金標(biāo)法快速檢測HBsAg漏檢原因分析

黃乙清，邢益森

(海南省血液中心檢驗(yàn)科，海南 海口 570311)

·經(jīng)驗(yàn)交流·

金標(biāo)法快速檢測HBsAg漏檢原因分析

黃乙清，邢益森

(海南省血液中心檢驗(yàn)科，海南 ?？?570311)

目的 分析街頭金標(biāo)法快速檢測結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室重復(fù)金標(biāo)法結(jié)果之間差異，了解乙肝表面抗原(HBsAg)產(chǎn)生漏檢的原因。方法街頭金標(biāo)法篩查合格標(biāo)本，經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法、病毒核酸檢測(NAT)法進(jìn)行初、復(fù)檢。當(dāng)ELISA法和NAT法測定的S/CO≥1時(shí)標(biāo)本確定為陽性，再將確定為陽性的標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室再次按街頭初篩方法用金標(biāo)快速試紙條重復(fù)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果金標(biāo)法快速檢測的57 508份陰性血液標(biāo)本經(jīng)ELISA法和NAT法初、復(fù)檢，最終確定陽性標(biāo)本407份，金標(biāo)法快速檢測的總漏檢率為0.71%(407/57 508)；407份經(jīng)復(fù)檢確定陽性的標(biāo)本，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室重復(fù)金標(biāo)法檢測共360份檢測為陽性標(biāo)本，漏檢數(shù)47份，占總漏檢數(shù)的11.5%(47/407)。結(jié)論人為因素和方法學(xué)的限制是產(chǎn)生漏檢的主要原因，嚴(yán)格要求人員操作培訓(xùn)和試劑的選擇可有效降低血液漏檢。

無償獻(xiàn)血；乙肝表面抗原；金標(biāo)法；酶聯(lián)免疫吸附法；核酸檢測法；漏檢

乙肝表面抗原(HBsAg)是檢測HBV感染最常用的指標(biāo)，為了方便無償獻(xiàn)血工作順利開展，使獻(xiàn)血者在短時(shí)間內(nèi)完成獻(xiàn)血，筆者在各采血點(diǎn)開展了金標(biāo)快速試紙條對乙肝表面抗原快速篩查，篩查合格獻(xiàn)血者采血后留取標(biāo)本到檢驗(yàn)科進(jìn)行兩遍酶聯(lián)免疫(ELISA)及病毒核酸(NAT)平行檢測，合格的血液入庫使用，不合格的血液做報(bào)廢處理。但血液通過實(shí)驗(yàn)室檢測后還存在一些HBsAg漏檢.筆者通過調(diào)查分析街頭金標(biāo)法快速檢測結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室重復(fù)金標(biāo)法結(jié)果之間差異，了解HBsAg產(chǎn)生漏撿的原因，采取有效措施降低血液報(bào)廢。

1 材料與方法

1.1 設(shè)備與試劑 加樣系統(tǒng)及酶免分析系統(tǒng)為Genesis RSP150(瑞士TECEN公司)和BEPIII(德國貝靈)。洗板機(jī)為美國BIOTEK公司及瑞士帝肯公司。金標(biāo)法快速檢測試劑為北京萬泰生物技術(shù)有限公司，HBsAg ELISA分別為北京萬泰生物技術(shù)有限公司(批號為B20141235及英科新創(chuàng)(廈門)科技術(shù)有限公司(批號為2014095123)，NAT為美國諾華公司(批號為107734)，試劑批號均在有效期內(nèi)使用。

1.2 標(biāo)本來源 2015年1～7月份各采血點(diǎn)經(jīng)金標(biāo)法快速檢測HBsAg陰性血液標(biāo)本57 508份。

1.3 方法 金標(biāo)法快速檢測的57 508份陰性血液標(biāo)本，3 000 r/min離心10 min，分離血清，用ELISA法和NAT法進(jìn)行初、復(fù)檢。當(dāng)ELISA法和NAT法測定的S/CO≥1時(shí)，標(biāo)本確定為陽性，再將確定為陽性的標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室再次按街頭初篩方法用金標(biāo)快速試紙條重復(fù)實(shí)驗(yàn)。應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié) 果

金標(biāo)法快速檢測的57 508份陰性血液標(biāo)本經(jīng)ELISA法和NAT法初、復(fù)檢，最終確定陽性標(biāo)本407份，金標(biāo)法快速檢測的總漏檢率為0.71%(407/57 508)，其中S/CO值在1.0～5.0的有15份，占總漏檢標(biāo)本的3.7%(15/407)；S/CO值在5.1～10.0的有7份，占總漏檢標(biāo)本的1.7%(7/407)；S/CO值在10.1～20.0的有18份，占總漏檢標(biāo)本的4.4%(18/407)；S/CO值在20.0以上的有367份，占總漏檢標(biāo)本的90.2%(367/407)。

