中華獼猴桃果實化學(xué)成分的研究

馬鳳愛， 吳德玲， 許鳳清， 張 偉， 任亞碩（.安徽中醫(yī)藥高等專科學(xué)校，安徽蕪湖24000；2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽合肥23002；3.安徽省現(xiàn)代中藥重點實驗室，安徽合肥23002）

?

中華獼猴桃果實化學(xué)成分的研究

馬鳳愛1， 吳德玲2，3*， 許鳳清2，3， 張 偉2，3， 任亞碩2，3
（1.安徽中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，安徽蕪湖241000；2.安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽合肥230012；3.安徽省現(xiàn)代中藥重點實驗室，安徽合肥230012）

摘要：目的 對中華獼猴桃Actinidia Chinensis P1anch.果實的化學(xué)成分進(jìn)行研究。方法 果實的乙酸乙酯提取物采用硅膠、Sephadex LH-20凝膠、反相ODS柱等方法進(jìn)行分離純化，根據(jù)所得化合物的波譜數(shù)據(jù)確定其結(jié)構(gòu)。結(jié)果 從中分離得到8個化合物，分別鑒定為3β-乙酰氧基-12-烯-28-烏蘇酸（1）、2α，3β-二羥基-12-烯-28-烏蘇酸（2）、2α，3α-二羥基-12-烯-28-烏蘇酸（3）、2α，3α-二羥基-12-烯-28-齊墩果酸（4）、齊墩果酸（5）、烏蘇酸（6）、胡蘿卜苷（7）、β-谷甾醇（8）。結(jié)論 化合物1～4為首次從中華獼猴桃果實中分離得到。

關(guān)鍵詞：中華獼猴桃；果實；化學(xué)成分

KEY W 0RDS：Actinidia Chinensis P1anch.；fruits；chemica1 constituents

中華獼猴桃為獼猴桃科獼猴桃屬植物中華獼猴桃Actinidia Chinensis P1anch.的果實［1］。中醫(yī)認(rèn)為［2-3］，獼猴桃味酸，甘寒，無毒，具有止暴渴、解煩熱、壓丹石、調(diào)中下氣、下淋石熱壅的功效，臨床用于治療骨節(jié)風(fēng)，癱緩不隨，長年白發(fā)等病癥?，F(xiàn)代研究證明，獼猴桃果汁具有多種藥理活性，如抗腫瘤［4］、抗氧化［5-6］、免疫調(diào)節(jié)［7］、降血脂［8］和保肝［9］等。目前，相關(guān)研究主要集中在果汁及果脯的加工方面，但對其化學(xué)成分的文獻(xiàn)報道較少。在前期研究的基礎(chǔ)上［10］，本實驗進(jìn)一步利用硅膠、IP-18反相、MCI、Sephadex LH-20凝膠柱等色譜技術(shù)對中華獼猴桃果實的乙酸乙酯部位展開研究，結(jié)果從中分離得到8個化合物。然后通過1H-NMI，13C-NMI等波譜技術(shù)確定其結(jié)構(gòu)，分別鑒定為3β-乙酰氧基-12-烯-28-烏蘇酸（1）、2α，3β-二羥基-12-烯-28-烏蘇酸（2）、2α，3α-二羥基-12-烯-28-烏蘇酸（3）、2α，3α-二羥基-12-烯-28-齊墩果酸（4）、齊墩果酸（5）、烏蘇酸（6）、胡蘿卜苷（7）、β-谷甾醇（8）。

1 儀器與試劑

WIS-1B數(shù)字熔點測定儀（溫度計未校正，上海索光光電技術(shù)有限公司）；Bruker AV 400、600 MHz核磁共振儀，TMS為內(nèi)標(biāo)（德國Bruker公司）；APIQSTAI Pu1sari液相四級桿飛行時間質(zhì)譜儀（加拿大MDS Sciex公司）；Waters Auto Purification HPLC 2545-2489制備色譜儀（美國Waters公司）；EYELA SB-1100旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（東京理化器械株式會社）；AB135-S分析天平（十萬分之一，瑞士Mett1er-To1edo公司）。Sephadex LH-20凝膠（瑞典Amersham Biosciences公司）；薄層層析板、柱色譜用硅膠（200～300目，青島海洋化工有限公司）。所用試劑均為分析純（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；顯色劑為10%硫酸乙醇溶液。

