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    芝麻莖點(diǎn)枯病菌的生物學(xué)特性及9種殺菌劑對(duì)其抑制作用測(cè)定

    2016-02-06 11:11:03倪云霞劉玉霞劉新濤劉紅彥河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所農(nóng)業(yè)部華北南部農(nóng)作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室河南省農(nóng)作物病蟲害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室河南鄭州450002
    河南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年6期
    關(guān)鍵詞:莖稈氮源殺菌劑

    倪云霞,王 飛,劉玉霞,劉新濤,趙 輝,劉紅彥(河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)研究所/農(nóng)業(yè)部華北南部農(nóng)作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/河南省農(nóng)作物病蟲害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,河南 鄭州 450002)

    芝麻莖點(diǎn)枯病菌的生物學(xué)特性及9種殺菌劑對(duì)其抑制作用測(cè)定

    倪云霞,王 飛,劉玉霞,劉新濤,趙 輝,劉紅彥*
    (河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)研究所/農(nóng)業(yè)部華北南部農(nóng)作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/河南省農(nóng)作物病蟲害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,河南 鄭州 450002)

    為了有效防治芝麻莖點(diǎn)枯病,對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌的生物學(xué)特性進(jìn)行研究,并測(cè)定了9種殺菌劑的室內(nèi)毒力。采用常規(guī)鑒定和分子鑒定相結(jié)合的方法,鑒定致病菌株為菜豆殼球孢[Macrophominaphaseolina(Maubl.) Ashby]。對(duì)菌株的生物學(xué)特性研究結(jié)果表明,最適合菌絲生長(zhǎng)的培養(yǎng)基為PSA,碳源為蔗糖,氮源為胰蛋白胨;適合菌絲生長(zhǎng)的pH值為5.02~6.22;菌絲生長(zhǎng)的最適溫度為28~30 ℃,致死溫度為59 ℃;12 h光暗交替有利于菌絲生長(zhǎng)。采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了9種殺菌劑對(duì)該菌株的室內(nèi)毒力,結(jié)果顯示,9種殺菌劑對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌絲的抑制效果有很大的差異,12.5%烯唑醇WP、50%多菌靈WP、40%氟硅唑EC的抑菌效果較好,相應(yīng)的EC50值分別為0.06、0.18、0.21 μg/mL;抑菌效果最差的是70%惡霉靈SP,EC50值為33.61 μg/mL。

    芝麻; 莖點(diǎn)枯??; 菜豆殼球孢; 生物學(xué)特性; 殺菌劑; 室內(nèi)毒力

    芝麻屬胡麻科1年生草本植物[1-2]。芝麻莖點(diǎn)枯病是由菜豆殼球孢[Macrophominaphaseolina(Maubl.) Ashby]引起的一種真菌病害[3-4],是危害芝麻的主要病害之一,在亞洲、歐洲、美洲等芝麻產(chǎn)區(qū)嚴(yán)重發(fā)生[5-6]。芝麻莖點(diǎn)枯病在芝麻的整個(gè)生育期均可發(fā)生,導(dǎo)致莖稈中空、折斷,蒴果干枯,種子帶有病菌菌核[7]。河南省是我國(guó)芝麻的主產(chǎn)區(qū),種植面積最大,占全國(guó)總種植面積的2/5,產(chǎn)量占全國(guó)芝麻總產(chǎn)量的40%以上[8-9],芝麻莖點(diǎn)枯病的發(fā)生尤其嚴(yán)重[10-11]。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于芝麻莖點(diǎn)枯病菌生物學(xué)特性和流行規(guī)律方面的研究報(bào)道很少,因此缺乏有效的防治手段[10,12-14],生產(chǎn)上對(duì)該病害仍舊采用傳統(tǒng)的方法進(jìn)行防治。為此,對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病病原菌的生物學(xué)特性進(jìn)行研究,期望通過控制外部環(huán)境條件來降低芝麻莖點(diǎn)枯病的發(fā)生,并研究了9種殺菌劑對(duì)病原菌的抑制作用,以篩選防治該病害的高效藥劑。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    病原菌株:芝麻莖點(diǎn)枯病菌標(biāo)樣采自河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院芝麻試驗(yàn)田。

