EB病毒感染對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病的影響與檢驗(yàn)學(xué)研究

陳 亮劉曉華王 倩（ 遼寧省遼陽市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 000； 遼寧省遼陽市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 000； 中鐵十九局集團(tuán)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 000）

?

EB病毒感染對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病的影響與檢驗(yàn)學(xué)研究

陳 亮1劉曉華2王 倩3
（1 遼寧省遼陽市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 111000；2 遼寧省遼陽市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 111000；3 中鐵十九局集團(tuán)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 111000）

【摘要】目的 探討EB病毒與系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的關(guān)系與臨床意義。方法 對(duì)100例SLE和80例正常對(duì)照組應(yīng)用PCR檢測(cè)了外周血單個(gè)核細(xì)胞中EB病毒DNA；用ELISA檢測(cè)了血清EB病毒殼抗原的IgG（VCA-IgG）抗體。結(jié)果 SLE組外周血DNA檢出率（34%）明顯高于正常對(duì)照組（10%），差異有非常顯著意義（P＜0.01）；SLE組和正常對(duì)照組血清中EB病毒VCA-IgG檢出率分別為50%和15%，差異有非常顯著意義（P＜0.01）。結(jié)論 SLE與EB病毒感染具有統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。

【關(guān)鍵詞】系統(tǒng)性紅斑狼瘡；Epstein-Barr病毒

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種自身免疫病，病因至今未明。目前較為一致的觀點(diǎn)是在遺傳因素的基礎(chǔ)上，由于某些外界因素（如病毒感染）的作用使組織結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，免疫功能失調(diào)而致病［1-2］。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在SLE患者外周血循環(huán)中可檢測(cè)到Epstein-Barr（EB）病毒的幾種抗原系統(tǒng)，并推測(cè)EB病毒在本病的發(fā)病過程中可能發(fā)揮某種作用［3-4］。為進(jìn)一步探討SLE與EB病毒感染的關(guān)系我們對(duì)100例SLE患者和80例正常對(duì)照組采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)檢測(cè)了外周血單個(gè)核細(xì)胞中

EB病毒DNA；用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)了血清中EB病毒殼抗原的IgG抗體（VCA-IgG）?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：100例SLE均系遼寧省遼陽市第二人民醫(yī)院住院患者，其中男12例，女88例；年齡16～54歲，平均33歲，診斷符合1998年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)診斷SLE標(biāo)準(zhǔn)，其中活動(dòng)期58例，非活動(dòng)期42例。病情活動(dòng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)按urowitz等1990年提出的“狼瘡活動(dòng)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)”，積分≥2分為病情活動(dòng)，＜2分為病情非活動(dòng)性。正常對(duì)照80例，來自健康獻(xiàn)血員，對(duì)照組年齡、性別構(gòu)成比與SLE組無顯著差異（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 EB病毒DNA測(cè)定：取SLE患者及正常人新鮮抗凝血3 mL，用淋巴細(xì)胞分離液（密度1.077 g/mL，上海試劑二廠）分離單個(gè)核細(xì)胞，生理鹽水洗細(xì)胞一次，將細(xì)胞懸浮于（TES）中，加10%（SDS）至終濃度為0.5%，加蛋白酶E（5 mg/mL）20 μL，55 ℃水浴30 min，然后用等體積酚和氯仿異戊醇各抽提2次，去蛋白；加2.5倍體積無水乙醇沉淀DNA用75%乙醇洗滌1次，加50～100 μL TE液溶解DNA，測(cè)260 nm吸光度A值，定量DNA。EB病毒PCR診斷試劑盒來自美國(guó)Cetus公司，含TaqNDA聚合酶，EB病毒引物，4種脫氧核苷三磷酸及標(biāo)準(zhǔn)PCR緩沖液。兩條引物為（1）GTCATCATCCGGGTCTC；（2）TTCGGGTTGGAACCTCCTTG，擴(kuò)增產(chǎn)物為269 bp。PCR擴(kuò)增反應(yīng)總體積為25 μL，其中5'和3'引物各1 μL，10×緩沖液2.5 μL，dNTP l μL， Taq酶1 U，模板DNA100 ng，加水至25 μL。置于PCR擴(kuò)增儀中。94 ℃驟變性2 min。循環(huán)為94 ℃，30 s；55 ℃，45 s；72 ℃，45 s。共35個(gè)循環(huán)，最后72 ℃延伸3 min。取10 μL PCR產(chǎn)物作2%瓊脂糖電泳，溴乙錠染色。柴外透射儀下觀察結(jié)果，以PBR322DNA/Hae marker作為分子量標(biāo)準(zhǔn)。PCR擴(kuò)增儀為美國(guó)PE公司9600型。

