16例EDTA依賴性假性血小板減少的臨床分析

郭銳 馮瑩 朱麗東 林楨 肖綺文

（廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院，廣東廣州510260）

16例EDTA依賴性假性血小板減少的臨床分析

郭銳 馮瑩 朱麗東 林楨 肖綺文

（廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院，廣東廣州510260）

目的探討乙二胺四乙酸（EDTA）依賴性假性血小板減少（EDTA-PTCP）的發(fā)病原因及防范措施，以減少臨床誤診誤治。方法對2015年6月至12月我院門診及住院患者發(fā)現(xiàn)的16例EDTA-PTCP的臨床資料進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果患者行血常規(guī)檢查均發(fā)現(xiàn)血小板減少（＜60×109/L），均重新采血并于1 h內(nèi)送檢，EDTA-K2抗凝管機(jī)檢血小板結(jié)果仍明顯降低（18～52）×109/L，血小板直方圖存在曲皺、尾部上翹、拖尾、無擬合曲線等異常；枸櫞酸鈉抗凝管機(jī)檢及草酸銨稀釋液手工計數(shù)血小板均接近正常，且枸櫞酸鈉抗凝管機(jī)檢血小板直方圖正常，16例均明確為EDTA-PTCP。結(jié)論應(yīng)用EDTA-K2抗凝管機(jī)檢血小板計數(shù)減低而患者并無出血傾向、血栓形成等相關(guān)血小板減少癥表現(xiàn)時，應(yīng)采取手工計數(shù)、更換抗凝劑等方法復(fù)檢，以減少或避免臨床誤診誤治。

假性血小板減少（PTCP）；已二胺四乙酸（EDTA）；枸櫞酸納

近年文獻(xiàn)有關(guān)全自動血細(xì)胞分析儀測定血小板計數(shù)減少（＜50×109/L）而臨床無任何出血傾向、血栓形成等表現(xiàn)的假性血小板減少（Pseudothrombocyto-penia，PTCP）的病例報道逐漸增多[1-3]。臨床工作中患者血小板減少可能會指導(dǎo)臨床醫(yī)師抽骨髓等進(jìn)一步檢查或輸入血小板治療，因此及時鑒別患者血小板減少真實(shí)與否是非常重要的。本文通過統(tǒng)計及追蹤就診于我院的EDTA-PTCP依賴性假性血小板減少患者，進(jìn)一步分析EDTA-PTCP的產(chǎn)生原因及相應(yīng)的臨床處理措施。

1 資料與方法

1.1 一般資料：2015年6至12月，于廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院門診或住院患者中檢測到血常規(guī)假性血小板減少病例16例。其中4例為產(chǎn)科門診及住院患者，其余12例為血液科門診及住院患者。其中男性7例，女性9例，年齡21～66歲，平均39歲?；颊呔鶡o明顯皮膚瘀點(diǎn)，瘀斑，牙齦出血，鼻出血或消化道出血等臨床癥狀。

1.2 試劑與儀器：乙二胺四乙酸二鉀EDTA-K2抗凝真空靜脈采血管和枸櫞酸鈉抗凝真空靜脈采血管（上?？迫A公司）；瑞氏-吉姆薩染色液（臺灣BASO公司）；Sysmex XS-800I全自動血細(xì)胞分析儀（日本希森美康公司）。

1.3 方法：所有患者均為EDTA-K2抗凝真空靜脈采血管靜脈采血，使用Sysmex XS-800I全自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測。經(jīng)患者同意后，使用枸櫞酸鈉抗凝真空靜脈采血管重新采血全自動血細(xì)胞分析儀檢測?；颊卟裳M(jìn)行顯微鏡下草酸銨法血小板復(fù)檢，2名檢測人員顯微鏡下人工計數(shù)取平均值。EDTA-K2采血管標(biāo)本涂片，瑞氏染色鏡檢。

2 結(jié)果

2.1 儀器法血小板檢測：16例假性血小板減少的患者，首次采集標(biāo)本血小板檢測結(jié)果偏低，結(jié)果范圍為（15～65）×109/L。5例患者枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本血小板結(jié)果得到糾正，為正常范圍。其余12例患者枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本血小板結(jié)果與EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測結(jié)果相差不大，明顯低于血小板正常值。