    供試藥劑:50%多菌靈WP,江蘇省江陰市祝上鎮(zhèn)化工工業(yè)園區(qū)生產(chǎn);40%福星(氟硅唑) EC,美國(guó)杜邦公司生產(chǎn);70%甲基硫菌靈WP,日本曹達(dá)株式會(huì)社生產(chǎn);80%代森錳鋅WP,美國(guó)固信公司生產(chǎn);50%福美雙WP,河北冀豐農(nóng)藥化工有限責(zé)任公司生產(chǎn);12.5%禾果利(烯唑醇)WP,江蘇輝豐農(nóng)化有限公司生產(chǎn);30%醚菌酯SC,山東京博農(nóng)化有限公司生產(chǎn);10%寶麗安(多氧霉素)WP,日本科研制藥株式會(huì)社生產(chǎn);70%山推(惡霉靈)SP,山東京博農(nóng)化有限公司生產(chǎn)。

    1.2 病原菌分離及鑒定

    病原菌的分離培養(yǎng)采用常規(guī)的組織分離法[15],選取芝麻莖稈上的典型癥狀標(biāo)樣,在光學(xué)顯微鏡下直接鏡檢后,置于 PDA平板上28 ℃下培養(yǎng)獲得病菌純培養(yǎng),觀察菌落形態(tài)、菌絲形態(tài)及菌核著生情況。并根據(jù)真菌鑒定手冊(cè)進(jìn)行病原菌鑒定[16]。

    采用改良CTAB法提取病原菌基因組DNA[17]。合成ITS通用引物,ITS1:5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′;ITS4:5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′[18]。以病原菌基因組DNA為模板,采用ITS通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,反應(yīng)體系 (25 μL)為: 模板2 μL、10×Buffer(含Mg2+)2.5 μL、Taq(5 U/μL)0.2 μL、ITS1和ITS4各1 μL、dNTP(10 mmol/L) 0.4 μL、ddH2O 17.9 μL。反應(yīng)程序:95 ℃ 預(yù)變性5 min;95 ℃ 變性1 min,50 ℃退火30 s,72 ℃延伸80 s,35個(gè)循環(huán);72 ℃延伸10 min。測(cè)序工作在生工生物工程(上海)有限公司進(jìn)行。

    1.3 芝麻莖點(diǎn)枯病菌生物學(xué)特性觀察

    1.3.1 培養(yǎng)基對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響試驗(yàn) 共選用 PDA、PSA、PDA+芝麻莖稈煎汁、PSA+芝麻莖稈煎汁、芝麻莖稈煎汁、Bilai’s、高氏1號(hào)、葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基、查彼(Czapek)培養(yǎng)基和燕麥片培養(yǎng)基等10種培養(yǎng)基[19]。其中,PDA+芝麻莖稈煎汁:葡萄糖20 g、馬鈴薯200 g、瓊脂20 g、芝麻莖稈煎汁70 g(取新鮮芝麻莖稈70 g加少量水煮后過濾,下同)、蒸餾水1 000 mL;PSA+芝麻莖稈煎汁:蔗糖20 g、馬鈴薯200 g、瓊脂20 g、芝麻莖稈煎汁70 g、蒸餾水1 000 mL;芝麻莖稈煎汁培養(yǎng)基:芝麻莖稈煎汁70 g、瓊脂20 g、蒸餾水1 000 mL。

    接種直徑6 mm的病原菌菌塊于各種培養(yǎng)基平板中央,28 ℃培養(yǎng),重復(fù)5次,第3天用十字交叉法測(cè)量菌落直徑[15]。

    1.3.2 溫度和pH值對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響試驗(yàn) 將直徑6 mm的病原菌菌塊接種到PSA平板中央,設(shè)置培養(yǎng)溫度分別為 5、10、15、20、22、25、28、30、35 ℃等9個(gè)不同梯度,每處理重復(fù)5次,第3天測(cè)量菌落直徑。

