芪玉三龍湯對(duì)肺癌移植瘤小鼠PI3K/Akt/mTOR通路PI3K、Akt、mTOR表達(dá)的影響

張星星，童佳兵，楊　程，王傳博，李澤庚

(1.湖北中醫(yī)藥大學(xué)，湖北 武漢　430065；2.國(guó)家中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)學(xué)科安徽中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)肺病學(xué)科，

安徽 合肥　230031；3.安徽省中醫(yī)藥科學(xué)院中醫(yī)呼吸病防治研究所，安徽 合肥　230038)

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芪玉三龍湯對(duì)肺癌移植瘤小鼠PI3K/Akt/mTOR通路PI3K、Akt、mTOR表達(dá)的影響

張星星1,2,3，童佳兵2,3，楊程2,3，王傳博2,3，李澤庚2,3

(1.湖北中醫(yī)藥大學(xué)，湖北 武漢430065；2.國(guó)家中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)學(xué)科安徽中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)肺病學(xué)科，

安徽 合肥230031；3.安徽省中醫(yī)藥科學(xué)院中醫(yī)呼吸病防治研究所，安徽 合肥230038)

[摘要]目的研究芪玉三龍湯對(duì)小鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)及對(duì)PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路調(diào)節(jié)的影響。方法采用Lewis肺癌細(xì)胞培養(yǎng)移植法復(fù)制肺癌荷瘤小鼠模型，荷瘤成功后隨機(jī)分為模型組，化學(xué)治療組，芪玉三龍湯高、中、低劑量組，聯(lián)合組；觀察小鼠的生存狀態(tài)，繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線，計(jì)算抑瘤率；Western blot法檢測(cè)荷瘤小鼠腫瘤組織PI3K、Akt、mTOR蛋白表達(dá)。結(jié)果芪玉三龍湯高劑量組、聯(lián)合組生存狀態(tài)優(yōu)于化學(xué)治療組；芪玉三龍湯對(duì)肺腫瘤具有溫和的抑制作用，其高劑量抑制腫瘤生長(zhǎng)作用較優(yōu)，但量效關(guān)系不明顯，其與順鉑聯(lián)用無(wú)明顯增效作用；芪玉三龍湯可以下調(diào)PI3K、Akt和mTOR表達(dá)水平，和順鉑聯(lián)用對(duì)下調(diào)關(guān)鍵分子Akt的表達(dá)具有明顯的協(xié)同作用。結(jié)論芪玉三龍湯對(duì)肺癌移植瘤的抑制作用可能與調(diào)控PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路關(guān)鍵分子有關(guān)，與化學(xué)治療藥聯(lián)用可協(xié)同下調(diào)關(guān)鍵蛋白Akt的表達(dá)。

[關(guān)鍵詞]芪玉三龍湯；肺癌；PI3K；Akt；mTOR；信號(hào)通路

原發(fā)性支氣管肺癌簡(jiǎn)稱肺癌，是呼吸系統(tǒng)最常見(jiàn)惡性腫瘤。腫瘤登記中心2014年發(fā)布的資料顯示，中國(guó)肺癌發(fā)病率及病死率居所有惡性腫瘤之首，且呈逐年上升趨勢(shì)。以非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)最常見(jiàn)，約占所有肺癌的85%[1]。雖然NSCLC的治療手段取得了一定的進(jìn)展，但其整體預(yù)后仍然很差，5年生存率不足15%[2]。中醫(yī)藥治療肺癌具有一定優(yōu)勢(shì)，能夠減少放射治療和化學(xué)治療后的毒性和不良反應(yīng)，改善患者的生存狀態(tài)。芪玉三龍湯處方來(lái)源于長(zhǎng)期臨床實(shí)踐，在國(guó)家級(jí)名老中醫(yī)韓明向教授臨床經(jīng)驗(yàn)方基礎(chǔ)上，由安徽中醫(yī)藥大學(xué)李澤庚教授研究團(tuán)隊(duì)多次優(yōu)化處方而成。為證實(shí)芪玉三龍湯對(duì)肺癌的治療作用，探討其作用機(jī)制，筆者采取Lewis肺癌細(xì)胞建立皮下移植瘤小鼠模型，研究芪玉三龍湯對(duì)荷瘤小鼠的抑瘤作用，并從調(diào)節(jié)PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路的角度對(duì)芪玉三龍湯的抗腫瘤機(jī)制進(jìn)行初步探討，為臨床運(yùn)用芪玉三龍湯治療肺癌提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料