2.2 鏡下計數(shù)法血小板檢測：16例標(biāo)本，顯微鏡下血小板計數(shù)結(jié)果均高于或接近正常參考范圍（100～300）×109/L，詳見表1。

表1 全自動血細(xì)胞分析儀和手工計數(shù)血小板結(jié)果及異常原因分析

2.3 靜脈血血涂片鏡檢結(jié)果：EDTA-K2抗凝標(biāo)本血涂片鏡下可見明顯血小板聚集，枸櫞酸納抗凝標(biāo)本血涂片鏡下血小板呈散在分布。其中6例可見大量大血小板合并血小板聚集，其余3例為不明原因血小板聚集，詳見圖1。

圖1 靜脈血血涂片鏡檢結(jié)果

3 討論

血小板是人體血液中血栓與止血的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，血小板數(shù)量或功能異常都會引起出血性疾病或血栓栓塞性疾病，因此血小板計數(shù)對于臨床具有重要意義。

EDTA-K2依賴性假性血小板減少是由于EDTA-K2通過與血液中凝血因子Ⅳ，即鈣離子，結(jié)合成螯合物，使鈣離子失去凝血作用，從而達(dá)到抗凝效果，但EDTA可誘導(dǎo)血小板中的特殊蛋白從而使血小板發(fā)生凝集，故在全自動血細(xì)胞計數(shù)儀上檢測時，血小板計數(shù)發(fā)生假性減少的現(xiàn)象。血細(xì)胞分析儀不能計數(shù)發(fā)生凝集，堆積的血小板，致使標(biāo)本在正常范圍內(nèi)的血小板計數(shù)結(jié)果偏低。在某種情況下，EDTA-PTCP會掩蓋真實(shí)的血小板減少或血小板增多[3]。此外，若血小板凝集直徑接近白細(xì)胞直徑，可能會被血細(xì)胞計數(shù)儀器計數(shù)成白細(xì)胞，進(jìn)而造成患者血小板假性減少和白細(xì)胞假性增高，給臨床診療造成嚴(yán)重干擾，增加不必要的輔助檢查，甚至引起臨床誤診，誤治。

本研究中，5例屬于該種類型，標(biāo)本血涂片鏡檢可見大量血小板聚集，全自動血細(xì)胞分析儀器提示血小板聚集。手工計數(shù)血小板與枸櫞酸鈉抗病標(biāo)本檢測結(jié)果基本一致。本研究中最常見的是大血小板/凝集導(dǎo)致的血小板計數(shù)降低，可見6例。當(dāng)血小板體積大于24fl時，會被誤認(rèn)為小紅細(xì)胞，造成血小板計數(shù)偏低[4]。全自動血細(xì)胞分析儀的血小板分布圖會呈現(xiàn)尾部上翹，提示大血小板存在，計數(shù)結(jié)果減少的程度，與大血小板體積及所占比例有一定相關(guān)。手工計數(shù)血小板可使結(jié)果得到糾正。

目前報道的儀器法檢測得到假性血小板降低結(jié)果的原因還有以下幾種：血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，EDTA-PTCP，白細(xì)胞表面的IgG，F(xiàn)c片段和血小板表面的GPIIb/IIIa結(jié)合導(dǎo)致血小板黏附于白細(xì)胞表面造成，手工計數(shù)血小板可糾正結(jié)果。臨床產(chǎn)科常采用硫酸鎂MgSO4預(yù)防和控制產(chǎn)前子癇，因治療的有效血鎂濃度為1.0～3.0 mmol/L，當(dāng)血鎂濃度＞2.84 mmol/L時常引起儀器法計數(shù)血小板結(jié)果偏低[7]。本研究中，來自產(chǎn)科患者中有2例后經(jīng)證實(shí)因?yàn)楦哝V血癥導(dǎo)致的PTCP。血液中鎂含量過高可引起假性血小板減少，可能與鎂干擾血小板黏附和凝血酶原生成，導(dǎo)致凝血障礙有關(guān)。隨著標(biāo)本放置時間的延長，常會導(dǎo)致假性血小板減少，集素可在低溫凝集紅細(xì)胞和血液中有核細(xì)胞及血小板，致使儀器檢測結(jié)果和紅系明顯減少。涂片示血小板聚集分布，紅細(xì)胞呈4～5個花瓣樣聚集，37℃水浴箱放置10min后馬上檢測可糾正結(jié)果[6]。此外EDTA-K抗凝時標(biāo)本室溫放置時間過短也會造成血小板計數(shù)結(jié)果偏低，放置時間延長可糾正結(jié)果[7-8]。

