地黃葉化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

李金花 李 軍 王君明 崔 瑛

(河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，河南 鄭州 450046)

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地黃葉化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

李金花 李 軍 王君明1崔 瑛1

(河南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，河南 鄭州 450046)

地黃葉；化學(xué)成分；藥理

地黃葉始載于《北京市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》〔1〕，為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa的葉，味苦，性寒，歸心、肝、腎經(jīng)，有清熱、益氣活血、滋陰補(bǔ)腎之功，內(nèi)服能生津止渴，滋陰降火，外用能治療惡瘡，手足癬。以往對(duì)地黃塊根研究較為豐富，在臨床中也得到了較為廣泛的應(yīng)用。由于地黃特殊的生長(zhǎng)條件，以及每年在秋季采收地黃的時(shí)候，地黃葉基本上被丟棄并沒有體現(xiàn)其藥用價(jià)值，我們應(yīng)該對(duì)地黃葉進(jìn)行更多地研究。本文通過查閱資料、整理文獻(xiàn)，對(duì)近年來地黃葉的化學(xué)成分及藥理作用的相關(guān)研究進(jìn)行綜述，以期為地黃葉的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供一定的依據(jù)。

1 化學(xué)成分

地黃葉含有環(huán)烯醚萜類、揮發(fā)油以及苷類等化學(xué)成分，它的大部分化學(xué)成分與地黃塊根的化學(xué)成分相同。開展地黃葉化學(xué)成分的相關(guān)研究是發(fā)揮中藥材地黃多種作用的基礎(chǔ)，是探索地黃葉深度開發(fā)和利用的前提。

1.1 環(huán)烯醚萜及其苷類 環(huán)烯醚萜類是地黃葉的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，梓醇為環(huán)烯醚萜類主要的化合物之一。劉孟奇等〔2〕通過組織化學(xué)的方法觀察地黃葉的顯微結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示,黃斑樣的薄壁細(xì)胞是地黃葉海綿組織中梓醇和多糖的存儲(chǔ)場(chǎng)所，這些薄壁細(xì)胞在地黃葉的葉片周圍齒末端處最為豐富。王娟娟等〔3〕利用超高效液相色譜(UPLC)法檢測(cè)地黃葉中梓醇和毛蕊花糖苷的含量，并且與地黃塊根中梓醇和毛蕊花糖苷含量進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，這兩種化學(xué)成分在地黃葉中的含量明顯比地黃塊根的含量高，而且地黃葉中不同部位的梓醇含量具有明顯的差別，而不同部位的毛蕊花糖苷含量差別較小，提示地黃葉具有很大的開發(fā)價(jià)值。

許繼承等〔4〕利用95%乙醇超聲提取鮮地黃葉、干地黃葉、生地黃、熟地黃中的梓醇，經(jīng)過HPLC含量測(cè)定后，發(fā)現(xiàn)地黃葉含有大量的梓醇，說明從地黃葉提取梓醇具有一定的可行性，并且可以減少地黃藥用資源的浪費(fèi)，也可以增加梓醇的提取來源。

考察地黃葉、肉蓯蓉、梧桐花等5種不同中藥材，檢測(cè)毛蕊花糖苷的含量，結(jié)果顯示，地黃葉中的毛蕊花糖苷含量最高，而且毛蕊花糖苷比較穩(wěn)定〔5〕。在秋季采收地黃葉的時(shí)候并不會(huì)影響地黃葉中的毛蕊花糖苷的含量，由于毛蕊花糖苷也有一定的藥用價(jià)值，筆者認(rèn)為應(yīng)該加大對(duì)地黃葉的開發(fā)利用，變廢為寶，更具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

1.2 苯乙醇及其苷類 地黃葉中含有苯乙醇及苷類化合物。張艷麗等〔6〕采取閃式提取的方法對(duì)干燥地黃葉進(jìn)行提取，50%含水丙酮破碎提取物中的組織，得溶于水的物質(zhì)和不溶于水的物質(zhì)。溶于水的物質(zhì)用95%乙醇分級(jí)進(jìn)行沉淀，再依次使用不同濃度的甲醇對(duì)其進(jìn)行洗脫，不溶于水的物質(zhì)用乙酸乙酯對(duì)其進(jìn)行萃取再洗脫。將最終洗脫出的物質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，得到苯乙醇類化合物，分別是對(duì)羥基苯乙醇，3,4-二羥基苯乙醇，焦地黃苯乙醇苷B1。

1.3 萜類及其苷類 張艷麗等〔6〕從地黃葉的提取物中分離出萜類及其苷類化合物，進(jìn)行波譜數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)進(jìn)行鑒定，確定出具有2β,3β,19α-三羥基齊墩果-12-烯-13,28-二羧酸，2α,3β-二羥基齊墩果-12-烯-28-酸，glutinolicacid，齊敦果酸，熊果酸，齊墩果酮酸，胡蘿卜苷等化合物。