1.1實(shí)驗(yàn)藥物芪玉三龍湯由黃芪、玉竹、天龍、地龍、龍葵、白花蛇舌草、薏苡仁、澤漆、莪術(shù)、川貝母組成，由安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院中藥房提供，常規(guī)水煎，水浴濃縮至生藥含量為4.024 g/mL，4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。注射用順鉑，由齊魯制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)為國(guó)藥準(zhǔn)字H37021357，每瓶20 mg，由安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院西藥房提供，用生理鹽水稀釋至0.367 mg/mL。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物近交系C57BL/6小鼠，48只，鼠齡6～8周，雄性，體質(zhì)量(20±2)g，動(dòng)物級(jí)別SPF級(jí)，購(gòu)自江蘇省常州卡文斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(蘇)2011-0003，飼養(yǎng)于安徽中醫(yī)藥大學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物房，室溫25 ℃，濕度70%，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)固體混合飼料喂養(yǎng)，小鼠自由采食和飲水。

1.3瘤株小鼠Lewis肺癌細(xì)胞株，購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞庫(kù)，培養(yǎng)于高糖達(dá)爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco’s modified eagle medium，DMEM)中，置于37 ℃、5% CO2飽和濕度培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

1.4主要實(shí)驗(yàn)試劑和儀器高糖DMEM：批號(hào) NAA1321，美國(guó) HyClone公司；兔抗鼠PI3K多克隆抗體(批號(hào) CJ44121)、兔抗鼠Akt多克隆抗體(批號(hào) CJ51250)、兔抗鼠mTOR多克隆抗體(批號(hào)CJ44121)：均購(gòu)自美國(guó)Bioworld公司；辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗(批號(hào)112971)：北京中杉公司；MCO-175 CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱：日本Sanyo公司；CKX41倒置顯微鏡：日本OLYMPUS公司；SW-CJ-IF超凈工作臺(tái)：江蘇蘇凈集團(tuán)安泰公司；EPS300型電泳儀、VE-186型轉(zhuǎn)膜儀：上海天能科技有限公司。

2方法

2.1模型復(fù)制取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期Lewis肺癌細(xì)胞，胰酶消化后離心收集細(xì)胞，1 800 r/min離心5 min，用無(wú)血清的高糖DMEM重懸洗滌并調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107/mL，用1 mL注射器吸取細(xì)胞懸液0.2 mL(含細(xì)胞數(shù)2×106)注射于C57BL/6小鼠左側(cè)腋部皮下，建立小鼠皮下移植瘤動(dòng)物模型。

2.2分組與給藥接種10 d后，檢測(cè)小鼠成瘤狀況，將符合要求的成瘤小鼠隨機(jī)分為模型組，化學(xué)治療組，芪玉三龍湯高、中、低劑量組，聯(lián)合組(芪玉三龍湯+順鉑)，每組8只。各組均在接種10 d后給藥。①模型組：0.02 mL/g生理鹽水灌胃10 d，并分別在第1、3、5天腹腔注射生理鹽水0.4 mL，下同。②化學(xué)治療組：0.02 mL/g生理鹽水灌胃10 d，并分別在第1、3、5天腹腔注射順鉑溶液0.4 mL(含有順鉑0.146 8 mg)。③芪玉三龍湯高劑量組：80.48 g/kg(相當(dāng)于臨床成人日用量的4倍)芪玉三龍湯灌胃10 d，并分別在第1、3、5天腹腔注射生理鹽水0.4 mL。④芪玉三龍湯中劑量組：40.24 g/kg(相當(dāng)于臨床成人日用量的2倍)芪玉三龍湯灌胃10 d，并分別在第1、3、5天腹腔注射生理鹽水0.4 mL。⑤芪玉三龍湯低劑量組：20.12 g/kg(相當(dāng)于臨床成人日用量的1倍)芪玉三龍湯灌胃10 d，并分別在第1、3、5天腹腔注射生理鹽水0.4 mL。⑥聯(lián)合組：80.48 g/kg(以芪玉三龍湯高劑量為聯(lián)合給藥劑量)芪玉三龍湯藥液灌胃10 d，并分別在第1、3、5天腹腔注射順鉑溶液0.4 mL。

