頂空氣相色譜法在中藥檢測(cè)中的應(yīng)用分析

孫麗麗

哈藥集團(tuán)世一堂制藥廠 150000

頂空氣相色譜法在中藥檢測(cè)中的應(yīng)用分析

孫麗麗

哈藥集團(tuán)世一堂制藥廠 150000

本文主要對(duì)頂空氣相色譜法在重要檢測(cè)中的實(shí)際應(yīng)用進(jìn)行分析，并探討頂空氣相色譜法在測(cè)定中藥材中揮發(fā)性成分方面的相關(guān)研究，以準(zhǔn)確把握頂空氣相色譜法的實(shí)際作用，僅供醫(yī)藥行業(yè)人士參考。

頂空氣相色譜法；中藥檢測(cè)；應(yīng)用

頂空氣相色譜法是當(dāng)前醫(yī)藥學(xué)中比較常見(jiàn)的一種儀器分析方式，其在實(shí)際應(yīng)用中具有高選擇性，分析速度較快，檢測(cè)靈敏度較高，有效的減少樣品基質(zhì)對(duì)分析的干擾，在重要檢測(cè)中具有良好的應(yīng)用價(jià)值。因此加大力度探討頂空氣相色譜法在中藥檢測(cè)中的實(shí)際應(yīng)用，為中藥安全提供可靠的理論依據(jù)和測(cè)定方式。

1 頂空氣相色譜法

頂空氣相色譜法也稱作液上氣相色譜分析，是一種現(xiàn)代化的聯(lián)合操作技術(shù)，在實(shí)際應(yīng)用中，當(dāng)檢測(cè)條件和檢測(cè)溫度一定時(shí)，進(jìn)樣針對(duì)固體、氣體和液體進(jìn)行萃取吸附，并在氣相色譜分析儀上進(jìn)行脫附注射，具體的萃取過(guò)程基于固相微萃取平臺(tái)展開(kāi)操作。頂空氣相色譜法具有高柱效、高選擇性和高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)，分析速度較快，適應(yīng)范圍廣泛，但其在實(shí)際應(yīng)用中也存在一定不足，其僅適用于可揮發(fā)且熱穩(wěn)定的樣品。在一定條件下，頂空氣相色譜法能夠?qū)崿F(xiàn)上下兩相之間的平衡分配，進(jìn)而對(duì)氣相成分進(jìn)行分析和測(cè)定，達(dá)到檢測(cè)凝聚相中部分組成。頂空分析在氣相色譜法中具有良好的應(yīng)用效果，能夠有效的減少樣品基質(zhì)對(duì)分析結(jié)果的干擾。通常情況下，在中藥檢測(cè)中，頂空氣相色譜法的應(yīng)用，對(duì)平衡溫度、平衡時(shí)間、加壓時(shí)間和取樣時(shí)間等都有著嚴(yán)格的要求。

2 頂空氣相色譜法在中藥安全性檢測(cè)中的實(shí)際應(yīng)用

當(dāng)前社會(huì)科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，中藥制劑也更具現(xiàn)代化特征，藥品提取方式以及純化手段不斷發(fā)展應(yīng)用，但提取溶劑所帶來(lái)的殘留導(dǎo)致中藥藥品面臨著嚴(yán)峻的安全問(wèn)題。尤其是在中藥材加工過(guò)程中，部分不法商家為謀取最大利益，以硫熏蒸的方式保持藥材外觀鮮亮，但藥材內(nèi)部殘留大量的硫，藥物存在嚴(yán)重的安全隱患，嚴(yán)重威脅著社會(huì)群體的用藥安全。

