精液指標(biāo)與體外受精助孕后孕早期自發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)分析*

程立子，方小武，吳日然，霍駿業(yè)

(中山市博愛醫(yī)院生殖中心，廣東中山 528403)

?

·論著·

精液指標(biāo)與體外受精助孕后孕早期自發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)分析*

程立子，方小武，吳日然，霍駿業(yè)

(中山市博愛醫(yī)院生殖中心，廣東中山 528403)

摘要:目的探討男方精液指標(biāo)與體外受精助孕患者孕早期自發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性。方法回顧性分析該院接受體外受精助孕的夫妻251對，根據(jù)女方是否發(fā)生早期自發(fā)性流產(chǎn)分為研究組(98對)及對照組(153對)，分析2組中男方的精子DNA碎片率、精子核蛋白不成熟率、正常形態(tài)精子百分率等指標(biāo)。結(jié)果研究組男方的精子DNA碎片率、正常形態(tài)精子百分率、精子濃度、精子活力、前向精子活力等與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；研究組男方的精子核蛋白不成熟率大于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；精子核蛋白不成熟率與早期自發(fā)性流產(chǎn)呈弱正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論精子成熟障礙與孕早期自發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)，精子核蛋白不成熟率可用于評估體外受精助孕者孕早期自發(fā)性流產(chǎn)風(fēng)險。

關(guān)鍵詞:精液指標(biāo)；體外受精；自發(fā)性流產(chǎn)；相關(guān)性

孕早期自發(fā)性流產(chǎn)是指妊娠12周內(nèi)自行終止或自發(fā)流產(chǎn)。早期流產(chǎn)常見的原因可能與胚胎染色體異常、孕婦內(nèi)分泌異常、生殖器官畸形、生殖道感染、生殖道局部或全身免疫異常等有關(guān)，但具體機(jī)制尚未完全探明。過往研究多關(guān)注女性因素，對男性因素，尤其是男性非遺傳性因素與自發(fā)性流產(chǎn)關(guān)系的研究甚少。精液指標(biāo)多應(yīng)用于男性生育力的評估，對于男性精液因素是否可影響孕早期自發(fā)性流產(chǎn)尚存較大爭議。本研究通過分析在本院生殖中心接受體外受精(IVF)男方的精液指標(biāo)，探討各指標(biāo)與女性孕早期自發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料回顧性分析2014年1～12月在本院生殖中心進(jìn)行IVF助孕的患者病歷資料，根據(jù)女方受孕后是否發(fā)生孕早期自發(fā)性流產(chǎn)分為2組，研究組為女方發(fā)生早期流產(chǎn)者，共98對夫妻，對照組為女方未發(fā)生早期流產(chǎn)者，共153對夫妻。其中研究組中女方年齡(32.47±5.00)歲；對照組中女方年齡(32.11±5.35)歲。2組女方一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。納入標(biāo)準(zhǔn)：接受IVF者，男女雙方染色體、性激素均正常，無明顯解剖異常和免疫因素異常，孕早期無疾病和服藥史。

1.2方法男方禁欲2～7 d，以手淫法采集精液于取精杯內(nèi)，待完全液化后混勻，按表1中方法檢測各精液指標(biāo)，操作嚴(yán)格按照試劑和儀器說明書進(jìn)行。比較2組間男方精液指標(biāo)的差異，分析男方年齡、各項精子指標(biāo)與孕早期自發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性，對相關(guān)的指標(biāo)進(jìn)一步作受試者工作特征(ROC)曲線分析，分析其對早期自發(fā)性流產(chǎn)的診斷價值。

表1　　精液指標(biāo)檢測方法及試劑、儀器廠家

2結(jié)果

2.12組間男方年齡及精液指標(biāo)比較除精子核蛋白不成熟率外，2組間男方年齡及其他精液指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.2男方年齡及各精液指標(biāo)與自發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性精子核蛋白不成熟率與早期自發(fā)性流產(chǎn)呈弱相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其余各指標(biāo)與自發(fā)性流產(chǎn)間無顯著相關(guān)(P>0.05)。見表3。

±s)

*:P<0.05,與對照組比較。

表3　　男方年齡及各精液指標(biāo)與自發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性

2.3精子核蛋白不成熟率的ROC曲線分析精子核蛋白不成熟率與早期自發(fā)性流產(chǎn)的ROC曲線分析結(jié)果顯示，當(dāng)精子核蛋白不成熟率大于35.5%時，預(yù)測發(fā)生早期自發(fā)性流產(chǎn)的靈敏度為40.8%，特異度為81.0%，ROC曲線下面積(AUC)為0.648。

