福建省自然科學(xué)基金 ( 2014J01356),陳可冀中西醫(yī)結(jié)合發(fā)展基金 ( CKJ2011004)
    作者單位:350122 福州,福建中醫(yī)藥大學(xué) ( 馮芳芳、陳文列);350122 福州,福建中醫(yī)藥大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合研究院 ( 林如輝、陳文列、黃美雅、吳廣文、葉蕻芝、劉獻(xiàn)祥);350122 福州,國家中醫(yī)藥三級(jí)科研實(shí)驗(yàn)室-中藥藥理 ( 細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能) 實(shí)驗(yàn)室 ( 陳文列、黃云梅、吳追樂);350108 福州,福建省中西醫(yī)結(jié)合老年性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室( 李西海、劉獻(xiàn)祥)

    DOI:10.3969/j.issn.2095-252X.2016.02.012

    中圖分類號(hào):R684.3

    猜你喜歡
    透骨下骨染色質(zhì)
    X線與CT引導(dǎo)下骨病變穿刺活檢的臨床應(yīng)用
    染色質(zhì)開放性與動(dòng)物胚胎發(fā)育關(guān)系的研究進(jìn)展
    哺乳動(dòng)物合子基因組激活過程中的染色質(zhì)重塑
    軟骨下骨重塑與骨關(guān)節(jié)炎綜述
    透骨的事物
    山花(2020年7期)2020-07-18 16:11:39
    悼李公正中先生
    詩潮(2020年6期)2020-06-24 12:55:46
    追風(fēng)透骨制劑:說明書增加了“警示語”
    染色質(zhì)可接近性在前列腺癌研究中的作用
    “哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞生發(fā)泡染色質(zhì)構(gòu)型的研究進(jìn)展”一文附圖
    骨關(guān)節(jié)炎與軟骨下骨研究進(jìn)展
    亚洲av五月六月丁香网| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产大屁股一区二区在线视频| 69人妻影院| 深夜a级毛片| 高潮久久久久久久久久久不卡| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产老妇女一区| 日本在线视频免费播放| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 午夜影院日韩av| 欧美高清成人免费视频www| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 哪里可以看免费的av片| 中文亚洲av片在线观看爽| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 午夜免费激情av| 我要看日韩黄色一级片| 国产精品影院久久| 午夜日韩欧美国产| 亚洲人成电影免费在线| 天堂√8在线中文| 欧美三级亚洲精品| 欧美极品一区二区三区四区| 最近中文字幕高清免费大全6 | 一本一本综合久久| 少妇人妻一区二区三区视频| 麻豆成人av在线观看| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 午夜免费激情av| 舔av片在线| 搡老岳熟女国产| a级一级毛片免费在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 嫩草影院精品99| 免费看a级黄色片| av在线蜜桃| 又紧又爽又黄一区二区| 18+在线观看网站| 午夜福利成人在线免费观看| 能在线免费观看的黄片| 制服丝袜大香蕉在线| 久久久国产成人精品二区| 欧美午夜高清在线| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 亚洲性夜色夜夜综合| av欧美777| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲人成网站在线播| av视频在线观看入口| 亚洲精品日韩av片在线观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 69av精品久久久久久| 亚洲无线在线观看| 十八禁网站免费在线| 精品一区二区免费观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精品亚洲一级av第二区| netflix在线观看网站| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 首页视频小说图片口味搜索| 桃红色精品国产亚洲av| 岛国在线免费视频观看| 中文字幕免费在线视频6| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 悠悠久久av| 国产探花在线观看一区二区| 可以在线观看的亚洲视频| 欧美不卡视频在线免费观看| 欧美3d第一页| 俄罗斯特黄特色一大片| 在线观看av片永久免费下载| 日日夜夜操网爽| 真人一进一出gif抽搐免费| 99国产综合亚洲精品| 国产真实伦视频高清在线观看 | 国产精品爽爽va在线观看网站| 伦理电影大哥的女人| 国产麻豆成人av免费视频| 波多野结衣高清作品| 91在线观看av| 亚洲欧美日韩高清专用| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲,欧美,日韩| 亚洲av电影不卡..