新疆野生狹葉蕁麻草中黃酮的提取

王靜　姜麗　余桂連

摘 要：新疆有豐富的野生狹葉蕁麻草，其富含人體必需的黃酮類化合物，為確定新疆野生狹葉蕁麻中黃酮的最佳提取條件，本實驗采用不同的料液比、乙醇濃度、浸提溫度及時間四因素對浸提效果進行比較分析，確定了對新疆野生狹葉蕁麻中黃酮類化合物提取的最佳單因素條件。然后由正交試驗得出最佳提取工藝條件為：料液比1∶30、乙醇質量分數50%、浸提溫度60℃、浸提時間5h，在此條件下測得一級提取率為82.5%。

關鍵詞：新疆；蕁麻草；黃酮類化合物；提取

蕁麻草屬蕁麻科（Urticaceae） 是一年或多年生野生草本植物。我國約有16種，常見的有寬葉蕁麻、狹葉蕁麻、裂葉蕁麻等，廣布于我國西北、東北、華北及西南各地，資源豐富。該屬植物還是一種常用的民族藥和民間藥，早已記載于《本草綱目》等古籍中，其含豐富的蛋白質、黃酮、多糖等營養(yǎng)素，具有對肝腎功能、消化功能、活絡經脈、解毒等有很好的療效[1～2]。

近年來，國內對蕁麻屬植物成分的研究有所關注，張海悅[3]等通過對狹葉蕁麻根的研究發(fā)現，其根中含有黃酮、甾醇、有機酸、苷類、酚類化合物及糖類、蛋白質、氨基酸、油脂等成分。王亞麗[4]等曾對狹葉蕁麻進行研究，發(fā)現狹葉蕁麻根、莖、葉的乙醇提取物和狹葉蕁麻根的水提取物均有抗炎、鎮(zhèn)痛的活性。本實驗通過對新疆野生狹葉蕁麻草中黃酮類化合物的提取進行初步研究，以期能夠對新疆當地該種野生植物資源的加工利用與合理開發(fā)提供科學依據。同為維藥的加工業(yè)發(fā)展做出一份貢獻。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

材料：

新疆野生狹葉蕁麻：采集于新疆烏魯木齊市周邊地區(qū)，全株洗凈，烘干，粉碎，備用；

石油醚：AR級，深圳市南山區(qū)恒泰豐化工公司；無水乙醇、95%乙醇：AR級，天津致遠化學試劑有限公司。

7230G紫外分光光度計：上海菁華科技儀器有限公司；RE52- AA旋轉蒸發(fā)儀：上海亞榮生化儀器廠；DZKW-D-2電熱恒溫水浴鍋：北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司；FA2204N電子天平：箐海儀器有限公司；85-2B型磁力攪拌加熱器：金壇市醫(yī)療儀器器廠；XFB-500中藥粉碎機：吉首忠誠制藥機械廠。

1.2 試驗方法

1.2.1 狹葉蕁麻黃酮類物質的提取工藝過程

稱取25g蕁麻粉末→醇回流過濾→減壓濃縮→石油醚萃取→醇沉→減壓濃縮→定容→測定吸光度。

操作要點與吸光度測定參見文獻[3]。

1.2.2 狹葉蕁麻黃酮類物質提取的單因素試驗

①不同料液比試驗。

取5個500mL三角瓶，每個精確加入10.00g蕁麻粉末，再各加入50%乙醇 100mL、200mL、300mL、400mL、500mL，置于50℃水浴浸提5h，按試驗方法1.2.2進行，然后對黃酮類化合物進行測定。

②不同乙醇濃度試驗

取6個500mL三角瓶，每個精確加入10.00g蕁麻粉末，再各加入300 mL乙醇的濃度分別為 0、20%、40%、60%、80%，于50℃水浴中浸提5h，按試驗方法1.2.2進行，再測定其吸光度。

③不同浸提溫度試驗。

準確稱量6份（10.00g）蕁麻粉末于500mL的三角瓶中，加入50%乙醇300mL分別在30、40、50、60、70、80℃的水浴中浸提5h，按試驗方法1.2.2進行，再測定其吸光度。

④不同浸提時間試驗

取6個500mL三角瓶，每個精確加入10.00g蕁麻粉末，分別加入50%乙醇各300mL，在50℃恒溫水浴中分別浸提1、2、3、4、5、6h，按試驗方法1.2.2進行，再測定其吸光度。

2 結果與分析

2.1 不同料液比對提取的影響

如圖1，料液比與黃酮類物質含量之間呈現先上升后降低的狀態(tài)，當料液比1∶40時達最高。超過這一值后逐漸下降?？紤]到浸提效果和能耗情況，確定最佳料液比為 1∶30。

2.2 不同乙醇濃度對提取的影響

圖2表明，乙醇質量分數與黃酮類化合物吸光度變化呈拋物線型變化，乙醇50%時吸光度的數值最高。因此選定50%的乙醇質量分數為最佳。

2.3 不同浸提溫度對提取的影響（如圖3，圖4）

圖3表明：黃酮類化合物提取量隨著溫度的升高緩慢上升，但溫度超過60 ℃后開始降低。原因是隨著溫度提升乙醇揮發(fā)，導致濃度降低，從而影響浸提效果。另外從實際生產中著想，提取過高溫度會增加乙醇蒸汽濃度，從而存在危險性，為確保提取率和安全性，選擇50 ℃為最佳提取溫度。

2.4 不同浸提時間對提取的影響

圖4表明：浸取時間與黃酮類化合物得率也呈現出先升后降狀態(tài)，超過6h浸取率快速下降。故考慮到最佳浸提效果，故選時間為5h。

2.5 正交實驗確定最佳提取條件

采用正交實驗法，以吸光度為評價指標，確定最佳提取條件。

根據以上單因素結果，確定最適的料液比為1：30，選用其他三個影響黃酮類提取的因素：乙醇濃度、提取時間及溫度，設計出因素水平表，如表1所示。

在此因素水平條件下，進行L9（34）正交試驗，如表2所示。

由表2判斷出影響新疆野生蕁麻草中黃酮類化合物提取因素的大小關系為：提取時間>乙醇濃度>提取溫度。由此得出最佳工藝條件為A2B2C3，即乙醇濃度50%，提取時間5h、提取溫度60℃。在此條件下測得一級提取率為82.5%。

3 小結

通過試驗得知：采用乙醇溶液提取新疆野生蕁麻莖中黃酮類化合物的主要影響因素分別是料液比、乙醇濃度、提取溫度和時間。由正交試驗確定提取工藝的最佳條件為A2B2C3，即乙醇濃度50%，提取時間5h、提取溫度60℃，并測得一級提取率為82.5%。

參考文獻：

[1]王夢月，衛(wèi)瑩芳.蕁麻屬植物在民間的藥用情況調查[J].中國民族民間醫(yī)藥雜志，2001，5：645-346.

[2]朱琪.維吾爾族醫(yī)藥學[M].昆明：云南民族出版社，1995.

[3]毛迪瑞，張海悅，王黎兵，等.狹葉蕁麻中黃酮的提取研究[J].食品科技，2010，35（1）：214-217.

[4]王欽德，楊堅.食品試驗設計與統(tǒng)計分析[M].北京：中國農業(yè)大學出版社，2003.

第一作者簡介：王靜（1980-），女，碩士研究生，研究方向：高分子材料的合成與應用研究。