2.1 頂空氣相色譜法測(cè)定大孔吸附樹(shù)脂的殘留物

打孔吸附樹(shù)脂是一類有機(jī)高聚物吸附劑，屬于一種分離材料，實(shí)現(xiàn)吸附性與分子篩選性原理的有機(jī)結(jié)合，其物理化學(xué)穩(wěn)定性較高，吸附容量較大，吸附速度快，便于再生處理，使用周期較長(zhǎng)。但大孔樹(shù)脂是由苯乙烯、二苯乙烯及致孔劑懸浮聚合，最終去孔制劑而成。在實(shí)際合成過(guò)程中，孔隙內(nèi)部存在一定量的未聚合單體物質(zhì)和致孔劑等殘留物，影響用藥安全，因此在中藥檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)當(dāng)對(duì)藥品中的未聚合單體物質(zhì)等殘留物及裂解產(chǎn)物進(jìn)行限量檢查，這一操作過(guò)程中頂空氣相色譜法是最佳的檢測(cè)方式，具有精準(zhǔn)可靠的檢測(cè)效果。

王焱等研究人員通過(guò)溶劑提取方式和頂空法開(kāi)展中藥檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，以乙苯為內(nèi)標(biāo)，對(duì)中藥復(fù)方制劑加參片中可能村仔的甲苯、二甲苯、苯乙烯等有機(jī)殘留物進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果顯示，HP-INNOWAX色譜柱與弱極性HP-5色譜柱相比，具有良好的應(yīng)用效果，能夠同時(shí)對(duì)8個(gè)殘留物進(jìn)行有序分離，通過(guò)對(duì)頂空法的合理運(yùn)用，最大程度上避免溶劑及雜質(zhì)峰對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，并降低了難揮發(fā)性物質(zhì)所造成的污染，提高了中藥樣品的處理效果。

姚干等研究人員采用弱極性HP-5石英毛細(xì)管柱為中藥檢測(cè)方式，將頂空溫度控制在85℃，選用二甲亞砜作為實(shí)驗(yàn)溶劑，對(duì)大孔吸附數(shù)值分離純化后的梔子提取物中可能含有的苯、甲苯等殘留物進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定，并以極性石英毛細(xì)管柱配合 1%的甲醇溶劑對(duì)梔子提取物中的二甲苯、苯乙烯等殘留物進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定結(jié)果顯示，中藥藥品中未檢測(cè)出殘留物。

2.2 空氣相色譜法在中藥殘留溶劑檢測(cè)中的應(yīng)用

張宏等測(cè)定水飛薊提取物中的正己烷和醋酸乙酯的殘留量。試驗(yàn)采用FFAT(2-硝基對(duì)苯二甲酸封端的聚乙二醇20M柱)石英毛細(xì)管柱，程序升溫方式，頂空條件為平衡溫度為130℃，平衡時(shí)間30min，測(cè)定結(jié)果表明水飛薊提取物中兩種溶劑殘留量均符合要求。

吳秀蘭等采用HP-5毛細(xì)管柱，柱溫40℃，ECD檢測(cè)器，頂空瓶加熱溫度45℃，平衡時(shí)間50 min，以0.05 mol／L氫氧化鈉水溶液為溶解介質(zhì)，測(cè)定中藥一類新藥大黃酸原料中三氯甲烷及其溶劑雜質(zhì)二氯甲烷、l，2-二氯乙烷與四氯化碳的殘留量。結(jié)果表明：測(cè)得各組分在所考查的濃度范圍內(nèi)具有良好線性，三氯甲烷、二氯甲烷、l，2-二氯乙烷與四氯化碳的最低檢出濃度分別為 3.0、24.0、7.5、0.2μ/L。三批大黃酸原料樣品測(cè)定結(jié)果符合要求。

鄭金琪等采用HP-INNOWax毛細(xì)管柱，程序升溫方式，頂空瓶加熱溫度105 o C，平衡時(shí)間30min，以二甲基甲酰胺為溶劑，測(cè)定紫杉醇原料藥中石油醚(60-90℃)、丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、甲苯和吡啶的殘留量。結(jié)果表明，8種有機(jī)溶劑完全分離。結(jié)果3批樣品均未檢出丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯和甲苯，僅檢出微量石油醚(60-90℃)、甲醇、二氯甲烷和吡啶，各溶劑殘留量均符合規(guī)定。

