IL-17F在口腔鱗狀細(xì)胞癌患者血清中的表達(dá)及意義*

李 兵，傅 堯，符義富，游麗萍，劉 暢(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院檢驗科，南京 210008)

口腔鱗癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是頭頸部最常見的惡性腫瘤。研究發(fā)現(xiàn)中晚期OSCC術(shù)后5年生存率遠(yuǎn)低于早期，而患者在被確診為OSCC時，大多已經(jīng)處于中晚期階段[1]，因此尋找OSCC早期的篩選指標(biāo)對于提高患者的生存和生活質(zhì)量極為重要。IL-17F與IL-17A同屬IL-17家族，與哮喘、狼瘡和腫瘤等疾病相關(guān)。其功能上與家族最具代表性的IL-17A不完全相同。研究顯示，IL-17A的含量在頭頸部鱗癌患者血清中，明顯高于健康人[2]，而IL-17F在OSCC及白斑患者血清中的表達(dá)目前還少有研究。本文用ELISA方法檢測IL-17F在健康對照者、白斑和OSCC患者血清中的表達(dá)，并分析其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系，探討其在OSCC發(fā)生發(fā)展中的作用及意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2014年10月～2015年5月本院白斑患者及OSCC患者血清標(biāo)本分別為25例和80例，平均年齡分別為57.1±8.6歲和62.2±9.5歲。所有患者組織標(biāo)本均經(jīng)蘇木精-伊紅染色法檢測，由兩位資深病理專家獨立診斷，鏡下可見伴有上皮異常增生且上皮過度角化的為白斑(癌前病變)；鏡下可見鱗狀細(xì)胞癌巢，細(xì)胞間有細(xì)胞間橋，細(xì)胞異型性且常見較多核分裂相的為OSCC。排除接受過化療和放療的患者。另隨機(jī)收集無任何口腔病變的健康對照者33例，平均年齡53.5±10.3歲。血清標(biāo)本收集經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)及研究對象的知情同意。

1.2 試劑與儀器 血清IL-17F含量ELISA測定試劑盒為美國瑞博奧公司產(chǎn)品，酶標(biāo)儀(美國伯樂公司)。

1.3 方法 采集研究對象肘靜脈血3 ml，存于促凝管中，離心5 min取血清，存于1.5 ml Ep管中，于-80℃保存。白斑及OSCC患者均于手術(shù)前采血。按ELISA試劑盒說明書操作測定血清IL-17F含量。所有樣本均設(shè)復(fù)孔，顯色完畢用酶標(biāo)儀450 nm波長檢測。

2 結(jié)果

2.1 各研究對象血清IL-17F的水平 健康對照者、白斑患者和OSCC患者血清中IL-17F的含量分別為202.2±31.5，168.2±17.4和65.1±7.2 pg/ml。OSCC患者血清IL-17F含量明顯低于白斑患者和健康對照者，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(t=6.16，6.22，P<0.05)。白斑患者與健康對照者血清IL-17F含量無明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=0.85，P>0.05)。

2.2 OSCC患者血清中IL-17F表達(dá)水平與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 見表1。分析OSCC患者血清中IL-17F的含量與年齡、性別、吸煙史、腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度等臨床病理參數(shù)的關(guān)系，結(jié)果顯示，OSCC患者血清IL-17F含量與TNM期明顯相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與年齡、性別、吸煙史、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度無明顯相關(guān)(P>0.05)。

表1 IL-17F的表達(dá)與OSCC臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 血清IL-17F含量的診斷意義 見圖1。受試者工作特征曲線(ROC曲線)顯示：ROC曲線下面積為0.843，IL-17F含量可以作為健康人和OSCC患者的良好診斷指標(biāo)(P<0.05)，其臨界值為37.84 pg/ml。