2.3觀察指標(biāo)

2.3.1生存狀態(tài)觀察各組小鼠進(jìn)食、精神狀態(tài)、活動(dòng)狀態(tài)、消瘦程度、褪毛及死亡情況等。

2.3.2腫瘤生長(zhǎng)曲線的繪制分別于第1、5、8、10天用游標(biāo)卡尺測(cè)量小鼠皮下腫瘤的長(zhǎng)徑(a)和短徑(b)，計(jì)算腫瘤體積。計(jì)算公式為V=ab2/2，繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后以腫瘤體積為縱坐標(biāo)，給藥天數(shù)為橫坐標(biāo)繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線。

2.3.3抑瘤率給藥第11天處死小鼠，完整剝?nèi)∫覆科は履[瘤組織，精密電子天平稱質(zhì)量，分別計(jì)算各組抑瘤率，抑瘤率=(模型組平均腫瘤質(zhì)量-給藥組平均腫瘤質(zhì)量)/模型組平均腫瘤質(zhì)量×100%。

2.4Western Blot法檢測(cè)荷瘤小鼠腫瘤組織PI3K、Akt、mTOR蛋白表達(dá)采用Western Blot法檢測(cè)荷瘤小鼠腫瘤組織中蛋白的表達(dá)。提取各組小鼠腫瘤組織總蛋白樣品，經(jīng)SDS-PAGE凝膠電泳分離蛋白組分后，將蛋白轉(zhuǎn)印于PVDF膜上，5%脫脂奶粉封閉2 h，分別加入不同濃度的一抗(PI3K為1∶1 000，Akt為1∶500，mTOR為1∶500)，4 ℃孵育過(guò)夜，再加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗(1∶10 000稀釋)，室溫封閉2 h，電化學(xué)發(fā)光法顯色后膠片曝光并分析結(jié)果。

3結(jié)果

3.1各組小鼠生存狀態(tài)觀察模型復(fù)制10 d后，小鼠成瘤率為100%。模型復(fù)制后給藥第5天時(shí)，化學(xué)治療組小鼠進(jìn)食及精神狀態(tài)最差，活動(dòng)度開(kāi)始下降，毛色無(wú)光，之后活動(dòng)度持續(xù)下降，喜好扎堆，毛色漸漸干枯無(wú)光，呈縷狀，褪毛嚴(yán)重，反應(yīng)遲鈍，倦臥懶動(dòng)，極度消瘦。模型組小鼠第8天開(kāi)始活動(dòng)度有所下降，有扎堆現(xiàn)象，精神狀態(tài)一般，毛色暗淡無(wú)光，進(jìn)食尚佳。芪玉三龍湯高、中、低劑量組小鼠進(jìn)食一直尚好，精神狀態(tài)明顯優(yōu)于化學(xué)治療組，消瘦不明顯，有輕微褪毛現(xiàn)象，其中以高劑量組小鼠的生存狀態(tài)最好。聯(lián)合組小鼠的生存狀態(tài)較芪玉三龍湯組欠佳，但明顯優(yōu)于化學(xué)治療組，說(shuō)明芪玉三龍湯有改善化學(xué)治療小鼠生存狀態(tài)的作用。各組小鼠在取材前均未死亡。

3.2對(duì)荷瘤小鼠皮下移植瘤的生長(zhǎng)抑制作用

3.2.1腫瘤生長(zhǎng)曲線從腫瘤生長(zhǎng)曲線可以直觀地看出，芪玉三龍湯高、中、低劑量組和模型組的腫瘤生長(zhǎng)曲線高度重疊，化學(xué)治療組和聯(lián)合組的生長(zhǎng)曲線高度重合。見(jiàn)圖1。