    以PSA培養(yǎng)基為基礎(chǔ),用0.1%的NaOH和HCl溶液調(diào)配培養(yǎng)基pH值分別為5.02、6.00、7.01、8.00、9.02、10.07和11.00,以不調(diào)節(jié)pH值的培養(yǎng)基為對(duì)照(pH值6.22),28 ℃培養(yǎng),每處理重復(fù)5次,第3天測(cè)量菌落直徑。

    1.3.3 光照對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響試驗(yàn) 將直徑6 mm的病原菌菌塊接種到 PSA平板中央,28 ℃培養(yǎng),光照條件分別為連續(xù)光照、連續(xù)黑暗、12 h光暗交替,每處理重復(fù)5次,第3天測(cè)量菌落直徑。

    1.3.4 碳、氮源對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響試驗(yàn) 以查彼培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,以KNO3為氮源,使碳源的總質(zhì)量濃度為12.63 g/L,共選擇9種不同的碳源:蔗糖、D-葡萄糖、D-果糖、肌醇、乳糖、可溶性淀粉、甘油、葡聚糖、檸檬酸鈉,以無碳、氮源培養(yǎng)基和無碳源培養(yǎng)基為對(duì)照,每處理重復(fù)5次,28 ℃培養(yǎng),第3天測(cè)量菌落直徑。

    以蔗糖為碳源,使氮源總質(zhì)量濃度為0.329 6 g/L,共選擇10種不同的氮源:胰蛋白胨、牛肉膏、硝酸鉀、硫酸銨、硝酸鈉、亞硝酸鈉、磷酸二氫銨、脲、磷酸氫二銨、草酸銨,以無碳、氮源培養(yǎng)基和無氮源培養(yǎng)基為對(duì)照,每處理重復(fù)5次,28 ℃培養(yǎng),第3天測(cè)量菌落直徑。

    1.3.5 芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌絲致死溫度的測(cè)定 將直徑6 mm的病原菌菌塊放置于裝有10 mL無菌水的滅菌離心管中,將離心管分別置于35~60 ℃(每隔5 ℃設(shè)置梯度)的恒溫水浴鍋中處理10 min(先預(yù)熱1 min)后取出迅速冷卻[19-20]。將處理過的菌塊置于PSA平板培養(yǎng)基中,每個(gè)處理5次重復(fù),28 ℃恒溫培養(yǎng),第3天測(cè)量菌落直徑。

    先以相隔5 ℃梯度確定致死溫度范圍,然后相隔1 ℃設(shè)置梯度重復(fù)以上試驗(yàn),確定菌絲致死溫度。

    1.4 9種殺菌劑對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌的抑制作用測(cè)定

    采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定9種殺菌劑對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌的抑制作用。將直徑6 mm的病原菌菌塊接種到含有不同質(zhì)量濃度藥劑的PSA平板上,每質(zhì)量濃度處理重復(fù)5次,28 ℃培養(yǎng),第3天測(cè)量菌落直徑,以不含藥劑處理為對(duì)照。

    培養(yǎng)基中供試藥劑的質(zhì)量濃度如下:50%多菌靈WP 50、25、12.5、6.25、3.125 μg/mL,40%氟硅唑EC 5、2.5、1.25、0.625、0.312 5 μg/mL,70%甲基托布津WP 70、35、17.5、8.75、4.375、2.187 5 μg/mL,80%代森錳鋅WP 40、20、10、5、2.5 μg/mL,50%福美雙WP 50、25、12.5、6.25、3.125 μg/mL,12.5%烯唑醇WP 18.75、9.375、4.687 5、2.343 75、1.171 875 μg/mL,30%醚菌酯SC 22.5、11.25、5.625、2.812 5、1.406 25 μg/mL,10%多氧霉素WP 20、10、5、2.5、1.25 μg/mL,70%惡霉靈SP 14、7、3.5、1.75、0.875 μg/mL。

    農(nóng)藥毒力計(jì)算公式如下:

    相對(duì)抑制率=(對(duì)照組菌落直徑-處理組菌落直徑)/(對(duì)照組菌落直徑-菌餅直徑)×100%[21];