圖1 IL-17F的ROC曲線

3 討論

趨化因子是炎癥相關(guān)性腫瘤的主要決定因素。其家族是一個非常復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，擁有大量的配體和受體，在相關(guān)癌癥中的生物學(xué)功能多種多樣。趨化因子影響腫瘤進(jìn)展的多種途徑，包括：白細(xì)胞募集，血管新生，腫瘤細(xì)胞增殖和存活，侵入和轉(zhuǎn)移等[3]。IL-17F與IL-17A具有高度同源性，其在促進(jìn)炎癥因子分泌及炎癥反應(yīng)方面有類似的功能[4]。但有研究表明，在腫瘤相關(guān)血管生成方面，IL-17F和IL-17A存在不同的生物學(xué)功能。乳腺癌小鼠模型研究顯示，IL-17A在腫瘤組織高表達(dá)，由腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞分泌，促使血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，進(jìn)而加速腫瘤微血管的形成，利于腫瘤生長[5]。Pan等[6]人在非小細(xì)胞肺癌研究中發(fā)現(xiàn)，IL-17A可以誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子的分泌，促進(jìn)腫瘤血管生成，他們還發(fā)現(xiàn)患者血清IL-17A的水平與患者的生存率呈負(fù)相關(guān)。而肝癌和結(jié)腸癌動物模型研究顯示，IL-17F可以降低IL-6，IL-8，VEGF等促血管生成因子的表達(dá)，從而抑制腫瘤血管生成和腫瘤細(xì)胞的生長[7，8]。

本研究發(fā)現(xiàn)，IL-17F在OSCC患者血清中表達(dá)水平明顯低于健康對照者，TNM Ⅲ～Ⅳ期患者表達(dá)水平明顯低于TNM Ⅰ～Ⅱ期患者，提示IL-17表達(dá)與OSCC發(fā)生發(fā)展存在一定關(guān)聯(lián)，很可能是起抑制作用。對照上文IL-17F在動物模型中抑制腫瘤生長的研究結(jié)果，本研究可以為其提供臨床依據(jù)。同時我們發(fā)現(xiàn)白斑(癌前病變)患者血清IL-17F的表達(dá)水平與健康對照者相比，雖有降低，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，這可能與白斑的疾病進(jìn)程有關(guān)，需要我們擴(kuò)大樣本量，繼續(xù)研究。

我們通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清IL-17F含量可以作為一個很好的篩選指標(biāo)，用于健康人和OSCC患者的早期篩查。對于OSCC患者的即時治療和術(shù)后生存率具有非常重要的意義。

[1] 劉思玉，謝 龍，祁 兵，等．口腔鱗狀細(xì)胞癌組織中差異微小RNA/mRNA表達(dá)譜的對接研究[J]．華西口腔醫(yī)學(xué)雜志，2014，32(4)：400-403．

Liu SY，Xie L，Qi B，et al.Differential expression profiles of microRNAs/mRNA and docking study in oral squamous cell carcinoma[J]．West China Journal of Stomatology，2014，32(4)：400-403．

[2] Li C，Zhao Y，Zhang W，et al．Increased prevalence of TH17 cells in the peripheral blood of patients with head and neck squamous cell carcinoma[J]．Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod，2011，112(1)：81-89．

[3] 鄭福利，黨 淼，張淼芳，等．子宮內(nèi)膜癌組織中趨化因子CXCL12及其受體CXCR4表達(dá)水平研究[J]．現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，30(4)：21-23,27．

Zheng FL，Dang M，Zhang MF，et al．Expression of chemokine CXCL12 and its receptor CXCR4 in endometrial carcinoma tissues[J]．J Mod Lab Med，2015，30(4)：21-23,27．

[4] Vazquez-Tello A,Halwani R,Li R,et al．IL-17A and IL-17F Expression in B Lymphocytes[J]．Int Arch Allergy Immunol，2012，157(4)：406-416．

[5] Du JW，Xu KY，F(xiàn)ang LY，et al．Interleukin-17，produced by lymphocytes，promotes tumor growth and angiogenesis in a mouse model of breast cancer[J]．Mol Med Rep，2012，6(5)：1099-1102.

[6] Pan B，Shen J，Cao J，et al．Interleukin-17 promotes angiogenesis by stimulating VEGF production of cancer cells via the STAT3/GIV signaling pathway in non-small-cell lung cancer[J]．Sci Rep，2015(15):1605.

[7] Xie Y，Sheng W，Xiang J，et al．Interleukin-17F suppresses hepatocarcinoma cell growth via inhibition of tumor angiogenesis[J]．Cancer Investig，2010，28(6)：598-607．

[8] Tong Z，Yang XO，Yan H，et al．A protective role by interleukin-17F in colon tumorigenesis[J]．PLoS One，2012，7(4)：e34959．