3.2.2芪玉三龍湯對(duì)腫瘤生長(zhǎng)抑制作用的量效關(guān)系考察以模型組，芪玉三龍湯低、中、高劑量組為實(shí)驗(yàn)組合進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果顯示，4組的腫瘤體積和腫瘤質(zhì)量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(腫瘤體積：F(3，28)=0.537，P=0.230；腫瘤質(zhì)量：F(3，28)=2.268，P=1.954)，以芪玉三龍湯高劑量組的抑瘤率為最高。見(jiàn)表1。

3.2.3芪玉三龍湯和化學(xué)治療藥的交互作用以模型組、化學(xué)治療組、芪玉三龍湯高劑量組、聯(lián)合組為實(shí)驗(yàn)組合進(jìn)行兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析，結(jié)果提示，化學(xué)治療藥對(duì)腫瘤體積和腫瘤質(zhì)量的主效應(yīng)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，芪玉三龍湯對(duì)腫瘤體積和腫瘤質(zhì)量的主效應(yīng)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，兩者的交互作用也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。聯(lián)合組和化學(xué)治療組的抑瘤率相當(dāng)。見(jiàn)表2。結(jié)果提示，芪玉三龍湯對(duì)肺腫瘤具有溫和的抑制作用，其高劑量抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用較優(yōu)，但量效關(guān)系不明顯，尚不能認(rèn)為其與順鉑聯(lián)用有明顯的增效作用。

3.3對(duì)各組荷瘤小鼠腫瘤組織PI3K、Akt、mTOR蛋白表達(dá)的影響

±s)

組 別n芪玉三龍湯順鉑腫瘤體積/cm3腫瘤質(zhì)量/g抑瘤率/%模 型8不用不用4.32±1.545.45±0.940芪玉三龍湯低劑量84.21±1.974.82±1.4711.64芪玉三龍湯中劑量84.06±1.354.73±0.7113.17芪玉三龍湯高劑量8不用用3.72±1.124.15±1.05*23.86化學(xué)治療8用不用0.39±0.15*1.53±0.72*71.87聯(lián) 合8用用0.39±0.27#1.53±0.77#71.90

注：與模型組比較，*P<0.05；與芪玉三龍湯高劑量組比較，#P<0.05。

表2　芪玉三龍湯和順鉑聯(lián)用對(duì)腫瘤生長(zhǎng)抑制作用的兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析結(jié)果

3.3.1芪玉三龍湯的量效關(guān)系考察以模型組，芪玉三龍湯低、中、高劑量組為實(shí)驗(yàn)組合進(jìn)行單因素方差分析，結(jié)果顯示，4組PI3K、Akt和mTOR相對(duì)表達(dá)水平的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PI3K：F(3，28)=45.667，P=0.000；Akt：F(3，28)=223.596，P=0.000；mTOR：F(3，28)=1 132.479，P=0.000)，以芪玉三龍湯高劑量組PI3K、Akt和mTOR的相對(duì)表達(dá)水平為最低。結(jié)果見(jiàn)表3、圖2。

3.3.2芪玉三龍湯和順鉑的交互作用考察以模型組、芪玉三龍湯高劑量組、化學(xué)治療組和聯(lián)合組為實(shí)驗(yàn)組合進(jìn)行兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析，結(jié)果顯示，化學(xué)治療藥順鉑對(duì)Akt和mTOR表達(dá)水平的主效應(yīng)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，對(duì)PI3K表達(dá)水平的主效應(yīng)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，芪玉三龍湯對(duì)PI3K、Akt和mTOR表達(dá)水平的主效應(yīng)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，芪玉三龍湯和順鉑對(duì)PI3K、Akt和mTOR表達(dá)水平的交互作用均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4和圖2。結(jié)果提示，芪玉三龍湯和順鉑對(duì)下調(diào)Akt的表達(dá)具有明顯的協(xié)同作用，對(duì)下調(diào)PI3K和mTOR的表達(dá)無(wú)明顯協(xié)同作用。

