馬齒莧和海桐皮煎劑體外抗陰道毛滴蟲作用的研究

單志濤，單玉棟，黃 倩，陳天鴿，姚呈呈，王麗娜

（1.承德醫(yī)學(xué)院中醫(yī)學(xué)院2013級，河北承德 067000;2.指導(dǎo)教師）

學(xué)生園地

馬齒莧和海桐皮煎劑體外抗陰道毛滴蟲作用的研究

單志濤1，單玉棟1，黃 倩1，陳天鴿1，姚呈呈1，王麗娜2

（1.承德醫(yī)學(xué)院中醫(yī)學(xué)院2013級，河北承德 067000;2.指導(dǎo)教師）

陰道毛滴蟲;中藥;馬齒莧;海桐皮

陰道毛滴蟲(Trichomonas vaginalis）是寄生在人體陰道和泌尿道的一種常見病原體，由其引起的陰道毛滴蟲病是一種性傳播疾病。該病在世界范圍內(nèi)廣泛流行，人群感染比較普遍，全世界每年有超過1.7億人感染[1]。陰道毛滴蟲具有一定的侵襲性，其感染與不孕不育高度相關(guān)。陰道毛滴蟲感染還可以增加機(jī)體對HIV等其它性傳播疾病的易感性，對人體危害極大[2-4]。近年來,我國滴蟲性陰道炎發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。甲硝唑治療陰道毛滴蟲病療效顯著，為目前臨床上抗滴蟲的首選藥物，但隨著應(yīng)用范圍的擴(kuò)大與應(yīng)用時間的延長，不斷有新耐藥株被發(fā)現(xiàn)。近年來,陰道毛滴蟲對甲硝唑的抗性呈明顯上升趨勢[5]。研究顯示,甲硝唑具有致突變和致癌作用，此外還可引起皮膚過敏、心血管系統(tǒng)、血液系統(tǒng)等多個系統(tǒng)的不良反應(yīng)[6]。尋找新的高效、低毒替代藥物受到醫(yī)學(xué)界的普遍關(guān)注。本研究選用馬齒莧和海桐皮兩種中藥煎劑，觀察二者體外抗陰道毛滴蟲的效果，為治療滴蟲性陰道炎尋找更為有效的中草藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)蟲種 采自承德市婦幼保健醫(yī)院婦科門診滴蟲性陰道炎患者的陰道分泌物。用消毒棉拭子簽在陰道后穹隆處取分泌物，接種于肝浸湯培養(yǎng)基中，37℃無菌培養(yǎng)，每48h傳代1次，培養(yǎng)3代后用于實(shí)驗(yàn)。

1.2 方法

1.2.1 肝浸湯培養(yǎng)基制備:按文獻(xiàn)[7]的方法制作肝浸湯培養(yǎng)基，保存于4℃冰箱中備用。臨用前，每管加入青霉素和鏈霉素濃度各達(dá)1500U/ml，無菌滅活小牛血清1ml。

1.2.2 藥物制備:馬齒莧、海桐皮各10g，洗凈，分別加入純水200ml，浸泡2h，煎煮至20ml，濾紙過濾至無菌瓶中，4℃冷藏待用。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)分組:實(shí)驗(yàn)分四組，每組分別轉(zhuǎn)入培養(yǎng)三代的等量混懸滴蟲液。在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12h后，一組加入肝浸湯培養(yǎng)基2ml作為空白對照組;一組加入含甲硝唑肝浸湯培養(yǎng)基2ml，甲硝唑終濃度1mg/ml，作為陽性藥物對照組，即甲硝唑組;另兩組分別加入馬齒莧和海桐皮煎劑各2ml，作為實(shí)驗(yàn)組，即馬齒莧組和海桐皮組。

1.2.4 實(shí)驗(yàn)觀察及結(jié)果判定:24h后振蕩搖勻各管，吸取20μl培養(yǎng)物滴于載玻片，加蓋玻片，高倍顯微鏡(×400)下觀察每個視野陰道毛滴蟲的形態(tài)變化及活動狀態(tài)，并記錄蟲體死亡率。蟲體活躍度判斷標(biāo)準(zhǔn):“+++”為蟲體形態(tài)呈梨形，運(yùn)動活躍，“++”為蟲體形態(tài)呈梨形，運(yùn)動減緩，“+”為蟲體變圓，僅左右擺動或靜止不動，鞭毛和(或)波動膜擺動，“-”為蟲體顆?；?，邊緣不整，或發(fā)生裂解。

2 結(jié)果

24h后觀察各組陰道毛滴蟲體外生長情況，空白對照組和馬齒莧組陰道毛滴蟲形態(tài)呈梨形，運(yùn)動活躍，死亡率分別為3.5%和3.7%。甲硝唑組和海桐皮組陰道毛滴蟲蟲體顆?；?，大部分已經(jīng)裂解，死亡率均為100%。見附表:

附表 各組陰道毛滴蟲體外生長情況

3 討論

中草藥作為我國的傳統(tǒng)醫(yī)藥，在臨床應(yīng)用方面有更廣闊的前景有待開發(fā)。有研究證明，多種中藥有明顯的抗陰道毛滴蟲作用[8-10]。

馬齒莧(Purslane）別名長命草、五行草、酸味草、地馬菜等，屬于馬齒科一年生肉質(zhì)草本藥食兩用植物，已被我國衛(wèi)生部劃定為78種藥食同源的野生植物之一[11]，在中國醫(yī)學(xué)的臨床應(yīng)用中證實(shí)對多種致病菌有明顯的抗菌作用[12-14]。海桐皮(Erythrina variegata L.)亦為我國傳統(tǒng)中藥。歷代關(guān)于草本的記載中海桐皮均具有祛風(fēng)除濕、舒筋通絡(luò)、殺蟲止癢等功效。經(jīng)文獻(xiàn)檢索，目前有關(guān)馬齒莧和海桐皮對抗陰道毛滴蟲的研究未見報道。

本研究首次選用馬齒莧和海桐皮兩種中藥煎劑進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，并與甲硝唑?qū)Ρ龋?4h后觀察抗陰道毛滴蟲的作用效果。結(jié)果顯示，空白對照組陰道毛滴蟲形態(tài)呈梨形，運(yùn)動活躍，死亡率為3.5%。甲硝唑組陰道毛滴蟲蟲體顆粒化，大部分已經(jīng)裂解，死亡率為100%。馬齒莧組陰道毛滴蟲生長狀態(tài)好，死亡率為3.7%，與空白對照組差別不明顯，說明本研究中的馬齒莧煎劑無體外抗陰道毛滴蟲作用。但是，馬齒莧抗陰道毛滴蟲作用亦不能完全否定，如增加藥物濃度或以其他方式提取馬齒莧的有效成分用于抗陰道毛滴蟲是否有效還有待進(jìn)一步研究。海桐皮組陰道毛滴蟲全部死亡，與甲硝唑組無差異，說明海桐皮煎劑有較好的殺滅陰道毛滴蟲的作用。在臨床上應(yīng)用是否有效，有待于進(jìn)一步研究探索。

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（學(xué)生園地欄目編輯:張 健)

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1004-6879(2016）04-0347-02

2016-03-18）