    采用Excel 軟件,以相對(duì)抑制率(y)為縱坐標(biāo),將藥劑質(zhì)量濃度換算成質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)(x)作為橫坐標(biāo),計(jì)算出線性回歸方程(即毒力公式,y=a+bx)和r值,并根據(jù)毒力公式計(jì)算各種農(nóng)藥的有效中濃度(EC50)[22];

    毒力倍數(shù)=EC50最高值/其他藥劑EC50值,其中EC50值最高藥劑的毒力倍數(shù)為1。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 病原菌鑒定結(jié)果

    2.1.1 常規(guī)鑒定 直接鏡檢:分生孢子器黑褐色,圓形,埋生于芝麻莖稈表皮,直徑為112~189 μm,平均為147.98 μm;成熟的分生孢子器壓破后,溢出大量分生孢子,分生孢子長(zhǎng)橢圓形或短棒狀,單胞無色,大小為(17.28 ~25.2)μm ×(7.2 ~11.3)μm,平均為21.6 μm×8.21 μm。將成熟的菌核壓破,有大量油球溢出。

    培養(yǎng)性狀:PDA培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)迅速,菌絲由接種菌塊處沿培養(yǎng)基表面向四周放射狀生長(zhǎng),氣生菌絲初呈白色,48 h后菌落中間至周圍顏色由白色向灰白色過度,72 h產(chǎn)生黑色素,使培養(yǎng)基變黑,顏色從中間向周圍逐漸變淡。在30 ℃條件下培養(yǎng)7~8 d即可形成大量菌核,但不形成分生孢子器。顯微觀察:菌絲有隔,褐色;菌核較小,球形、橢圓形或不規(guī)則形,黑色或深褐色,大小(82.5~120)μm×(67.5~120)μm,直徑為92.95~167.31 μm,平均為125.7 μm。

    2.1.2 分子鑒定 測(cè)序結(jié)果顯示,病原菌ITS序列為583 bp。經(jīng)DNAman比對(duì),其與MacrophominaphaseolinaR-4242菌株同源性為100%。

    綜合2.1.1和2.1.2結(jié)果,將菌株鑒定為菜豆殼球孢[M.phaseolina(Maubl.) Ashby]。

    2.2 病原菌生物學(xué)特性觀察結(jié)果

    2.2.1 不同培養(yǎng)基對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響 芝麻莖點(diǎn)枯病菌在PSA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好,菌落突起,菌絲白色致密呈絮狀、生長(zhǎng)旺盛,菌落直徑為79.8 mm;其次為PDA培養(yǎng)基和PSA+芝麻莖稈煎汁,菌落直徑分別為76.4 mm和76.0 mm;燕麥片培養(yǎng)基、PDA+芝麻莖稈煎汁和查彼培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)比較快,但菌落質(zhì)地稀??;葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基、Bilai’s、高氏1號(hào)培養(yǎng)基和芝麻莖稈煎汁培養(yǎng)基上,菌落生長(zhǎng)較慢而且質(zhì)地稀薄。PSA培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、PSA+芝麻莖稈煎汁、燕麥片培養(yǎng)基、PDA+芝麻莖稈煎汁和查彼培養(yǎng)基上的菌落直徑極顯著大于葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基、Bilai’s、高氏1號(hào)培養(yǎng)基和芝麻莖稈煎汁培養(yǎng)基上的菌落直徑(表1)。

    表1 10種培養(yǎng)基對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響

    注:同列不同小寫字母和大寫字母分別表示在5%、1%水平上差異顯著、極顯著,下同。

    2.2.2 不同碳源和氮源對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響 從表2可以看出,碳源對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌的生長(zhǎng)影響較大,以檸檬酸鈉為碳源的培養(yǎng)基上菌落沒有生長(zhǎng),以蔗糖為碳源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好,菌落直徑為64.0 mm。以蔗糖為碳源的培養(yǎng)基與其他8種碳源培養(yǎng)基之間差異極顯著,其他8種培養(yǎng)基上菌落直徑均不超過50 mm。因此,培養(yǎng)芝麻莖點(diǎn)枯病菌的碳源以蔗糖最好。

