細(xì)葉杜香化學(xué)成分的研究

張洪財(cái)， 王 宇， 霍 研， 劉樹(shù)民（.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，黑龍江哈爾濱50040；.哈爾濱市第五醫(yī)院，黑龍江哈爾濱50040；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥物安全性評(píng)價(jià)中心，黑龍江哈爾濱50040）

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細(xì)葉杜香化學(xué)成分的研究

張洪財(cái)1， 王 宇1， 霍 研2， 劉樹(shù)民3 *
（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，黑龍江哈爾濱150040；2.哈爾濱市第五醫(yī)院，黑龍江哈爾濱150040；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥物安全性評(píng)價(jià)中心，黑龍江哈爾濱150040）

摘要：目的 研究細(xì)葉杜香Ledum palustre L.的化學(xué)成分。方法 細(xì)葉杜香的正丁醇提取物采用硅膠、ODS柱、HPLC柱及重結(jié)晶進(jìn)行分離純化，通過(guò)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定所得化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果 從中分離得到8個(gè)化合物，分別鑒定為秦皮苷（1）、6-甲氧基香豆素-7-β-D-葡萄糖苷（2）、槲皮素（3）、β-谷甾醇（4）、山奈酚-3-β-D-葡萄糖苷（5）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（6）、f1avano1g1ycoside（7）、蘆?。?）。結(jié)論 化合物1、2和7為首次從該植物中得到。

關(guān)鍵詞：細(xì)葉杜香；化學(xué)成分；分離鑒定

KEY W 0RDS：Ledum palustre L.；chemica1 constituents；iso1ation and identification

細(xì)葉杜香Ledum palustre L.為杜鵑花科杜香屬藥用植物，又名喇叭茶、白山苔、絆腳絲等，主要分布在中國(guó)東北、日本、西伯利亞、歐洲等地，以我國(guó)大興安嶺地區(qū)數(shù)量最多。細(xì)葉杜香具有止咳、平喘、降壓、擴(kuò)張血管、抑制真菌和止癢等藥理作用，用于治療急慢性支氣管炎、流感、皮膚病等疾?。?-7］。目前，對(duì)其揮發(fā)油研究的報(bào)道較多，而其他成分相對(duì)較少。本實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)葉杜香正丁醇提取物進(jìn)行了化學(xué)成分分離，共鑒定出8個(gè)化合物，分別為秦皮苷（1）、6-甲氧基香豆素-7-β-D-葡萄糖苷（2）、槲皮素（3）、β-谷甾醇（4）、山奈酚-3-β-D-葡萄糖苷（5）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（6）、f1avano1g1ycoside（7）、蘆丁（8）。

1 儀器與材料

AV400超導(dǎo)核磁共振光譜儀（德國(guó)Bruker公司）；Thermo Hypersi1ODS Agi1ent 1100制備高效液相色譜儀，包括C18制備型色譜柱（10 mm×25 cm，10 μm）、Diamonsi1C18分析型色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）（美國(guó)Agi1ent公司）；正相硅膠（青島海洋化工有限公司，100～120、200～300目）。所用試劑均為分析純（天力化工有限公司）。

細(xì)葉杜香于2012年10月采自大興安嶺地區(qū)加格達(dá)奇郊外，經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定學(xué)教研室老師鑒定為細(xì)葉杜香Ledum palustre L.的干燥地上部分，標(biāo)本（編號(hào)20121002）保存于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中藥現(xiàn)代給藥系統(tǒng)研究室。