1.4 揮發(fā)油 翟彥峰等〔7〕通過水蒸氣蒸餾法提取地黃葉中的揮發(fā)油，利用GC-MS法分析鑒定地黃葉中揮發(fā)油的化學(xué)成分，最終鑒定出38個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，并進(jìn)行含量的測(cè)定，其中葉綠醇、二十七烷、十六碳酸含量相對(duì)較高。

1.5 黃酮類 從地黃葉的提取物組織中分離純化、并通過化合物的理化性質(zhì)鑒定出具有黃酮類化合物，分別是香葉木素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素、木犀草素〔6〕。

2 藥理作用

2.1 降血糖作用 趙素霞等〔8〕利用小鼠實(shí)驗(yàn)，比較地黃葉水提95%醇沉物、桑葉70%醇提物、地黃葉和桑葉醇提物合并液(1∶1)對(duì)四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的降糖作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，地黃葉單藥95%醇提物對(duì)糖尿病小鼠“三多一少”癥狀明顯改善并且能夠降低血糖，效果明顯高于桑葉70%醇提物以及兩者合用，提示地黃葉水提95%醇沉液具有降血糖的作用。但是地黃葉在降血糖方面的研究報(bào)道很少，筆者認(rèn)為應(yīng)該加大對(duì)地黃葉在降血糖這方面的實(shí)驗(yàn)研究。研究發(fā)現(xiàn),鮮地黃葉的95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位對(duì)葡萄糖誘導(dǎo)小鼠高血糖具有明顯的降低血糖作用，并且具有免疫調(diào)節(jié)活性以及促進(jìn)胰島素分泌，經(jīng)過結(jié)構(gòu)鑒定得出β-谷甾醇和胡蘿卜苷，推測(cè)二者可能是降血糖的有效成分〔9〕。

2.2 改善腎功能的作用 沈欣等〔10〕通過對(duì)大鼠尾靜脈注射兔抗大鼠基底膜抗體腎毒血清進(jìn)行造模，造模成功后，給予一定劑量的地黃葉總苷,16 d后，發(fā)現(xiàn)地黃葉總苷不但可以明顯降低模型腎炎大鼠24 h尿蛋白、血漿總膽固醇的含量，還可以減輕模型腎炎大鼠腎臟的病理學(xué)變化，提示地黃葉總苷對(duì)兔IgG加速型腎毒血清腎炎具有顯著的治療作用，并且具有一定的量效關(guān)系。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明，地黃葉總苷不同劑量對(duì)陽離子化牛血清白蛋白腎炎模型大鼠具有顯著的治療作用〔11〕。地黃葉總苷膠囊(干燥的地黃葉提取分離所得)配伍氯沙坦鉀片和氯沙坦鉀片單藥對(duì)糖尿病腎病進(jìn)行早期治療研究，發(fā)現(xiàn)兩藥合用的患者收縮壓和舒張壓顯著改善，尿微量白蛋白和尿蛋白排泄率也都有下降，說明地黃葉與氯沙坦鉀片聯(lián)合使用能夠阻止糖尿病腎病病情的發(fā)展〔12〕。在臨床上治療糖尿病腎病中，地黃葉總苷膠囊聯(lián)合胰激肽原酶片〔13〕、坎地沙坦脂〔14〕等具有顯著的治療作用，并且起到保護(hù)腎臟的作用。

將86例患有慢性腎臟疾病的患者隨機(jī)分為2組，兩組分別給予單藥腎炎康復(fù)片、地黃葉總苷膠囊聯(lián)合腎炎康復(fù)片。治療一段時(shí)間后，觀察治療前后血清肌酐、24 h尿蛋白含量的變化值，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果顯示，治療后血清肌酐、24 h尿蛋白含量顯著降低〔15〕，說明地黃葉對(duì)慢性腎炎具有一定的治療作用。

2.3 抗菌作用 李玉璽等〔16〕利用80%的乙醇分別提取地黃的不同部位(花、葉、根)，分析比較地黃醇提液的不同部位的體外抑制菌體(常見的金黃色葡萄球菌)活性情況，測(cè)定各菌懸液OD值，研究結(jié)果顯示，地黃葉80%乙醇提取液的抑菌效果最強(qiáng)，其次是地黃的根，抑菌效果最差的是地黃花的80%乙醇提取液，三個(gè)部位80%乙醇提取液隨著濃度增加，對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果呈遞增趨勢(shì)，提示地黃葉具有很高的開發(fā)價(jià)值，這可能與地黃塊根有較多相同的成分相關(guān)。

2.4 解毒作用 古人常用新鮮的地黃葉治療對(duì)化膿性傷口，具有顯著性的療效，并且可以很快痊愈。現(xiàn)代關(guān)于地黃葉解毒的研究基本上沒有，筆者認(rèn)為可以開發(fā)地黃葉解毒作用的研究。