    表2 不同碳源和氮源對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響

    氮源比較試驗(yàn)結(jié)果顯示,以胰蛋白胨、牛肉膏、硝酸鉀、硫酸銨和硝酸鈉為氮源的培養(yǎng)基之間差異不顯著,菌落直徑分別為69.2、67.2、66.8、65.0、64.0 mm,以草酸銨為氮源的培養(yǎng)基上菌落生長(zhǎng)最差,菌落直徑為43.6 mm,與其他氮源培養(yǎng)基差異顯著。

    2.2.3 不同溫度和pH值對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響 從圖1A可以看出,5 ℃以上菌落開始生長(zhǎng),30 ℃和28 ℃下菌落生長(zhǎng)量差異不顯著,菌落直徑分別為64.4 mm和60.4 mm,30 ℃與25、35、22、20、15、10、5 ℃之間差異極顯著,后者菌落直徑分別為54.6 mm、50.8 mm、50.0 mm、38.6 mm、21.8 mm、9.8 mm、6.0 mm,因此芝麻莖點(diǎn)枯病菌的最適生長(zhǎng)溫度是28~30 ℃。

    芝麻莖點(diǎn)枯病菌在pH值5.02~11.00內(nèi)均可生長(zhǎng),pH值為5.02時(shí)生長(zhǎng)最快,菌落直徑達(dá)到70.2 mm,與其他pH值條件下的差異達(dá)到顯著水平,pH值6.00~6.22時(shí)菌落直徑達(dá)到60.0~61.8 mm(圖1B)。因此芝麻莖點(diǎn)枯病菌最適合在微酸性的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)??紤]到試驗(yàn)的方便性,一般不需要調(diào)節(jié)pH值。

    不同小寫、大寫字母分別表示差異達(dá)5%、1%水平圖1 不同溫度和pH值對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響

    2.2.4 菌絲致死溫度的確定 從表3可以看出,病原菌菌塊在59 ℃處理10 min后,菌絲在PSA平板培養(yǎng)基上不生長(zhǎng),因此確定芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌絲致死溫度為59 ℃(處理10 min)。

    表3 芝麻莖點(diǎn)枯病菌的致死溫度

    注:+表示菌絲或菌核存活,-表示菌絲或菌核死亡。

    2.2.5 不同光照條件對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌絲生長(zhǎng)的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明,在連續(xù)光照、12 h光暗交替和連續(xù)黑暗條件下,氣生菌絲均發(fā)達(dá)。12 h光暗交替、連續(xù)黑暗和連續(xù)光照條件下菌落直徑分別為87.4 mm、72.0 mm和72.8 mm,12 h光暗交替處理與其他2個(gè)處理差異極顯著(表4),表明光照對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)影響很大。因此在莖點(diǎn)枯病菌培養(yǎng)時(shí)光照條件可以選用12 h光暗交替。

    表4 不同光照條件對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌落生長(zhǎng)的影響

    2.3 9種殺菌劑對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌的抑制作用

    從表5可以看出,9種殺菌劑對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌絲的抑制效果有很大的差異,烯唑醇、多菌靈、氟硅唑抑制作用最強(qiáng),EC50分別為0.06、0.18、0.21 μg/mL,毒力分別是惡霉靈的560.17、186.72、160.05倍;其后依次為醚菌酯、甲基硫菌靈、多氧霉素、代森錳鋅、福美雙,EC50分別為1.15、1.48、4.07、 6.98、9.18 μg/mL;惡霉靈抑制作用最弱,EC50為33.61 μg/mL,其毒力最小,不適合于大田防治。