2 提取分離

取細(xì)葉杜香地上部分，粉碎成小段（6 kg），乙醇回流提取，采用經(jīng)典溶劑萃取法，收集正丁醇部位104 g。將其進(jìn)行化學(xué)成分分離，得到化合物1（24 mg）、2（23 mg）、3（31 mg）、4（15 mg）、5（26 mg）、6（37 mg）、7（18 mg）、8（19 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色粉末，易溶于甲醇，Mo1ish反應(yīng)呈紫色環(huán)。HI-MS m/z：371.094 2［M＋H］＋，分子量370，分子式C16H18O10，不飽和度為8。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.22（d，J＝9.4 Hz，H-3），7.85（d，J＝9.4 Hz，H-4），6.95 （s，H-5），3.89（s，-CH3O），4.96（d，J＝7.8 Hz）為葡萄糖端基質(zhì)子，3.26～3.79為糖的其他質(zhì)子信號(hào)。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：163.7 （C-2），112.8（C-3），146.5（C-4），106.2（C-5），146.3（C-6），147.7（C-7），144.5（C-8），133.3（C-9），112.0（C-10），103.1（C-1＇），74.5 （C-2＇），77.3（C-3＇），71.3（C-4＇），78.5（C-5＇），62.4（C-6＇），56.9（-CH3O）。與文獻(xiàn)［8］比較，鑒定該化合物為秦皮苷（fraxin）。

化合物2：淡黃色粉末，易溶于甲醇，Mo1ish反應(yīng)呈紫色環(huán)。HI-MS m/z：355.097 1［M＋H］＋，分子量354，分子式C16H18O9，不飽和度為8。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.29（d，J＝9.5 Hz，H-3），7.88（d，J＝9.5 Hz，H-4），3.88 （s，-CH3O），7.17（s，H-5），7.20（s，H-8），5.05（d，J＝7.7 Hz）為葡萄糖端基質(zhì)子。13C-NMI （100 MHz，CD3OD）δ：163.5（C-2），114.5（C-3），145.7（C-4），110.7（C-5），151.7（C-6），148.2（C-7），105.2（C-8），150.7（C-9），114.5 （C-10），102.0（C-1＇），74.7（C-2＇），77.8（C-3＇），71.2（C-4＇），78.4（C-5＇），62.4（C-6＇），57.0（-CH3O）。與文獻(xiàn)［9］比較，鑒定該化合物為6-甲氧基香豆素-7-β-D-葡萄糖苷（6-methoxycoumarin-7-β-D-g1ucopyranoside）。

化合物3：淡黃色結(jié)晶，易溶于甲醇、乙醇等有機(jī)溶劑，鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽(yáng)性，Mo1ish反應(yīng)呈陰性。HI-MS m/z：303.045 3［M＋H］＋，不飽和度為12。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.23（d，J＝2.2 Hz，H-8）和6.39（d，J＝2.2 Hz，H-6）為苯環(huán)上的氫信號(hào)，5.27（d，J＝7.6 Hz）為葡萄糖上的端基氫信號(hào)，6.85（d，J＝8.5 Hz，H-5＇）、7.56（dd，J＝2.3，8.5 Hz，H-6＇）和7.72 （d，J＝2.3 Hz，H-2＇）處信號(hào)組成ABX耦合系統(tǒng)，說(shuō)明苯環(huán)具有1、3、4位基團(tuán)取代的結(jié)構(gòu)片段。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：159.2（C-2），135.8（C-3），179.2（C-4），163.3（C-5），99.8 （C-6），166.2（C-7），94.7（C-8），158.5（C-9），105.7（C-10），123.3（C-1＇），117.3（C-2＇），145.9（C-3＇），149.5（C-4＇），116.2（C-5＇），123.3（C-6＇）。與文獻(xiàn)［10］比較，鑒定該化合物為槲皮素（quercetin）。

化合物4：無(wú)色針狀結(jié)晶，易溶于氯仿。HIESI-MS m/z：413.265 1［M-H］-。1H-NMI（400 MHz，CDC13）δ：0.65（s，H-18）、0.81（s，H-19）、0.82（t，J＝6.3 Hz，H-21）、0.84（d，J＝6.4 Hz，H-26）、0.92（d，J＝6.4 Hz，H-27）、1.03（d，J＝6.7 Hz，H-28）分別為高場(chǎng)區(qū)6個(gè)甲基信號(hào)，1.05～2.36（m）為其他質(zhì)子信號(hào)，5.16 （d，J＝4.4 Hz，H-7）、5.34（m，H-23）為雙鍵上質(zhì)子信號(hào)。結(jié)合13C-NMI（100 MHz，CDC13）中的碳信號(hào)，并且與β-谷甾醇對(duì)照品TLC上的I f值相同。與文獻(xiàn)［11］比較，鑒定該化合物為β-谷甾醇（β-Sitostero1）。