3討論

導(dǎo)致孕早期自發(fā)性流產(chǎn)的原因有很多，包括胚胎染色體異常、孕婦內(nèi)分泌紊亂、感染、免疫異常、環(huán)境因素等，但仍有50%以上的病例原因不明[1]。過往針對流產(chǎn)原因的分析多集中在女性方面，對男性因素與自發(fā)性流產(chǎn)關(guān)系的研究較少見，且多集中于探討父系染色體異常與流產(chǎn)的關(guān)系。精子功能及形態(tài)檢查，則多應(yīng)用于對男性不育及胚胎質(zhì)量評價上[2-3]，對于男性精液因素是否與孕早期自發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)尚存較大爭議。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)流產(chǎn)組精子濃度、精子活力、正常形態(tài)精子百分率明顯低于對照組[4-5]；有的研究者則認(rèn)為精子DNA損傷是胚胎早期流產(chǎn)或復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的重要風(fēng)險因素[6-7]。也有研究者持有不同的觀點(diǎn)，如程錦娥等[8]認(rèn)為，精子核蛋白不成熟率與孕早期自發(fā)性流產(chǎn)有關(guān)，其他精液指標(biāo)均無明顯相關(guān)。男性精液因素是否對接受IVF助孕者孕早期自發(fā)性流產(chǎn)有影響，目前鮮有報道。

本研究顯示，研究組的男方年齡、精子DNA碎片率、精子濃度、精子活力、前向精子活力等指標(biāo)與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但2組間精子核蛋白不成熟率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，精子核蛋白不成熟率與孕早期自發(fā)性流產(chǎn)呈弱正相關(guān)(P<0.05)，這與劉瑜等[9]的研究基本一致。

精子DNA碎片率常被認(rèn)為與早期自發(fā)性流產(chǎn)密切相關(guān)，但在本研究中，精子DNA碎片率與自發(fā)性流產(chǎn)不存在相關(guān)性，其可能原因為：(1)在一定范圍內(nèi)，卵母細(xì)胞和受精卵可對受損的精子DNA進(jìn)行修復(fù)[10]；(2)精子DNA碎片率主要影響受精能力、胚胎分裂功能，而對受精后胚胎生長、妊娠等影響較小[11]；(3)精子之間存在競爭與優(yōu)勝劣汰過程[12]，最后成功受精者往往是質(zhì)量較好的精子。

在精子成熟過程中，精子核內(nèi)組蛋白被富含魚精蛋白逐漸取代[13]，成熟精子精核內(nèi)主要成分為魚精蛋白，魚精蛋白可中和DNA鏈上負(fù)電荷，使精子核染色質(zhì)緊密結(jié)合而高度壓縮，形成特殊雙環(huán)結(jié)構(gòu)而保護(hù)精子DNA免受破壞；精子成熟障礙時，蛋白轉(zhuǎn)換過程受阻，精核內(nèi)蛋白成分主要為組蛋白，其對精子DNA無保護(hù)作用，精子DNA易遭到破壞，導(dǎo)致胚胎異常發(fā)育而流產(chǎn)[14]。本研究中顯示，精子核蛋白成熟障礙為導(dǎo)致IVF受孕后自發(fā)性流產(chǎn)的重要危險因素，AUC為0.648，其臨界值為35.5%，明顯高于方小武等[15]以流產(chǎn)者男性配偶及健康男性為研究對象得出的27%的結(jié)論，這可能是由于兩項研究中研究對象不同所致，本文所選的研究對象為接受IVF助孕者，精子經(jīng)過優(yōu)選處理，精子優(yōu)選過程有助于降低精子核蛋白不成熟率，從而減少流產(chǎn)的風(fēng)險。

綜上所述，精子成熟障礙與孕早期自發(fā)性流產(chǎn)密切相關(guān)，精子核蛋白不成熟率可用于IVF助孕者發(fā)生早期自發(fā)性流產(chǎn)風(fēng)險評估。對于接受輔助生殖助孕者，應(yīng)先通過治療或適宜的精子優(yōu)選處理來降低精子核蛋白不成熟率，以降低早期自發(fā)性流產(chǎn)風(fēng)險。

參考文獻(xiàn)

[1]趙花，苗竹林，韋相才．復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因分析及治療新進(jìn)展[J]．臨床醫(yī)學(xué)，2013，33(2)：104-108．

[2]蔣最明，顧敏，李仲余，等．精子形態(tài)和精子活力分析在男性不育診斷中的應(yīng)用[J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(1)：91-93．

[3]黃茜，丘映，史秋雯，等．精子DNA損傷與精子形態(tài)、頂體完整率的關(guān)系研究[J]．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34(6)：649-650．

[4]Gil-Villa AM,Cardona-Maya W,Agarwal AA,et al.Assessment of sperm factors possibly involved in early recurrent pregnancy loss[J].Fertil Steril,2010,94(4):1465-1472.