在线观看| 我要搜黄色片| 天堂√8在线中文| 成人国产一区最新在线观看| 国产亚洲精品av在线| 国产精品永久免费网站| 好男人在线观看高清免费视频| 哪里可以看免费的av片| 国产爱豆传媒在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 中出人妻视频一区二区| 男女之事视频高清在线观看| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 日本黄大片高清| 51国产日韩欧美| 深夜精品福利| 1000部很黄的大片| 日韩欧美在线乱码| 欧美3d第一页| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 一级a爱片免费观看的视频| 成年版毛片免费区| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产69精品久久久久777片| 99riav亚洲国产免费| АⅤ资源中文在线天堂| 精品久久国产蜜桃| 日本 av在线| 此物有八面人人有两片| 国产精品99久久久久久久久| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲黑人精品在线| 成年女人永久免费观看视频| 天堂√8在线中文| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 免费在线观看影片大全网站| 国产伦在线观看视频一区| 久久伊人香网站| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 成年人黄色毛片网站| 噜噜噜噜噜久久久久久91| av国产免费在线观看| 午夜两性在线视频| 亚洲午夜理论影院| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲成人久久爱视频| av视频在线观看入口| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 97碰自拍视频| 国产精品98久久久久久宅男小说| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美成人性av电影在线观看| 免费av毛片视频| 欧美bdsm另类| av天堂中文字幕网| 欧美另类亚洲清纯唯美| 麻豆国产av国片精品| 久久久久久国产a免费观看| 精品人妻1区二区| 黄色配什么色好看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 中文字幕av成人在线电影| 99久久九九国产精品国产免费| av黄色大香蕉| 一本精品99久久精品77| 日韩有码中文字幕| 一区二区三区免费毛片| 成年女人永久免费观看视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 成年女人看的毛片在线观看| 国内精品久久久久精免费| 无人区码免费观看不卡| 亚洲国产欧美人成| 久久精品影院6| 精品久久久久久久久亚洲 | 亚洲美女黄片视频| 一个人看视频在线观看www免费| 高清在线国产一区| 男人和女人高潮做爰伦理| 性色av乱码一区二区三区2| 国产伦精品一区二区三区视频9| 欧美日韩黄片免| 黄色一级大片看看| 日本在线视频免费播放| 精品一区二区三区视频在线| 1024手机看黄色片| 我要搜黄色片| 亚洲熟妇熟女久久| av欧美777| 大型黄色视频在线免费观看| 欧美又色又爽又黄视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 久久人妻av系列| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 亚洲avbb在线观看| 美女cb高潮喷水在线观看| 黄色视频,在线免费观看| 色吧在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 一个人看视频在线观看www免费| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 婷婷精品国产亚洲av| 简卡轻食公司| 最近最新免费中文字幕在线| 成人特级av手机在线观看| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品久久久久久久久免 | 久久久久国内视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 精品久久久久久久久亚洲 | 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产av麻豆久久久久久久| 窝窝影院91人妻| 首页视频小说图片口味搜索| 人妻久久中文字幕网| a在线观看视频网站| 变态另类丝袜制服| 久久精品国产自在天天线| 一区二区三区高清视频在线| 成人永久免费在线观看视频| 午夜久久久久精精品| a在线观看视频网站| 最近中文字幕高清免费大全6 | 成人三级黄色视频| av在线老鸭窝| 国产成人影院久久av| 国产精品1区2区在线观看.| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 成人精品一区二区免费| 亚洲avbb在线观看| 午夜激情福利司机影院| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲熟妇熟女久久| 91麻豆精品激情在线观看国产| 日本精品一区二区三区蜜桃| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日韩欧美 国产精品| 麻豆成人av在线观看| 日韩欧美 国产精品| 成人特级黄色片久久久久久久| 99视频精品全部免费 在线| 少妇人妻精品综合一区二区 | 免费av毛片视频| 久久人人精品亚洲av| 国产高清视频在线播放一区| 波多野结衣高清无吗| 日本黄大片高清| 永久网站在线| 熟女电影av网| 亚洲中文字幕日韩| av福利片在线观看| 婷婷亚洲欧美| 可以在线观看的亚洲视频| 很黄的视频免费| 亚洲avbb在线观看| 国产精品野战在线观看| 日韩精品中文字幕看吧| 免费在线观看影片大全网站| eeuss影院久久| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 一区二区三区四区激情视频 | 亚洲成人精品中文字幕电影| 免费av不卡在线播放| 成人毛片a级毛片在线播放| 身体一侧抽搐| 一区二区三区高清视频在线| 国产乱人视频| 亚洲中文字幕日韩| 女同久久另类99精品国产91| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产探花极品一区二区| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久9热在线精品视频| 久久久久国内视频| 日韩亚洲欧美综合| 十八禁网站免费在线| www日本黄色视频网| www.999成人在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产私拍福利视频在线观看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产高清激情床上av| 亚洲乱码一区二区免费版| 国产不卡一卡二| www日本黄色视频网| 