綜上所述，造成假性血小板減少癥的原因復(fù)雜多樣。臨床中如遇有靜脈抗凝血檢測血小板顯著減少，而臨床檢查又無淤點(diǎn)、淤斑等血小板減少癥的體征時。首先進(jìn)行涂片復(fù)染，以確保查證血小板減少的真正原因。進(jìn)一步指導(dǎo)和支持臨床診斷和治療。

［1］曹科，林曉文，羅小娟，等.EDTA依賴性假性血小板減少癥誤診1例［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（12）：1536-1538.

［2］于秀艷，朱華，高海燕.血細(xì)胞分析儀假性血小板減少原因分析及處理［J］.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2012，16（2）：337-338.

［3］Chia GF，HsiaCC.Pseudothrombocytopenia［J］.Blood，2011，117（16）：4168-4172.

［4］Kamath V，Sarda P，Chacko MP，et al.Pseudothrombocytopenia observed with ethylene diamine tetra acelate and citrate anticoagulants，resolved using 37 incubation and Kanamycin［J］.India J Pathol Microbiol，2013，56（3）：306-308.

［5］周小錦，鄒曉.假性血小板減少研究進(jìn)展［J］.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2007，30（9）：1065-1068.

［6］李惠卿，賴馨，蔡潔丹，等.血細(xì)胞分析儀計數(shù)血小板假性減少原因分析及對策探討［J］.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，1（9）：764-767.

［7］鄺妙歡，歐陽文婷，林建華，等.腫瘤患者EDTA依賴性假性血小板減少的臨床分析［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志，2010，90（44）：3144-3146.

［8］何佳玲.臨床假性血小板減少的病理分析［J］.中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2012，9（7）：30-31.

Clinical Analysis of 16 Cases of EDTA-Dependent Pseudo-Thrombocytopenia

Guo Rui Feng Ying Zhu Lidong Lin Zhen Xiao Qiwen

（The Second Hospital Affiliated To Guangzhou Medical University，Guangzhou 510260，China）

ObjectiveTo investigate the ethylene diamine tetra-acetic acid（EDTA）dependent pseudo-thrombocytopenia（EDTA-PTCP）the cause and preventive measures to reduce clinical misdiagnosis.MethodsJune 2015-EDTA-PTCP clinical data of 16 cases in December 2015 in our hospital outpatient and inpatient found were retrospectively analyzed.ResultsThe patients underwent outpatient or inpatient blood tests were thrombocytopenia（＜60×109/L），were re-bled and censorship within 1 h，EDTAK2 anticoagulant tube machine inspection results are still significantly lower platelet（18～52）×109/L，platelet histogram exists curled tail upturned tail，no other abnormal curve fitting；sodium citrate anticoagulation tube machine inspection and ammonium oxalate manual dilutions were close to normal platelet count，and sodium citrate tube machine subject to normal platelet histogram，16 cases were clear of EDTA-PTCP.ConclusionEDTA-K2 anticoagulant tube machine inspection and reduce platelet count in patients with no bleeding tendency，thrombosis and other related thrombocytopenia performance，should be taken manually count，anticoagulants and other methods to replace the re-examination，in order to reduce or avoid misdiagnosis mistreatment.

Pseudo-thrombocytopenia（PTCP）；A diamine tetra-acetic acid（EDTA）；Sodium citrate

R552

A 學(xué)科分類代碼：32024

1001-8131（2016）06-0608-03

2016-06-27

廣東省科技廳社會發(fā)展項(xiàng)目基金粵科社字（[2011]106）