    表5 9種殺菌劑對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌的毒力測(cè)定結(jié)果

    3 結(jié)論與討論

    對(duì)菌絲生長(zhǎng)特性研究結(jié)果表明,芝麻莖點(diǎn)枯病菌菌絲生長(zhǎng)對(duì)氮源利用范圍較廣,但對(duì)培養(yǎng)基、溫度、pH 值、碳源及光照均具有一定的選擇性。同時(shí),病菌菌絲致死溫度為59 ℃(10 min)??梢姡【z對(duì)生長(zhǎng)和生存條件都有一定的要求,這為深入研究該病害的發(fā)生規(guī)律和防治方法提供了理論依據(jù)?,F(xiàn)有的菜豆殼球孢研究報(bào)道中,無關(guān)于人工培養(yǎng)基上產(chǎn)孢的報(bào)道[3],因此生物學(xué)特性方面未進(jìn)行病菌分生孢子的研究。

    目前,我國(guó)芝麻種植中防治莖點(diǎn)枯病主要使用的藥劑為甲基硫菌靈、多菌靈、退菌特、代森錳鋅等,在芝麻封頂前后進(jìn)行田間藥劑噴霧防治[10]。本研究證明,芝麻莖點(diǎn)枯病菌對(duì)三唑類殺菌劑敏感,烯唑醇對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌的毒力約是甲基硫菌靈的25倍,是代森錳鋅的116倍,氟硅唑的毒力與廣譜殺菌劑多菌靈基本相當(dāng)。三唑類藥劑以其優(yōu)異的抑菌作用以及對(duì)植物生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)作用,將逐步取代多菌靈、代森錳鋅等常規(guī)殺菌劑成為防治芝麻莖點(diǎn)枯病的首選藥劑。室內(nèi)殺菌劑毒力測(cè)定結(jié)果只能說明此種殺菌劑在室內(nèi)離體條件下對(duì)芝麻莖點(diǎn)枯病菌有一定的殺菌活性,而田間防治效果受到很多因素影響,因此在應(yīng)用于大田防治前還有待于進(jìn)一步的田間試驗(yàn)證實(shí)其效果。

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    Biological Characteristics of the Pathogen of Sesame Stem Blight and Inhibitory Effects of Nine Fungicides

    NI Yunxia,WANG Fei,LIU Yuxia,LIU Xintao,ZHAO Hui,LIU Hongyan*
    (Institute of Plant Protection,Henan Academy of Agricultural Sciences/IPM Key Laboratory in Southern Part of North China for Ministry of Agriculture/Henan Key Laboratory of Crop Pest Control,Zhengzhou 450002,China)

    The biological characteristics of the pathogen of sesame stem blight and the indoor toxicity of nine fungicides were studied.Using morphological identification and molecular identification,the isolated strain was identified asMacrophominaphaseolina(Maubl.) Ashby.The results of biological characteristics onM.phaseolinashowed that the suitable medium for the mycelium growth was PSA,the most suitable carbon source and nitrogen source were sucrose and tryptone;the optimum temperature for the mycelium growth was 28—30 ℃,and the mycelium death temperature was 59 ℃;the optimum pH value for the mycelium growth was 5.02—6.22;the suitable light condition for the mycelium growth was L∶D=12∶12.The toxicity of nine kinds of fungicides against theM.phaseolinawas measured by growth velocity in lab.The results revealed that the inhibitory effects of nine fungicides had great difference on the mycelium growth.12.5% Diniconazole WP,50% Carbendazim WP and 40% Flusilazole EC had higher inhibitory effect.The EC50values of these fungicides were 0.06 μg/mL,0.18 μg/mL and 0.21 μg/mL.The inhibitory effect of 70% Hymexazol SP was the lowest,with EC50value of 33.61 μg/mL.

    sesame; stem blight;Macrophominaphaseolina; biological characteristics; fungicide; indoor toxicity

    2015-11-20

    國(guó)家芝麻產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目(CARS-15-1-05);河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院自主創(chuàng)新專項(xiàng)基金項(xiàng)目

    倪云霞(1980-),女,江蘇溧水人,助理研究員,碩士,主要從事植物病害防治技術(shù)研究。 E-mail:nyx2008@163.com

    *通訊作者:劉紅彥(1964-),男,河南嵩縣人,研究員,博士,主要從事植物病蟲害生物防治技術(shù)研究。 E-mail:liuhy1219@163.com

    S435.653

    A

    1004-3268(2016)06-0072-05

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