±s)

注：與模型組比較，*P<0.05；與芪玉三龍湯低劑量組比較，#P<0.05；與芪玉三龍湯中劑量組比較，△P<0.05；與芪玉三龍湯高劑量組比較，□P<0.05；與化學(xué)治療組比較，◇P<0.05。

表4　芪玉三龍湯和順鉑聯(lián)用對(duì)PI3K、Akt、mTOR影響的兩因素析因設(shè)計(jì)的方差分析結(jié)果

注：1.模型組；2.化學(xué)治療組；3.聯(lián)合組；4.芪玉三龍湯低劑量組；5.芪玉三龍湯中劑量組；6.芪玉三龍湯高劑量組。

圖2各組腫瘤組織PI3K、Akt和mTOR蛋白表達(dá)水平比較(Western blot法)

4討論

肺癌屬于中醫(yī)學(xué)的“肺積”“息賁”“咳嗽”等范疇[3]。現(xiàn)多認(rèn)為其發(fā)生是在臟腑正氣虧虛的基礎(chǔ)上，外感六淫邪毒，內(nèi)傷飲食情志，肺之功能失常，導(dǎo)致氣滯、血瘀、痰凝、毒聚等病理因素作用于肺，日久形成肺部有形積塊。芪玉三龍湯由黃芪、玉竹、天龍、地龍、龍葵、白花蛇舌草、薏苡仁、澤漆、莪術(shù)、川貝母組成。方中黃芪補(bǔ)肺益氣，龍葵解毒抗癌，共為君藥；天龍、地龍、澤漆解毒消積、活血散結(jié)，與黃芪相須為臣；白花蛇舌草清熱解毒、活血化瘀，莪術(shù)破血行氣、消積止痛，薏苡仁補(bǔ)益肺脾，玉竹養(yǎng)陰生津，共為佐藥，川貝母化痰潤(rùn)肺、消腫散結(jié)為使。肺癌發(fā)病本質(zhì)乃本虛標(biāo)實(shí)，肺氣虛損為本，血瘀、痰凝、毒聚為標(biāo)。以上諸藥合用，共奏益氣養(yǎng)陰、化痰祛瘀、解毒消積之功。

PI3K/Akt/mTOR通路是目前研究腫瘤發(fā)生發(fā)展的熱點(diǎn)，而且在肺癌組織中活化表達(dá)并成為肺癌治療的靶點(diǎn)之一[4]。PI3K作為該通路的起始因子，可被多種生長(zhǎng)因子激活，如表皮生長(zhǎng)因子受體[5]、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子[6]和人類表皮生長(zhǎng)因子受體2[7]，這些因子的突變可以引起該通路的激活而調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的生命活動(dòng)，包括細(xì)胞生存、增殖和分化[8]。其過(guò)程主要是上述各種生長(zhǎng)因子作用于膜受體而使PI3K激活，然后在質(zhì)膜上產(chǎn)生第二信使PIP3，PIP3與細(xì)胞內(nèi)含有PH結(jié)構(gòu)域的信號(hào)蛋白Akt和PDK1結(jié)合，促使PDK1磷酸化Akt蛋白的Thr308位點(diǎn)，促使Akt活化，Akt還可通過(guò)PDK2對(duì)其Ser473位點(diǎn)的磷酸化而導(dǎo)致其活化[9-10]。Akt是PI3K/Akt信號(hào)通路的關(guān)鍵分子，PI3K激活的Akt可以磷酸化激活其下游多種靶蛋白如mTOR，從而誘導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)細(xì)胞存活，是重要的抗凋亡調(diào)節(jié)因子[11]。抑制該通路的活化可以促進(jìn)肺癌細(xì)胞凋亡[12]，有研究證明中藥亦可調(diào)控PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路，從而有效抑制肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)[13]。