少妇人妻一区二区三区视频| 色在线成人网| eeuss影院久久| 精品久久久久久,| 日韩精品青青久久久久久| 国产主播在线观看一区二区| 欧美在线黄色| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲一区二区三区不卡视频| 成人精品一区二区免费| 91在线观看av| 特级一级黄色大片| 国产大屁股一区二区在线视频| 校园春色视频在线观看| 桃色一区二区三区在线观看| 国产69精品久久久久777片| 99热6这里只有精品| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 成年免费大片在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产麻豆成人av免费视频| 免费在线观看亚洲国产| 欧美中文日本在线观看视频| 亚洲不卡免费看| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 久久久久精品国产欧美久久久| 精品久久久久久久久久久久久| 国产成人啪精品午夜网站| 老司机福利观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 免费av观看视频| av福利片在线观看| 女同久久另类99精品国产91| av天堂中文字幕网| 成人特级黄色片久久久久久久| 成人国产综合亚洲| 欧美激情久久久久久爽电影| 男人舔奶头视频| 午夜福利18| 亚洲精品在线观看二区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 少妇丰满av| 最新中文字幕久久久久| 国产伦精品一区二区三区视频9| 久久精品国产清高在天天线| 99久久精品热视频| 国产免费av片在线观看野外av| 丰满的人妻完整版| 最近视频中文字幕2019在线8| 欧美一区二区亚洲| 丰满乱子伦码专区| 久久国产乱子伦精品免费另类| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 少妇丰满av| 久久亚洲精品不卡| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 日韩欧美三级三区| 成人特级av手机在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 一个人免费在线观看的高清视频| 高清毛片免费观看视频网站| 91久久精品国产一区二区成人| 搡老妇女老女人老熟妇| bbb黄色大片| а√天堂www在线а√下载| 亚洲av第一区精品v没综合| 日本免费a在线| 亚洲av熟女| 午夜老司机福利剧场| 真人一进一出gif抽搐免费| 我要搜黄色片| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲人成伊人成综合网2020| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 日本三级黄在线观看| 午夜精品一区二区三区免费看| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲一区二区三区不卡视频| 日本熟妇午夜| 网址你懂的国产日韩在线| 在线天堂最新版资源| 日本黄色片子视频| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产av一区在线观看免费| 久久精品国产亚洲av天美| 高清在线国产一区| 国产精品电影一区二区三区| 99久久九九国产精品国产免费| 国产免费一级a男人的天堂| 国产精品影院久久| 亚洲国产高清在线一区二区三| 悠悠久久av| 免费高清视频大片| 亚洲最大成人av| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 久久久国产成人免费| 国产成人欧美在线观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 高潮久久久久久久久久久不卡| 成熟少妇高潮喷水视频| 精品欧美国产一区二区三| 97热精品久久久久久| 午夜亚洲福利在线播放| 毛片一级片免费看久久久久 | 午夜精品一区二区三区免费看| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 搡老妇女老女人老熟妇| 九九热线精品视视频播放| 哪里可以看免费的av片| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国产精品一及| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 午夜福利在线在线| 亚洲专区中文字幕在线| 不卡一级毛片| 亚洲电影在线观看av| h日本视频在线播放| 怎么达到女性高潮| 亚洲在线观看片| 国产成人啪精品午夜网站| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲精品色激情综合| 亚洲av第一区精品v没综合| 1024手机看黄色片| 啦啦啦韩国在线观看视频| 少妇高潮的动态图| 最好的美女福利视频网| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 免费黄网站久久成人精品 | netflix在线观看网站| 日本黄色视频三级网站网址| 欧美黑人欧美精品刺激| 一个人免费在线观看电影| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲av不卡在线观看| 欧美区成人在线视频| av中文乱码字幕在线| 丰满人妻一区二区三区视频av| 青草久久国产| 亚洲人成网站在线播| 日韩欧美在线二视频| xxxwww97欧美| 真人做人爱边吃奶动态| 久久国产乱子免费精品| 色综合亚洲欧美另类图片| 少妇丰满av| 麻豆国产97在线/欧美| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲人成网站在线播| 亚洲av一区综合| 亚洲18禁久久av| 亚洲精华国产精华精| 亚洲国产精品久久男人天堂| 动漫黄色视频在线观看| 国产高清激情床上av| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 观看免费一级毛片| 欧美不卡视频在线免费观看| av在线观看视频网站免费| 极品教师在线免费播放| 可以在线观看的亚洲视频| 男女那种视频在线观看| 少妇高潮的动态图| 日日夜夜操网爽| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 免费看a级黄色片| 天天躁日日操中文字幕| 两人在一起打扑克的视频| 真人做人爱边吃奶动态| 身体一侧抽搐| www.