407份經(jīng)復(fù)檢確定陽性的標(biāo)本，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室重復(fù)金標(biāo)法檢測S/CO值在1.0～5.0的未檢出，S/CO值在5.1～10.0的2份，S/CO值在10.1～20.0的9份，S/CO值在20以上的349份，共360份檢測為陽性標(biāo)本，漏檢數(shù)47份，占總漏檢數(shù)的11.5%(47/407)，改為ELISA法和NAT法檢測47份標(biāo)本仍為陽性。

3 討論

由于街頭金標(biāo)法快速檢測受工作環(huán)境、溫度、時(shí)間、工作人員操作不當(dāng)?shù)纫蛩赜绊?，與實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較出現(xiàn)一些漏檢。金標(biāo)法與ELISA法的靈敏度有差別，金標(biāo)法的靈敏度稍低于ELISA法[1]。金標(biāo)法的靈敏度可達(dá)1 ng/mL，而ELISA試劑的靈敏度可達(dá)0.5 ng/mL可能是造成ELISA法檢測弱陽性的標(biāo)本金標(biāo)檢測陰性的主要原因。金標(biāo)法還存在一個(gè)重要問題，就是層析的速度，如果層析過快，HBsAg與試紙條上的HBsAb未能結(jié)合，就越過了檢測線，或因?qū)游鲞^快，導(dǎo)致對照線很快顯示，弱陽性樣本還未顯示，這也可能會導(dǎo)致漏檢。

研究結(jié)果顯示，407份經(jīng)復(fù)檢確定為陽性的標(biāo)本，S/CO值在1.0～5.0之間金標(biāo)法未檢出，S/CO值在5.1～10.0的2份，漏檢率90.9%(20/22)，說明漏檢集中在弱陽性標(biāo)本上。若操作不規(guī)范、檢測溫度過低、標(biāo)本的HBsAg滴度過低或過高均易出現(xiàn)漏檢[2]。而S/CO值在20以上的有349份，漏檢率為7.9%(18/367)。高值陽性漏檢主要原因在于人為因素多見?，F(xiàn)將原因總結(jié)有以下幾點(diǎn)：①試劑局限性；②人為因素，操作人員未能按照試劑說明書要求的時(shí)間報(bào)告結(jié)果，人為縮短了檢測時(shí)間，末梢血留取操作不當(dāng)導(dǎo)致血樣過少，從而造成檢測線不明顯的弱陽性遺漏而誤判；③試劑儲存方面，試劑要現(xiàn)取現(xiàn)用，將未用完的試劑條及時(shí)密封保存，防止受潮而產(chǎn)生漏檢；④檢測的環(huán)境因素，高溫或街頭無償獻(xiàn)血時(shí)獻(xiàn)血者人數(shù)比較集中，有些獻(xiàn)血者時(shí)間緊急，不時(shí)催促工作人員時(shí)，操作人員未能按照試劑說明書要求的時(shí)間報(bào)告結(jié)果，人為縮短了檢測時(shí)間，從而造成檢測線不明顯的弱陽性的誤判；⑤少數(shù)標(biāo)本可能存在乙型肝炎病毒(HBV)變異或亞而不易檢出。

總之，加強(qiáng)采血前HBsAg初篩工作，特別是工作人員操作技能的培訓(xùn)，人員責(zé)任心等方面進(jìn)行全面質(zhì)量管理，嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，可以進(jìn)一步降低HBsAg復(fù)檢陽性率，從而避免輸血與減少HBsAg攜帶者傳播疾病的發(fā)生，確保臨床輸血安全。在今后工作中，我們可以在血液安全和篩選效率之間找到一個(gè)平衡，盡量減少病毒感染引發(fā)的輸血安全事故。

[1] 張翠,馬曉云.金標(biāo)法檢測乙肝病毒表面抗原漏檢原因分析[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床,2011,22(3):107-107.

[2] 楊俠宇.金標(biāo)法檢測乙型肝炎表面抗原漏檢原因分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(10):1279-1280.

[3] 楊京民,陳軍.金標(biāo)法檢測HBsAg漏檢原因分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(21):2553-2553.

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1003—6350（2016）24—4115—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.24.055

2016-03-22)

黃乙清。E-mail：527277239@qq.com