本研究通過(guò)藥物干預(yù)肺癌皮下移植瘤模型，觀察各組動(dòng)物的生存狀態(tài)、移植瘤的生長(zhǎng)情況、抑瘤率，芪玉三龍湯組生存狀態(tài)良好，化學(xué)治療組毒性和不良反應(yīng)最大，但是聯(lián)合組有改善化學(xué)治療小鼠的生存狀態(tài)的作用。而且芪玉三龍湯對(duì)肺腫瘤具有溫和的抑制作用，其高劑量抑制腫瘤生長(zhǎng)作用較優(yōu)，但量效關(guān)系不明顯，其與順鉑聯(lián)用無(wú)明顯增效作用，但從調(diào)控蛋白角度而言，芪玉三龍湯可以下調(diào)PI3K、Akt和mTOR表達(dá)水平，和順鉑聯(lián)用對(duì)下調(diào)關(guān)鍵分子Akt的表達(dá)具有明顯的協(xié)同作用。本次研究表明，芪玉三龍湯可以改善肺癌化學(xué)治療小鼠的生存狀態(tài)，對(duì)腫瘤生長(zhǎng)有一定抑制作用，能夠下調(diào)PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路中關(guān)鍵蛋白的表達(dá)，此次實(shí)驗(yàn)取得了一些初步成果，為進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)，下一步應(yīng)擴(kuò)大樣本量，尋找最佳設(shè)計(jì)方案，深入研究芪玉三龍湯干預(yù)肺癌的療效及其相關(guān)機(jī)制。

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Effect of Qiyu Sanlong Decoction on Expression of PI3K, Akt, and mTOR in PI3K/Akt/mTOR Signaling Pathway in Mouse Model of Lung Cancer Xenograft

ZHANGXing-xing1,2,3,TONGJia-bing2,3,YANGCheng2,3,WANGChuan-bo2,3,LIZe-geng2,3

(1.HubeiUniversityofChineseMedicine,HubeiWuhan430065,China; 2.NationalKeyDisciplinesofLungofAnhuiUniversityofChineseMedicine,StateAdministrationofTraditionalChineseMedicine,AnhuiHefei230031,China; 3.InstituteforPreventionandTreatmentofRespiratoryDiseases,InstituteforPreventionandTreatmentofRespiratoryDiseases,AnhuiAcademyofChineseMedicine,AnhuiHefei230038,China)

[Abstract]ObjectiveTo observe the effect of Qiyu Sanlong (QYSL) Decoction on the growth of subcutaneous xenograft and regulation of PI3K/Akt/mTOR signaling pathway in mice bearing lung cancer. MethodsThe mouse model of lung cancer xenograft was established using Lewis lung carcinoma (LLC) cells. After the successful establishment of the model, the mice were randomly divided into model group, chemotherapy group, high-, medium-, and low-dose QYSL Decoction groups, and combination group. Survival was observed in each group, the curve for tumor growth was plotted, and the tumor inhibition rate was calculated; Western blot was applied to measure the protein expression of phosphoinositide 3-kinase (PI3K), Akt, and mammalian target of rapamycin (mTOR) in tumor tissue. ResultsThe high-dose QYSL Decoction group and the combination group had a better survival compared with the chemotherapy group; QYSL Decoction mildly inhibited lung tumor, and high-dose QYSL Decoction had a better inhibitory effect on tumor growth compared with other doses of QYSL Decoction, but without significant dose-effect relationship, and its combination with cisplatin had no significant synergistic effect; QYSL Decoction downregulated the protein expression of PI3K, Akt, and mTOR, and its combination with cisplatin had a significant synergistic effect in the downregulation of the key molecule Akt. ConclusionThe inhibitory effect of QYSL Decoction on lung cancer xenograft may be related to the regulation of key molecules in the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway, and a combination of QYSL Decoction and chemotherapeutic agents has a synergistic effect in the downregulation of the key protein Akt.

[Key words]Qiyu Sanlong Decoction; Lung cancer; Phosphoinositide 3-kinase; Akt; Mammalian target of rapamycin; Signaling pathway

收稿日期：(2015-06-24；編輯：曹健)

通信作者：李澤庚，li6609@126.com

作者簡(jiǎn)介：張星星(1985-)，女，博士研究生

[中圖分類號(hào)]R734.2[DOI]10.3969/j.issn.2095-7246.2016.01.022