化合物5：淡黃色無(wú)定型粉末，易溶于甲醇。HI-MS m/z：449.101 4［M＋H］＋，分子式C21H20O11，不飽和度為12。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.19（d，J＝2.1 Hz，H-6），6.39（d，J＝2.1 Hz，H-8），8.05（d，J＝8.9 Hz，H-2＇，6＇），6.88 （d，J＝8.9 Hz，H-3＇，5＇），5.25（d，J＝7.7 Hz）為葡萄糖端基質(zhì)子。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：159.1（C-2），135.5（C-3），179.5（C-4），163.1（C-5），99.9（C-6），166.1（C-7），94.8 （C-8），158.5（C-9），105.7（C-10），122.8（C-1＇），132.3（C-2＇，6），116.1（C-3＇，5＇），161.6（C-4＇），104.0（C-1"），75.8（C-2"），78.1（C-3"），71.4（C-4"），78.4（C-5"），62.6 （C-6"）。與文獻(xiàn)［12］比較，鑒定該化合物為山奈酚-3-β-D-葡萄糖苷（kaempfero1-3-β-D-g1ucoside）。

化合物6：淡黃色結(jié)晶，mp 238～240℃，易溶于甲醇，鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈陽(yáng)性，Mo1ish反應(yīng)呈陽(yáng)性。HI-MS m/z：465.102 6［M＋H］＋，分子式C21H20O12，不飽和度為12。1H-NMI（400 Hz，CD3OD）δ：6.21（d，J＝2.2 Hz）和6.37（d，J＝2.2 Hz）為黃酮母核A環(huán)上的H-8和H-6信號(hào)，5.24（d，J＝7.5 Hz）為葡萄糖上的端基氫信號(hào)，6.87（d，J＝8.5 Hz，H-5＇）、7.57（dd，J＝2.3，8.5 Hz，H-6＇）和7.71（d，J＝2.3 Hz，H-2＇）處信號(hào)組成ABX耦合系統(tǒng)，說(shuō)明苯環(huán)具有1、3、4位基團(tuán)取代的結(jié)構(gòu)片段。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：159.1（C-2），135.4（C-3），179.4（C-4），163.2（C-5），99.7（C-6），166.1 （C-7），94.5（C-8），158.4（C-9），105.6（C-10），123.2（C-1＇），117.4（C-2＇），145.8（C-3＇），149.6（C-4＇），116.1（C-5＇），123.2（C-6＇），104.1（C-1"），78.5（C-2"），78.3（C-3"），75.5（C-4"），71.3（C-5"），62.4（C-6"）。與文獻(xiàn)［13］比較，鑒定該化合物為槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（quercetin-3-O-β-D-g1ucoside）。

化合物7：淡黃色無(wú)定型粉末。HI-ESI-MS m/z：595.162 1［M＋H］＋，分子式C27H30O15，不飽和度為13。1H-NMI（400 MHz，CD3OD）δ：6.21 （d，J＝2.1 Hz，H-6），6.40（d，J＝2.1 Hz，H-8），8.06（d，J＝8.9 Hz，H-2＇，6＇），6.88（d，J＝8.9 Hz，H-3＇，5＇），5.12（d，J＝7.5 Hz，H-1＇）為葡萄糖端基質(zhì)子信號(hào)，4.50（brs，H-1"）為鼠李糖端基質(zhì)子信號(hào)，3.15～3.68為糖上其他質(zhì)子信號(hào)。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：149.4（C-2），135.5（C-3），179.4（C-4），161.5（C-5），100.0（C-6），166.2（C-7），94.9（C-8），157.8 （C-9），105.1（C-10），122.8（C-1＇），132.4（C-2＇，6＇），122.8（C-3＇，5＇），158.6（C-4＇），105.6 和102.4分別為葡萄糖和鼠李糖端基碳信號(hào)，17.9～78.2為糖上其他碳信號(hào)。與文獻(xiàn)［14］比較，鑒定該化合物為f1avano1g1ycoside。

