膠體金與酶聯(lián)免疫法檢測(cè)乙型肝炎表面抗原效果對(duì)比探討

陳永鳳

【摘 要】 目的：在乙肝表面抗原檢測(cè)操作中分別實(shí)踐膠體金法、酶聯(lián)免疫法的效果對(duì)比探究。方法：選取2015年6月-2016年4月因患乙型肝炎而入本院施行檢測(cè)及相應(yīng)診治的病人75例，分別膠體金檢測(cè)試紙條與酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定對(duì)其實(shí)施表面抗原的同期檢測(cè)以及集中性研討，評(píng)估兩種檢測(cè)法的效果情況。結(jié)果：膠體金法檢出陽(yáng)性病例分別是54例，占比為72.00%。酶聯(lián)免疫法檢出陽(yáng)性病例是52例，占69.33%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)及x2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，兩種檢測(cè)法的HbsAg陽(yáng)性數(shù)據(jù)組間差異不顯著（P>0.05）。結(jié)論：膠體金法、酶聯(lián)免疫法使用在HbsAg測(cè)定操作中時(shí)，各具獨(dú)特運(yùn)用優(yōu)勢(shì)以及缺點(diǎn)，檢測(cè)工作者需按照具體工作選用適宜的檢測(cè)方法。

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎 表面抗原 酶聯(lián)免疫法 膠體金法 檢測(cè)效果

臨床中多選用酶聯(lián)免疫法法對(duì)乙肝病人全血施行表面抗原的檢測(cè)操作，此方法以酶聯(lián)免疫為基礎(chǔ)開(kāi)展吸附性實(shí)驗(yàn)，能較準(zhǔn)確、較快地檢測(cè)出HbsAg陽(yáng)性現(xiàn)象，其測(cè)定靈敏性、特異性都得到醫(yī)學(xué)界的普遍認(rèn)可[1]。伴隨膠體金檢測(cè)法的改良進(jìn)步，一些醫(yī)院逐步將其引進(jìn)大批量HbsAg疑似群體的篩查實(shí)踐當(dāng)中，并得到基層醫(yī)務(wù)工作者相應(yīng)程度的關(guān)注[2]。為探析兩種檢測(cè)試驗(yàn)操作法的具體效果，本文抽選2015年6月-2016年6月因患乙型肝炎而入本院施行檢測(cè)及相應(yīng)診治的病人75例，分別膠體金檢測(cè)試紙條與酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定對(duì)其實(shí)施表面抗原的同期檢測(cè)以及集中性研討，現(xiàn)將此次調(diào)研情況闡述如下：

1 對(duì)象及方法

1.1 調(diào)研對(duì)象

以2015年6月-2016年4月因患乙型肝炎而入本院施行檢測(cè)及相應(yīng)診治的病人75例為研討對(duì)象，含有41例男性、34例女性，年齡介于21-78歲間，平均（48.4±11.27）歲。

1.2 方法

1.2.1 使用試劑

選用膠體金檢測(cè)試紙條產(chǎn)自艾博生物醫(yī)藥（杭州）有限公司；ELISA法選用的試劑產(chǎn)自上?？迫A生物工程股份有限公司。

1.2.2 方法

先取全部病人的全血為檢測(cè)樣本，測(cè)定乙型肝炎的標(biāo)志物，取樣當(dāng)日開(kāi)展檢測(cè)操作，如果當(dāng)日難以及時(shí)檢測(cè)，要實(shí)施血液血清的分離處理，再將其放在冰箱中冷凍封存，次日再行測(cè)定。兩法都依照試劑操作規(guī)程以及說(shuō)明指南展開(kāi)嚴(yán)格檢測(cè)。①膠體金法。取出2滴病人全血，放于試紙條的箭頭區(qū)之上，再加滴適量推進(jìn)液， 待30分鐘后讀取檢驗(yàn)的結(jié)果，如果箭頭區(qū)僅有1條紫紅色線，表示是陰性病例；如果箭頭區(qū)出現(xiàn)了2條紫紅色線，表示是陽(yáng)性病例；箭頭區(qū)沒(méi)有紫紅色線，表示操作無(wú)效。②酶聯(lián)免疫法。規(guī)范檢測(cè)程序完后，運(yùn)用LIS系統(tǒng)對(duì)所得結(jié)果實(shí)施S/C值換算，如果樣本S/C值等于或超出1.0，表示是陽(yáng)性病例；如果樣本S/C值小于1.0，表示是陰性病例。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用SPSS21.0版統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本次所有相關(guān)的調(diào)查數(shù)據(jù)予以整合處理，當(dāng)中，（x±s）表示計(jì)量數(shù)據(jù)，（n/%）表示計(jì)數(shù)資料；運(yùn)用x2檢驗(yàn)組間計(jì)數(shù)資料的對(duì)比，計(jì)量資料比較通過(guò)t檢驗(yàn)， HbsAg陽(yáng)性數(shù)據(jù)組間對(duì)比差異顯著時(shí)表示為P<0.05；對(duì)比差異不顯著時(shí)表示為P>0.05。