2.5 其他 通過小鼠子宮增重實(shí)驗(yàn)來優(yōu)選地黃葉、鮮地黃、生地黃、熟地黃這4味藥水提物對(duì)性未成熟雌性小鼠子宮系數(shù)的影響，判斷這4種藥材是否具有雌激素樣活性。結(jié)果顯示，鮮地黃水提取物對(duì)性未成熟雌性小鼠子宮的誘導(dǎo)作用較強(qiáng)，地黃葉水提物對(duì)性未成熟雌性小鼠子宮系數(shù)基本上沒有影響〔17〕，提示地黃葉沒有雌激素樣活性。

3 結(jié) 語

綜上所述，地黃葉含有環(huán)烯醚萜類、黃酮及其苷類等化學(xué)成分，其中環(huán)烯醚萜類含量較高，尤其是其中梓醇的含量較豐富，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于地黃塊根。眾所周知，梓醇具有神經(jīng)保護(hù)，抗腫瘤，降血糖等多種藥理作用，筆者認(rèn)為應(yīng)該加大利用地黃葉富含的梓醇及其他的成分，使其發(fā)揮更大的價(jià)值。雖然地黃葉分離出來很多化合物與地黃塊根相同，如環(huán)烯醚萜類、苯乙醇類等，但是在實(shí)際采收地黃的時(shí)候，基本上都是舍棄了地黃的地上部分，并沒有使其充分的合理利用和體現(xiàn)其藥用價(jià)值，筆者認(rèn)為，應(yīng)該加大對(duì)地黃葉的研究，使地黃這味中藥資源得到更加合理的開發(fā)和利用。

1 北京衛(wèi)生局.北京市中藥材標(biāo)準(zhǔn)〔S〕.北京:首都師范大學(xué)出版社,1988：111-2.

2 劉孟奇,徐圣博,崔曉飛.地黃葉和莖的解剖學(xué)及組織化學(xué)研究〔J〕.西北植物學(xué)報(bào),2012;32(2):257-62.

3 王娟娟,張振凌,都盼盼,等.UPLC法測(cè)定地黃葉及塊根中的梓醇和毛蕊花糖苷〔J〕.中成藥,2015;37(9):1981-4.

4 許繼承,高明波,王 婷,等.HPLC測(cè)定地黃葉與生地、熟地中梓醇含量〔J〕.廣州化工,2015;43(12):103-5.

5 邊寶林,王宏潔,楊 健.5種不同藥材中毛蕊花糖苷的含量比較〔J〕.中國中藥雜志,2010;35(6):739-40.

6 張艷麗,馮志毅,鄭曉珂,等.地黃葉的化學(xué)成分研究〔J〕.中國藥學(xué)雜志,2014;49(1):15-21.

7 翟彥峰,邢煜軍,王先友,等.地黃葉揮發(fā)油GC-MS分析〔J〕.河南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2010;29(2):113-5.

8 趙素霞,王娟娟,張振凌,等.地黃葉與桑葉降血糖作用研究〔J〕.中醫(yī)學(xué)報(bào),2015;30(10):1411-3.

9 匡巖巍.鮮地黃葉中梓醇的積累動(dòng)態(tài)及其抗銀屑病作用的研究〔D〕.北京:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,2009.

10 沈 欣,李德鳳,宗桂珍,等.地黃葉總苷對(duì)兔IgG加速型大鼠腎毒血清腎炎的作用研究〔J〕.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010;16(8):179-81.

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13 李德功.地黃葉總苷膠囊聯(lián)合胰激膚原酶片治療糖尿病腎病68例〔J〕.光明中醫(yī),2014;29(8):1715-6.

14 薛福平,袁慧欣,郭麗君,等.坎地沙坦脂聯(lián)合地黃葉總苷治療早期糖尿病腎病療效觀察〔J〕.武警醫(yī)學(xué),2013;24(10):857-9.

15 柳文晶,王群元,劉 清,等.地黃葉總苷膠囊聯(lián)合腎炎康復(fù)片治療慢性腎臟病44例療效觀察〔J〕.河北中醫(yī),2013;35(3):408-10.

16 李玉璽,劉俊華,馬海玲.藥用植物地黃不同部位粗提液體外抑菌活性的比較研究〔J〕.安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),2015;21(20):24-6.

17 鄭曉珂,劉朝妍,蔣 贇,等.懷地黃雌激素樣活性篩選的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中國藥學(xué)雜志,2013;48(21):1831-6.

〔2016-04-11修回〕

(編輯 李相軍)

河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃項(xiàng)目(2014GGJS-072)；鄭州市科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(20150309)；河南中醫(yī)學(xué)院2015年研究生創(chuàng)新基金項(xiàng)目(2015YCX020)

1 河南中醫(yī)藥大學(xué)呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心

王君明(1980-)，男，博士，博士后，副教授，主要從事中藥藥性藥效機(jī)制及新藥開發(fā)研究。

李金花(1989-)，女，在讀碩士，主要從事中藥藥性藥效機(jī)制及新藥開發(fā)研究。

R284

A

1005-9202(2016)19-4926-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.119