1.2.2 EB病毒VCA-IgG測(cè)定：EB病毒VCA-IgG試劑盒購(gòu)自天津四方公司，操作步驟按試劑盒說明書。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用PEMS 3.1對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以（x-±s）表示，采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

3 討 論

根據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，初次剖宮產(chǎn)二次懷孕的產(chǎn)婦，在第二次分娩時(shí)仍會(huì)有80%的產(chǎn)婦選擇剖宮產(chǎn)，雖然這比陰道分娩相比更為安全，但是對(duì)其手術(shù)的要求比較高，且手術(shù)時(shí)機(jī)的選擇也極為重要，此外，大量臨床資料表明，產(chǎn)后出血是瘢痕子宮剖產(chǎn)最為常見的并發(fā)癥，而宮縮乏力是引起產(chǎn)后出血的主要原因。使用縮宮素對(duì)再次剖宮產(chǎn)產(chǎn)婦進(jìn)行治療，其作用較快，在肌注3 min之后則會(huì)起效，因?yàn)榭s宮素的半衰期較短，極易被肝、腎、胎盤縮宮素酶等相關(guān)位置進(jìn)行清除，其持續(xù)時(shí)間大約為30 min。然而縮宮素能夠有效的減少子宮血流量，并對(duì)子宮上段收縮產(chǎn)生相應(yīng)的刺激同時(shí)，縮宮素大劑量使用，也可能會(huì)產(chǎn)生不良反應(yīng)［4］。欣母沛是甲基前列腺素，是天然前列腺素PGF2α的一種派生物，能夠刺激產(chǎn)婦子宮平滑肌的收縮，對(duì)血管起到壓迫作用，能夠關(guān)閉血竇，最終起到止血的作用，且該藥物的維持時(shí)間較長(zhǎng)［5］。本研究通過對(duì)88例產(chǎn)婦運(yùn)用不同預(yù)防方法能夠發(fā)現(xiàn)，欣母沛聯(lián)合宮縮素方法能夠降低二次剖宮產(chǎn)的產(chǎn)婦在產(chǎn)后的出血率，對(duì)于產(chǎn)后出血情況的止血效果明顯，此外兩組產(chǎn)婦在用藥后出現(xiàn)不良反應(yīng)沒有明顯差異，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），且在經(jīng)過相應(yīng)治療后不良反應(yīng)消失。

綜上所述，欣母沛聯(lián)合宮縮素對(duì)于預(yù)防再次剖宮產(chǎn)產(chǎn)后出血的效果明顯，且能在一定程度上減少其不同時(shí)段的產(chǎn)后出血量，并減少了宮縮素的反復(fù)用藥過程，避免宮縮素劑量過大對(duì)產(chǎn)婦造成不良影響，臨床價(jià)值顯著，值得推廣使用。

參考文獻(xiàn)

［1］ 周潤(rùn)華，陳世雄，魏金柱，等.欣母沛預(yù)防產(chǎn)后出血200例療效觀察［J］.西部醫(yī)學(xué)，2012，24（8）：1603-1604.

［2］ 王茜，朱玉蓮，吳紅梅，等.縮宮素聯(lián)合欣母沛防治高危產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)后出血的療效觀察［J］.西部醫(yī)學(xué)，2014，26（5）：611-612.

［3］ 陳榮芳，曹征然，王娟，等.產(chǎn)后大出血高危因素分析及欣母沛的預(yù)防效果［J］.中國(guó)婦幼健康研究，2014，25（4）：628-630.

［4］ 譚潔，孫楊燕，包理麗，等.欣母沛和縮宮素預(yù)防產(chǎn)后出血療效觀察［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2012，50（25）：143-144.

［5］ 魏偉.欣母沛與縮宮素在預(yù)防和治療產(chǎn)后出血中的臨床對(duì)比分析［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2014，12（19）：239-240.

中圖分類號(hào)：R593.24

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1671-8194（2016）17-0095-02