[5]張洲，師娟子，邢俊平，等．復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與精液常規(guī)參數(shù)、精子畸形率和DNA完整性的相關(guān)性[J]．第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2010，32(16)：1788-1792．

[6]Kumar K,Deka D,Singh A,et al.Predictive value of DNA integrity analysis in idiopathic recurrent pregnancy loss following spontaneous conception[J].J Assist Reprod Genet,2012,29(9):861-867.

[7]甄亞麗．精子DNA完整性與不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)性分析[D]．大連：大連醫(yī)科大學(xué)，2014．

[8]程錦娥，何丹．精液實(shí)驗室指標(biāo)與孕早期自發(fā)性流產(chǎn)的臨床診斷關(guān)系[J]．吉林醫(yī)學(xué)，2012，33(10)：2033-2035．

[9]劉瑜，陳曉蘭，葉丹捷，等．精子成熟障礙對孕早期自發(fā)性流產(chǎn)與胚胎停育的影響[J]．生殖與避孕，2011，31(8)：532-537．

[10]Marchetti F,Essers J,Kanaar R,et al.Disruption of maternal DNA repair increases sperm-derived chromosomal aberrations[J].Proc Natl Acad Sci USA,2007,104(45):17725-17729.

[11]陳泯燕，黃國寧，王亞平，等．精子DNA碎片與體外受精結(jié)局的關(guān)系[J]．生殖與避孕，2010，30(11)：732-737．

[12]方小武，韋劍洪，吳日然，等．精子DNA碎片率與早期自發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)系[J]．中國優(yōu)生與遺傳雜志，2013(6)：112．

[13]劉居理，羅明，盧雪芳，等．男性不育患者精子核蛋白組型轉(zhuǎn)換與精子密度及活力分析[J]．檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6(13)：1061-1062．

[14]Li Y,Lalancette C,Miller D,et al.Characterization of nucleohistone and nucleoprotamine components in the mature human sperm nucleus[J].Asian J Androl,2008,10(4):535-541.

[15]方小武，陳捷，韋劍洪，等．復(fù)發(fā)性流產(chǎn)男性配偶精子核蛋白不成熟度檢測的臨床意義[J]．中國優(yōu)生與遺傳雜志，2015，23(1)：108．

Analysis of correlation between sperm indicators and early spontaneous abortion after in vitro fertilization*

ChengLizi,FangXiaowu,WuRiran,HuoJunye

(ReproductiveMedicalCenter,BoaiHospital,Zhongshan,Guangdong528403,China)

Abstract:ObjectiveTo explore the correlation between the sperm indicators and early spontaneous abortion after in vitro fertilization(IVF).Methods251 couples receiving IVF,were retrospectively analyzed and divided into the research group (98 couples) and control group (153 couples) according to whether spontaneous abortion occurring.The male′s indicators of sperm DNA fragmentation index (DFI),sperm nucleoprotein immaturity rate,percentage of normally morphologic sperms,etc.in the two groups were analyzed.ResultsDFI,percentage of normally morphologic sperms,sperm concentration,motility and forward motile sperm had no statistical differences between the research group and the control group(P>0.05);while the sperm nucleoprotein immaturity rate of the research group was significantly higher than that of control group,the difference was statistically significant (P<0.05);the sperm nucleoprotein immaturity rate had weak correlation with spontaneous abortion in early pregnancy (P<0.05).ConclusionThe sperm nucleoprotein dysmaturity is correlated with the spontaneous abortion in early pregnancy.The sperm nucleoprotein immaturity rate could be used to evaluate the risk of spontaneous abortion in early pregnancy after IVF.

Key words:semen parameters;in vitro fertilization;spontaneous abortion;correlation

(收稿日期：2015-09-25)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.014

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)03-0324-03

作者簡介：程立子，女，主管技師，從事輔助生殖及生殖醫(yī)學(xué)實(shí)驗研究。

*基金項目：2013年中山市科技局醫(yī)學(xué)科研基金項目(20132A027)。