酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的應用

董麗

[摘要] 目的 探討酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的應用價值。 方法 選取2018年1～7月我院健康體檢人員血液標本780份，所有標本均采用真空管采集。運用酶聯(lián)免疫法與膠體金法檢測所有血液標本，統(tǒng)計分析酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的陽性情況，并對比酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的應用價值。 結(jié)果 酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的陽性率9.23%（72/780）、8.72%（68/780）之間差異不顯著（P>0.05）。將常規(guī)法設定為酶聯(lián)免疫法，膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的敏感度為72.22%（52/72），特異度為97.74%（692/708），準確度為95.38%（744/780），陽性預測值為76.47%（52/68），陰性預測值為97.19%（692/712）。 結(jié)論 酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的應用價值相當，臨床應該依據(jù)實際情況合理選擇檢測方法。

[關(guān)鍵詞] 酶聯(lián)免疫法;膠體金法;乙肝;表面抗原

[中圖分類號] R446.6? ? ? ? ? [文獻標識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2018）34-0117-03

在乙肝血清標志檢查中，乙肝表面抗原是一項重要指標，指乙肝病毒外殼蛋白，其自身沒有傳染性存在，通常情況下和乙肝病毒共同存在[1]。血液傳播感染是乙肝病毒的主要傳播途徑。因此，為對血液傳播風險進行有效控制，需要檢驗血樣質(zhì)量，確定血樣中乙肝表面抗原存在情況[2]?，F(xiàn)階段，酶聯(lián)免疫法與膠體金法是臨床檢測乙肝表面抗原過程中通常采用的方法[3]。本研究比較酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的應用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取2018年1～7月我院健康體檢人員血液標本780份，所有標本均采用真空管采集，所有人員均積極配合。其中男400例，女380例，分別占總數(shù)的51.3%、48.7%。年齡18～78歲，平均（48.2±8.3）歲。在年齡分布情況方面，18～30歲201例，31～60歲167例，61～78歲412例，分別占總數(shù)的25.8%、21.4%、52.8%。

1.2 方法

1.2.1 儀器和試劑? 乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（英科新創(chuàng)科技有限公司，批號：S10910049）。

1.2.2 檢測方法? 運用酶聯(lián)免疫法與膠體金法檢測所有血液標本，（1）酶聯(lián)免疫法：用加樣器在相應孔中加入陽性與陰性對照血清、待檢標本、質(zhì)控品，然后將酶標抗體加入到每孔中?；靹蚝笤?7℃的溫度下進行60 min的孵育，洗板后將底物加入其中，在37℃的溫度下進行15 min的避光反應，然后將終止液加入其中，將反應完成。在此過程中嚴格依據(jù)乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（英科新創(chuàng)科技有限公司，批號：S10910049）說明書，對結(jié)果進行自動判讀;（2）膠體金法：向試紙條箭頭區(qū)中加入60 μL待檢標本，進行10 min的靜置后對結(jié)果進行判定，在此過程中應用乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒（英科新創(chuàng)科技有限公司，批號：S10910049）。陽性標準為有2條紫紅線出現(xiàn)在檢測線與對照線位置，陰性標準為有1條紫紅線出現(xiàn)在檢測線與對照線位置。

1.3 觀察指標

計算酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的陽性情況。同時，對比酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的應用價值，靈敏度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%;特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）×100%;準確度=（真陽性+真陰性）/（真陽性+假陽性+假陰性+真陰性）×100%;陽性預測值=真陽性/（真陽性+假陽性）×100%;陰性預測值=真陰性/（真陰性+假陰性）×100%[4]。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS21.0統(tǒng)計學軟件統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗。檢驗水準α=0.05，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的陽性情況比較

酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的陽性率分別為9.23%（72/780）、8.72%（68/780）之間差異不顯著（P>0.05），見表1。

2.2 酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的應用價值比較

將常規(guī)法設定為酶聯(lián)免疫法，膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的敏感度為72.22%（52/72），特異度為97.74%（692/708），準確度為95.38%（744/780），陽性預測值為76.47%（52/68），陰性預測值為97.19%（692/712），見表2。

3 討論

在乙肝表面抗原的檢測中，酶聯(lián)免疫法與膠體金法是臨床通常采用的方法，二者具有顯著不同的檢測原理，相對來說，酶聯(lián)免疫法屬于一種試劑檢測形式，相對極為特殊，是一種新型免疫測定技術(shù)，形成基礎(chǔ)為免疫酶技術(shù)。檢測途徑主要為結(jié)合酶復合物和抗體，然后充分利用試劑顯示的顏色[5]。酶聯(lián)免疫法具有較高的敏感性、特異性，但是具有較為繁雜的操作。同時，在檢測過程中，很多因素均會對結(jié)果造成不良影響。此外，對檢測人員及設備的要求也較高[6]。而膠體金主要是一種聚合顆粒，合成途徑為還原劑等物質(zhì)和氯金酸發(fā)生反應，靜電會對該種顆粒造成影響，使其處于膠體狀態(tài)，同時穩(wěn)定性較強。但是，膠體金在弱堿狀況下帶負電荷，同時結(jié)合蛋白質(zhì)分子正電荷基團[7]。因此，膠體金的特征為具有較高的敏感性、穩(wěn)定性，因此具有直觀的結(jié)果，且設備、試劑沒有特殊性，具有較為簡便快捷的操作[8]。

相關(guān)醫(yī)學研究表明[9-12]，在血樣標本2040份中，186份酶聯(lián)免疫法檢測陽性，179份膠體金法檢測陽性，兩種方法的檢測陽性率分別為9.11%、8.77%。因此認為和膠體金法相比，酶聯(lián)免疫法檢測乙肝表面抗原的敏感度較高。相關(guān)醫(yī)學研究表明[13-14]，在大規(guī)模篩檢乙肝病毒攜帶的過程中，可以運用膠體金法快速篩查血樣，從而促進檢測效率的提升、初篩時間的縮短。而在二次篩檢一些膠體金法檢測陽性的過程中，可以運用酶聯(lián)免疫法，從而使精準的結(jié)果得到切實有效的保證。相關(guān)醫(yī)學研究也表明[15，16]，酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的敏感度相當，臨床在快速篩查患者血樣的過程中可以運用膠體金法，從而促進檢驗效率的提升，而在二次篩選血樣結(jié)果陽性的過程中可以運用酶聯(lián)免疫法，從而促進檢查精準度的提升。

本研究結(jié)果表明，酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的陽性率9.23%（72/780）、8.72%（68/780）之間差異不顯著（P>0.05）。將常規(guī)法設定為酶聯(lián)免疫法，膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的敏感度為72.22%（52/72），特異度97.74%（692/708），準確度95.38%（744/780），陽性預測值76.47%（52/68），陰性預測值97.19%（692/712），和上述相關(guān)醫(yī)學研究結(jié)果一致。

總之，酶聯(lián)免疫法與膠體金法在乙肝表面抗原檢測中的應用價值相當，臨床應該依據(jù)實際情況合理選擇檢測方法。

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（收稿日期：2018-09-03）