2.3 空氣相色譜法在中藥外源性雜質(zhì)引入的檢測(cè)

廖遠(yuǎn)熹等采用靜態(tài)頂空氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)鑒別市售柴胡是否經(jīng)硫黃熏制，試驗(yàn)采用HP-5MS毛細(xì)管色譜柱，程序升溫方式，以氦氣為載氣，頂空溫度120℃，預(yù)熱30min，質(zhì)譜條件為EI電離方式，電子能量70eV，離子阱150℃，質(zhì)量掃描范圍41-500ainu。結(jié)果表明：與未經(jīng)硫黃熏制的陰性樣品比較，9種市售柴胡中有7種經(jīng)過(guò)了不同程度的熏制，該方法可廣泛應(yīng)用于中藥材硫黃的檢出。

3 空氣相色譜法測(cè)定中藥材中揮發(fā)性成分

陳建偉等采用HP—17聚甲基苯基硅氧烷(含50%苯基)石英彈性毛細(xì)管柱，頂空溫度95℃，平衡5-10 min，用以鑒定牡丹皮中丹皮酚。結(jié)果表明，儲(chǔ)藏期對(duì)牡丹皮中揮發(fā)性成分丹皮酚含量影響較大，并可采用此方法對(duì)牡丹皮同屬芍藥根皮及與牡丹皮氣味相近的徐長(zhǎng)卿加以區(qū)分。

FangqiuGuo等采用頂空固相微萃取聯(lián)用氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)同科藥用植物白術(shù)及蒼術(shù)的揮發(fā)性成分進(jìn)行比較。試驗(yàn)采用聚二甲基硅氧烷毛細(xì)管柱，提取條件以總峰面積為指標(biāo)進(jìn)行優(yōu)化，試驗(yàn)條件為提取溫度70℃，平衡時(shí)間30min，萃取時(shí)間30min，解吸附時(shí)間4min。試驗(yàn)結(jié)果表明，白術(shù)中36個(gè)成分占了總峰面積的 90.72%，其中蒼術(shù)酮含量最高，達(dá)到 40.12%；蒼術(shù)中 56個(gè)成分占了總峰面積的 90.38%，其中 eudesma-4(14)，ll-diene最高，達(dá)到16.49%；研究還表明共有23個(gè)成分是兩種植物共有的。此方法可用于比較白術(shù)與蒼術(shù)的異同。

隨著中藥的飛速發(fā)展，中藥現(xiàn)代化的實(shí)施，大孔吸附樹(shù)脂也越來(lái)越多應(yīng)用于中藥提取的分離純化。為保證用藥安全，控制大孔樹(shù)脂殘留物及殘留溶劑將是一項(xiàng)重中之重的工作，綜上所述，目前大部分藥品及原料藥中未檢出殘留物，但也有少量殘留物檢出，檢出的殘留應(yīng)符合ICH《藥品注冊(cè)的國(guó)際技術(shù)要求》規(guī)定。

4 結(jié)束語(yǔ)

總而言之，頂空氣相色譜法在中藥檢測(cè)中具有良好的應(yīng)用價(jià)值，其能夠有效的減少對(duì)毛細(xì)管色譜柱的污染，廣泛應(yīng)用于大孔吸附樹(shù)脂殘留物及溶劑殘留等中藥安全性檢查中，應(yīng)用效果明顯，去除樣品中難揮發(fā)性物質(zhì)的干擾，提高中藥安全性檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性，切實(shí)保障社會(huì)群體用藥安全。

[1]劉冰 頂空氣相色譜法在中藥檢測(cè)中的應(yīng)用[J].《天津藥學(xué)》2010, 22(4):54-57

[2]周麗麗，陸兔林 頂空氣相色譜法在中藥研究中的應(yīng)用[J].《宜春學(xué)院學(xué)報(bào)》, 2010, 32(12):4-5

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1672-5018（2016）11-233-01