化合物8：淡黃色粉末，Mo1ish反應(yīng)呈陽(yáng)性。HI-ESI-MS m/z：611.155 9［M＋H］＋，分子式C27H30O16，不飽和度為13。1H-NMI（400 MHz，CD3OD）δ：6.19（d，J＝2.1 Hz，H-6），6.38（d，J＝2.1 Hz，H-8），7.53（d，J＝2.2 Hz，H-2＇），6.83（d，J＝8.4 Hz，H-5＇），7.55（dd，J＝8.4，2.2 Hz，H-6＇），5.34（d，J＝7.5 Hz，H-1＇）為葡萄糖端基質(zhì)子信號(hào)，4.38（brs，H-1"）為鼠李糖端基質(zhì)子信號(hào)，3.04～3.72為糖上其他質(zhì)子信號(hào)。13C-NMI（100 MHz，CD3OD）δ：148.4（C-2），133.2（C-3），177.3（C-4），161.2（C-5），100.7 （C-6），164.1（C-7），93.5（C-8），158.1（C-9），105.7（C-10），121.5（C-1＇），115.2（C-2＇），144.7（C-3＇），144.6（C-4＇），116.2（C-5＇），121.5（C-6＇），103.9和101.1分別為葡萄糖和鼠李糖端基碳信號(hào)，17.7～76.4為糖上其他碳信號(hào)。與文獻(xiàn)［15］比較，鑒定該化合物為蘆丁（rutin）。

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Chem ical constituents from Ledum palustre L.

ZHANG Hong-cai1， WANG Yu1， HUO Yan2， LIU Shu-min3 *

（I.Research Instituteof Traditional ChineseMedicine，HeilongJiang University of ChineseMedicine，Harbin I5OO4O，China；2.The Fifth Hospital of Harbin，Harbin I5OO4O，China；3.Drug Safety Evaluation Center，HeilongJiang University of ChineseMedicine，Harbin I5OO4O，China）

ABSTRACT：AIM To study the chemica1constituents from Ledum palustre L.METH0DS The n-butano1extract of Ledum palustre L.was iso1ated and purified by si1ica，ODS，HPLC co1umn and recrysta11ization.Then the structures of obtained compoundswere identified by physicochemica1 properties and spectrum data.RESULTS Eight compoundswere iso1ated and identified as fraxin（1），6-methy1coumarin-7-β-D-g1ucoside（2），quercetin （3），β-sitostero1（4），kaempfero1-3-β-D-g1ucoside（5），quercetin-3-O-β-D-g1ucoside（6），f1avano1 g1ycoside （7），rutin（8）.C0NCLUSI0N Compounds 1，2 and 7 are iso1ated from this p1ant for the first time.

作者簡(jiǎn)介：張洪財(cái)（1983—），男，碩士，助理研究員，研究方向?yàn)橹兴幓瘜W(xué)。Te1：13144506710，E-mai1：zhanghongcai-237@163.com*通信作者：劉樹(shù)民（1963—），男，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幩幮镔|(zhì)基礎(chǔ)。E-mai1：1sm@h1jum.net

基金項(xiàng)目：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)?？蒲谢鹳Y助項(xiàng)目（201210）

收稿日期：2015-04-20

doi：10.3969/j.issn.1001-1528.2016.03.023

中圖分類(lèi)號(hào)：I 284.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001-1528（2016）03-0587-04