中華獼猴桃采自陜西省周至縣，經(jīng)安徽中醫(yī)藥大學(xué)周建理教授鑒定為獼猴桃科植物中華獼猴桃Actinidia Chinensis P1anch.的果實。

2 提取與分離

取新鮮成熟的中華獼猴桃果實80 kg，切塊榨汁，果汁加1.5倍蒸餾水稀釋，乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮，回收溶劑，得到乙酸乙酯部位浸膏70 g。浸膏用硅膠拌樣，硅膠柱層析，石油醚-丙酮梯度洗脫。其中，石油醚-丙酮（7∶3）部分反復(fù)經(jīng)硅膠柱色譜分離純化，得到化合物1（5.2 mg）；石油醚-丙酮（6∶4）部分反復(fù)經(jīng)硅膠柱色譜和高壓制備色譜（80%～90%甲醇）分離純化，得到化合物2（2.6 mg）、3（2.7 mg）；石油醚-丙酮（9∶1～8∶2）部分反復(fù)經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜和硅膠柱色譜分離純化，得到化合物4（1.5 mg）、5（2.5 mg）、6（3.0 mg）、7（3.4 mg）和8（15 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色結(jié)晶（三氯甲烷-甲醇），mp 252～254℃。ESI-MS m/z：499［M＋H］＋，分子式C32H50O4。1H-NMI（400 MHz，DMSO-d6）δ：1.91，1.52，1.26，1.20，1.02，0.86，0.75（7 ×CH3，s，21H），5.15（1H，s，H-12），4.41 （1H，m，H-3α），2.10（1H，J＝10.2 Hz，H-18）。13C-NMI（100 MHz，DMSO-d6）δ：37.7（C-1），22.8（C-2），79.9（C-3），37.2（C-4），54.5 （C-5），17.8（C-6），32.5（C-7），39.5（C-8），46.8（C-9），36.4（C-10），18.6（C-11），124.4 （C-12），138.2（C-13），41.6（C-14），27.5（C-15），23.8（C-16），48.5（C-17），52.4（C-18），38.4（C-19），38.4（C-20），30.2（C-21），36.3 （C-22），27.8（C-23），16.4（C-24），15.1（C-25），16.8（C-26），23.2（C-27），178.2（C-28），17.0（C-29），21.0（C-30），170.0（-CH3CO），21.0（-CH3CO）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11-12］基本一致，確定化合物1為3β-乙酰氧基-12-烯-28-烏蘇酸。

化合物2：白色粉末（三氯甲烷-甲醇），mp 251～253℃。ESI-MS m/z：473［M＋H］＋，分子式C30H48O4。1H-NMI（600 MHz，pyridine-d5）δ：1.20，1.07，1.04，0.98，0.97，0.94，0.93（7× CH3，s，21H），5.45（1H，s，H-12），3.40（1H，d，J＝9.2 Hz，H-3α），2.61（1H，d，J＝11.2 Hz，H-18）。13C-NMI（150 MHz，pyridine-d5）δ：47.8（C-1），68.4（C-2），83.7（C-3），39.7（C-4），55.7（C-5），18.7（C-6），33.3（C-7），39.9 （C-8），47.9（C-9），38.3（C-10），23.6（C-11），125.4（C-12），139.2（C-13），42.4（C-14），30.9（C-15），24.7（C-16），47.9（C-17），53.4 （C-18），39.3（C-19），39.2（C-20），28.5（C-21），37.3（C-22），29.2（C-23），16.8（C-24），17.3（C-25），17.4（C-26），23.7（C-27），179.8 （C-28），17.6（C-29），21.3（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］基本一致，確定化合物2為2α，3β-二羥基-12-烯-28-烏蘇酸。