色视频.com| 日本a在线网址| 欧美国产日韩亚洲一区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产一区二区激情短视频| 嫩草影院入口| 色综合欧美亚洲国产小说| 欧美区成人在线视频| 一区福利在线观看| 欧美激情在线99| 国产单亲对白刺激| netflix在线观看网站| 一a级毛片在线观看| 欧美日韩乱码在线| 又爽又黄无遮挡网站| 搞女人的毛片| 午夜免费成人在线视频| 男女视频在线观看网站免费| 欧美3d第一页| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 黄色视频,在线免费观看| 51国产日韩欧美| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 永久网站在线| 国产高清视频在线观看网站| 超碰av人人做人人爽久久| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美精品国产亚洲| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 午夜老司机福利剧场| 中文字幕av在线有码专区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品爽爽va在线观看网站| 精品熟女少妇八av免费久了| 成人美女网站在线观看视频| 成人三级黄色视频| 久久6这里有精品| 在线播放国产精品三级| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 男女下面进入的视频免费午夜| 毛片女人毛片| 免费人成在线观看视频色| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲av.av天堂| 十八禁人妻一区二区| 亚洲一区二区三区不卡视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产久久久一区二区三区| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 日日摸夜夜添夜夜添小说| 一a级毛片在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 国产精品不卡视频一区二区 | 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 别揉我奶头 嗯啊视频| av福利片在线观看| 精品久久国产蜜桃| 如何舔出高潮| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲av第一区精品v没综合| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产爱豆传媒在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 亚洲人成网站高清观看| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 在线观看午夜福利视频| 最近最新中文字幕大全电影3| 中文字幕av成人在线电影| 久久久久九九精品影院| 国内精品久久久久精免费| 在线观看av片永久免费下载| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国内精品久久久久精免费| 久久国产精品影院| 91在线精品国自产拍蜜月| 夜夜夜夜夜久久久久| 午夜精品一区二区三区免费看| 白带黄色成豆腐渣| av中文乱码字幕在线| 99在线人妻在线中文字幕| 午夜福利在线观看吧| 日本黄色片子视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲色图av天堂| 在线观看av片永久免费下载| 午夜a级毛片| 免费看美女性在线毛片视频| 高清毛片免费观看视频网站| 如何舔出高潮| 麻豆一二三区av精品| 亚洲中文字幕日韩| www日本黄色视频网| 精品久久久久久久久av| 毛片女人毛片| 女人被狂操c到高潮| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 国产午夜精品论理片| 亚洲经典国产精华液单 | 午夜福利免费观看在线| 精品人妻熟女av久视频| 国产成+人综合+亚洲专区| 成人三级黄色视频| 精品久久久久久久末码| 一本综合久久免费| 人人妻人人澡欧美一区二区| а√天堂www在线а√下载| 高清在线国产一区| 欧美三级亚洲精品| 99riav亚洲国产免费| 午夜日韩欧美国产| 男女下面进入的视频免费午夜| 夜夜夜夜夜久久久久| 网址你懂的国产日韩在线| 亚洲av美国av| 很黄的视频免费| 欧美激情久久久久久爽电影| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 哪里可以看免费的av片| 国产探花在线观看一区二区| 天堂动漫精品| 看免费av毛片| 有码 亚洲区| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 精品久久国产蜜桃| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产精品日韩av在线免费观看| 可以在线观看毛片的网站| 精品午夜福利在线看| 日本一本二区三区精品| 99热只有精品国产| 高潮久久久久久久久久久不卡| 美女黄网站色视频| 亚洲av成人精品一区久久| 久久久久久久久久黄片| 国产色爽女视频免费观看| 深夜精品福利| 欧美潮喷喷水| 听说在线观看完整版免费高清| 国产精品不卡视频一区二区 | 在线播放国产精品三级| 999久久久精品免费观看国产| 精品免费久久久久久久清纯| 91麻豆av在线| 国产男靠女视频免费网站| а√天堂www在线а√下载| 精品一区二区三区av网在线观看| 精品人妻视频免费看| 久久久久九九精品影院| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产黄色小视频在线观看| 窝窝影院91人妻| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 成年免费大片在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 免费大片18禁| 如何舔出高潮|