2 結(jié)果

膠體金法、酶聯(lián)免疫法測(cè)定75例乙肝病人表面抗原的具體數(shù)據(jù)如表1所示，從表可知，膠體金法檢出陽(yáng)性病例是54例，占比為72.00%。ELISA法檢出陽(yáng)性病例是52例，占69.33%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)及x2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，兩種檢測(cè)法的HbsAg陽(yáng)性數(shù)據(jù)組間差異不顯著（x2=1.2273，P=0.2679；x2=0.1286，P=0.7198；P>0.05）。

3 討論

乙肝病毒屬于嗜肝性病毒，其侵入人類機(jī)體后會(huì)誘發(fā)感染疾病，例如，肝臟細(xì)胞纖維化或壞死等。通常來(lái)講，乙肝分成急性、慢性兩大種類，都由血液途徑進(jìn)行蔓延傳播[3]。為選取優(yōu)質(zhì)、科學(xué)的方式展開(kāi)表面抗原的準(zhǔn)確測(cè)定，臨床中將酶聯(lián)免疫法推舉為乙肝病毒的測(cè)定結(jié)果推薦為“金標(biāo)準(zhǔn)”，并據(jù)此鑒別其他不同檢測(cè)法的實(shí)踐操作效果。評(píng)估酶聯(lián)免疫法對(duì)HbsAg實(shí)施測(cè)定流程中的特性情況，發(fā)現(xiàn)此法具備高靈敏度、高特異度、強(qiáng)操作性，并且能施行半定量、定量操作。然而，酶聯(lián)免疫法檢出流程需要加樣控制，使反應(yīng)時(shí)間、速度受相應(yīng)程度的限制性，且步驟較繁瑣，耗時(shí)較長(zhǎng)，基層HbsAg初步篩查中適用性不高。

膠體金受到鞣酸、白磷等的反應(yīng)作用，還原形成聚變性微小顆粒及帶負(fù)電疏水膠液體，能和蛋白質(zhì)作出結(jié)合反應(yīng)。另外，膠體金不會(huì)干擾蛋白質(zhì)原有的生物屬性。將膠體金法引入HbsAg大批量篩查檢測(cè)當(dāng)中，能快捷、便易、簡(jiǎn)單地開(kāi)展檢測(cè)實(shí)踐工作，且讀取結(jié)果相當(dāng)方便，檢測(cè)者用肉眼即可視查出具體結(jié)果。但是，膠體金的試劑條用于HbsAg篩查時(shí)也有不足之處，此法顯色靈敏度有待提升，在高濃度病毒標(biāo)志物中能較快顯色，但若感染程度偏低則會(huì)伴有假陰性測(cè)定現(xiàn)象。鑒于此，膠體金法不可完全替代ELISE法在血液乙肝篩查領(lǐng)域的位置。

此調(diào)研活動(dòng)中表1指出，膠體金法檢出陽(yáng)性病例是54例，占比為72.00%。酶聯(lián)免疫法檢出陽(yáng)性病例是52例，占比69.33%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)及x2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，兩種檢測(cè)法的HbsAg陽(yáng)性數(shù)據(jù)組間差異不顯著（P>0.05）。

綜上報(bào)告知， 膠體金法、酶聯(lián)免疫法使用在HbsAg測(cè)定操作流程中，各具自身運(yùn)用優(yōu)勢(shì)以及缺點(diǎn)，需按照具體檢測(cè)工作選用適宜的技術(shù)方法。

參考文獻(xiàn)

[1] 李國(guó)軍，喻一奇，范平，等.乙型肝炎表面抗原水平對(duì)核苷（酸）類似物序貫聯(lián)合聚乙二醇干擾素α-2a治療慢性乙型肝炎患者的療效預(yù)測(cè)[J].中華傳染病雜志，2014，32（2）：100-106.

[2] 陳向敏，張躍進(jìn)，田曉娟，等.表達(dá)乙型肝炎表面抗原及前 S2蛋白120～146片段重組酵母菌的構(gòu)建及全菌體免疫效應(yīng)評(píng)價(jià)[J].中華傳染病雜志，2014，32（11）：660-665.

[3] 何敏，羅福東.化學(xué)發(fā)光免疫分析與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清 HBsAg 及 HBsAb 的結(jié)果比較[J].廣東醫(yī)學(xué)，2014，35（12）：1900-1901.