化合物3：白色粉末（三氯甲烷-甲醇）。ESIMS m/z：473［M＋H］＋，分子式為C30H48O4。1HNMI（600 MHz，pyridine-d5）δ：1.34，1.26，1.10，1.03，0.95，0.94，0.92（7×CH3，s，21 H），5.44（1H，s，H-12），2.61（1H，d，J＝11.3 Hz，H-18）。13C-NMI（150 MHz，pyridine-d5）δ：42.8（C-1），65.9（C-2），79.2（C-3），38.6 （C-4），48.5（C-5），18.3（C-6），33.3（C-7），40.0（C-8），47.7（C-9），38.4（C-10），23.5（C-11），125.4（C-12），139.1（C-13），42.4（C-14），30.9（C-15），24.7（C-16），47.9（C-17），53.4（C-18），39.3（C-19），39.2（C-20），28.5 （C-21），37.3（C-22），29.3（C-23），22.1（C-24），16.6（C-25），17.3（C-26），23.7（C-27），179.8（C-28），17.3（C-29），21.2（C-30）。由以上數(shù)據(jù)可知，化合物3與化合物2的結(jié)構(gòu)母核一致，但其C5的化學(xué)位移值與后者相比，向高場方向位移了7.2，而C24向低場方向位移了5.3，因此3-OH為α構(gòu)型。而且，與文獻(xiàn)［13-14］基本一致，確定化合物3為2α，3α-二羥基-12-烯-28-烏蘇酸。

化合物4：白色粉末（三氯甲烷-甲醇）。ESIMS m/z：473［M＋H］＋，分子式C30H48O4。1H-NMI （600 MHz，pyridine-d5）δ：1.27，1.25，1.07，1.00，0.99，0.98，0.93（7×CH3，s，21 H），5.44（1H，d，J＝3.6 Hz，H-12），3.38（1H，dd，J＝3.5，14.0 Hz，H-18）。13C-NMI（150 MHz，pyridine-d5）δ：46.3（C-1），68.5（C-2），83.7（C-3），39.7（C-4），55.8（C-5），18.7（C-6），29.8（C-7），39.7（C-8），48.1（C-9），38.4 （C-10），23.6（C-11），122.3（C-12），144.8（C-13），42.1（C-14），28.2（C-15），23.8（C-16），46.6（C-17），41.9（C-18），47.6（C-19），30.8 （C-20），34.1（C-21），33.1（C-22），29.2（C-23），17.6（C-24），17.4（C-25），16.7（C-26），26.0（C-27），180.5（C-28），23.5（C-29），33.1 （C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［15-16］基本一致，確定化合物4為2α，3α-二羥基-12-烯-28-齊墩果酸。

化合物5：白色粉末（三氯甲烷-甲醇），mp 308～310℃，分子式C30H48O3。用3種不同系統(tǒng)展開，經(jīng)TLC檢識發(fā)現(xiàn)，其I f值與齊墩果酸對照品一致，而且混合后熔點不下降，確定化合物5為齊墩果酸。

化合物6：白色粉末（三氯甲烷-甲醇），mp 283～285℃，分子式C30H48O3。用3種不同系統(tǒng)展開，經(jīng)TLC檢識發(fā)現(xiàn)，其I f值與烏蘇酸對照品一致，而且混合后熔點不下降，確定化合物6為烏蘇酸。

化合物7：白色粉末（三氯甲烷-甲醇），mp 286～287℃。用3種不同系統(tǒng)展開，經(jīng)TLC檢識發(fā)現(xiàn)，其I f值與胡蘿卜苷對照品一致，而且混合后熔點不下降，確定化合物7為胡蘿卜苷。

化合物8：白色針狀晶體（石油醚-丙酮），mp 140～142℃。經(jīng)TLC檢識發(fā)現(xiàn)，其I f值與β-谷甾醇對照品一致，而且混合后熔點不下降，確定化合物8為β-谷甾醇。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 中國科學(xué)院《中國植物志》編輯委員會.中國植物志：第49卷第2分冊［M］.北京：科學(xué)出版社，1984：261-263.

［2］ 唐·陳藏器.本草拾遺［M］.合肥：安徽科學(xué)技術(shù)出版社，2002：278.

［3］ 明·李時珍.本草綱目［M］.北京：中醫(yī)古籍出版社，1994：802-803.

［4］ 康大力，張洪利.獼猴桃屬植物化學(xué)成分及其生物活性研究進(jìn)展［J］.中成藥，2008，30（1）：116-119.

［5］ 張 燕.獼猴桃濃縮物抗氧化能力及免疫調(diào)節(jié)作用的實驗研究［D］.青島：青島大學(xué)，2003.

［6］ 楊冬梅，楊 娟，林延鵬.SOD獼猴桃果汁對健康婦女血清及紅細(xì)胞丙二醛含量的影響［J］.中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2002，5（3）：215-216.

［7］ 李香華，王鴻翔，趙愛明，等.補(bǔ)充獼猴桃飲料對大強(qiáng)度運動后機(jī)體免疫機(jī)能影響的觀察［J］.中國運動醫(yī)學(xué)雜志，2003，22（2）：187-188.

［8］ 何素琴，曹興亞.獼猴桃果汁降血脂作用的動物試驗［J］.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1999，14（3）：20-21.

［9］ 黃倬偉，熊筱娟，張國全，等.獼猴桃果汁對小鼠實驗性肝損傷的影響［J］.中藥通報，1987，12（3）：52-54.

［10］ 馬鳳愛，吳德玲，許鳳清，等.獼猴桃化學(xué)成分預(yù)實驗［J］.廣州化工，2014，42（12）：97-98.

［11］ 王福東，丁 蘭，汪漢卿.藍(lán)萼香茶菜三萜成分的研究［J］.中國中藥雜志，2005，30（24）：1929-1932.

［12］ 崔 瑩.中華獼猴桃根的化學(xué)成分研究［D］.楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2007.

［13］ 周志強(qiáng).裸花紫珠化學(xué)成分的研究［D］.南昌：南昌大學(xué)，2013.

［14］ 周雪峰.冷水七、中華獼猴桃根的物質(zhì)基礎(chǔ)研究［D］.武漢：華中科技大學(xué)，2008.

［15］ 徐一新.中藥藤梨根和貓人參活性成分研究［D］.上海：第二軍醫(yī)大學(xué)，2010.

［16］ 崔 瑩，張雪梅，陳紀(jì)軍，等.中華獼猴桃根的化學(xué)成分研究［J］.中國中藥雜志，2007，32（16）：1663-1665.

Chem ical constituents from the fruits of Actinidia Chinensis Planch.

MA Feng-ai1， WU De-1ing2，3 *， XU Feng-qing2，3， ZHANGWei2，3， IEN Ya-shuo2，3

（I.AnhuiCollegeof Traditional ChineseMedicine，Wuhu 24IOOO，China；2.Collegeof Pharmacy，AnhuiUniversity of ChineseMedicine，Hefei23OOI2，China；3.Anhui Provincial Key Laboratory of Modern Chinese Medicine，Hefei23OOI2，China）

ABSTRACT：AIM To study the chemica1 constituents from the fruits of Actinidia Chinensis P1anch.METH-0DS The ethy1acetate extract of fruits was iso1ated and purified by si1ica，Sephadex LH-20 and ODS co1umn. The structures of obtained compoundswere e1ucidated by their spectra1data.RESULTS Eight compoundswere iso1ated and identified as 3β-acety1oxy-urso1ic acid（1），2α，3β-dihydroxy-urs-12-en-28-oic acid（2），2α，3αdihydroxy-urs-12-en-28-oic acid（3），2α，3α-dihydroxy-o1ean-12-en-28-oic acid（4），o1ean acid（5），urso1ic acid（6），daucostero1（7），β-sitostero1（8）.C0NCLUSI0N Compounds 1-4 are iso1ated from the fruits of A. Chinensis for the first time.

*通信作者：吳德玲（1973—），男，碩士，教授，從事中藥活性成分研究。Te1：（0551）68129066，E-mai1：d1wu7375@sina.com

作者簡介：馬鳳愛（1990—），女，碩士，從事中藥活性成分研究。Te1：13695531439，E-mai1：mafengai0920@126.com

收稿日期：2015-04-07

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.024

中圖分類號：I284.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1001-1528（2016）03-0591-03