陜北地區(qū)丙型肝炎病毒基因型對抗病毒治療的影響 *

陜北地區(qū)丙型肝炎病毒基因型對抗病毒治療的影響*

劉娜徐光華吳殿磊李春霞尚丹鶴武瓊

(延安大學(xué)附屬醫(yī)院感染病科， 陜西 延安716000)

【摘要】目的了解陜北地區(qū)丙型肝炎病毒(HCV)基因型流行狀況，探討HCV基因型對抗病毒治療的影響。方法對丙型肝炎患者的血清進(jìn)行HCV RNA定量及基因型檢測, 采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)方法結(jié)合Taqman技術(shù)；對聚乙二醇化干擾素α 2a (PEG-IFN α-2a)與干擾素α-2b治療24周結(jié)束時(shí), 取得病毒學(xué)應(yīng)答(RVR)的丙型肝炎患者進(jìn)行24周隨訪觀察。結(jié)果在85例HCV RNA陽性的患者中，基因1型30例(35.3%)，實(shí)現(xiàn)RVR的患者有25例(83.3%)，復(fù)發(fā)有7例(23.3%)；非1型55例(64.7%)，其中全部實(shí)現(xiàn)RVR，復(fù)發(fā)有4例(7.3%)。結(jié)論病毒基因型與丙型肝炎干擾素治療后的病毒復(fù)發(fā)有顯著相關(guān)性。

【關(guān)鍵詞】丙肝病毒； HCV RNA； 基因型； 應(yīng)答指導(dǎo)治療

【中圖分類號】R 512.6`+3

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

doi：10.3969/j.issn.1672-3511.2015.10.021

Abstract【】ObjectiveTo understand hepatitis C virus (HCV) genotype in Northern Shanxi prevalence and explore the effect of HCV genotype to antiviral therapy.Methods HCV RNA quantitative and genotypes of patients with hepatitis C were detected with real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (FQ-PCR) method based on Taqman Technology. The patients were treated with pegylated interferon a 2a (PEG-IFN a-2a)and interferon a-2b for 24 weeks. The patients with virological response were followed-up for 24 weeks.ResultsOf 85 cases with positive HCV RNA, there were 30 cases with 1 genetype (35.3%), 25 cases (83.3%) of them with RVR and 7 cases (23.3%) with recurrence. There were 55 cases (64.7%) with 1 non type, all of them with RVR and 4 cases (7.3%) with recurrence.ConclusionsThere is correlation between hepatitis C virus genotype and viral relapse after interferon treatment.

基金項(xiàng)目：延安大學(xué)研究生創(chuàng)新基金(11YJ08)

收稿日期：( 2014-05-07； 編輯： 陳舟貴)

Effect of genetype of hepatitis C virus on treatment in Northern Shanxi areaLIU Na，XU Guanghua，WU Dianlei，etal

(TheAffiliatedHospitalofYan’anUniversity，Yan’an716000，Shanxi,China)

【Key words】Hepatitis C virus； HCV RNA； Genotype； RGT

丙型肝炎病毒(HCV)感染后約20%的患者發(fā)展為急性肝炎，而近80%的患者慢性化，其中約30%的患者在感染后的20～30年可進(jìn)展為肝硬化甚至肝癌?？共《局委熓强刂萍膊∵M(jìn)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。但由于HCV基因的高度變異,導(dǎo)致了變異病毒之間不同的生物學(xué)特性,包括病毒的復(fù)制能力和致病能力。本研究通過對經(jīng)過抗病毒治療的85例丙型肝炎患者進(jìn)行追蹤研究， 旨在探討丙型肝炎患者經(jīng)干擾素治療后影響療效的相關(guān)因素。

1資料與方法

1.1病例選擇及治療85份血清標(biāo)本獲自2010年07月～2011年12月來我院感染科就診的丙肝患者。診斷符合2004年我國《丙型肝炎防治指南》的標(biāo)準(zhǔn),年齡20～71歲；HCV RNA>100IU/ml；ALT<10倍正常值；除外其他肝臟疾病(所有標(biāo)本抗HAV IgM抗體、HBV M、抗HDV、抗HEV抗體均陰性)。隨機(jī)分為聚乙二醇化干擾素α-2a (PEG-IFNa-2a, 上海羅氏制藥有限公司產(chǎn)品)治療組31例和普通IFNa-2b(天津華立達(dá)生物公司產(chǎn)品)治療組54例。PEG-IFN a-2a組患者每周1次皮下注射135～180μg;IFN-a-2b組患者，每周注射3次, 每次3～5MU。所有患者均聯(lián)合利巴韋林治療，按體重0.8～1.2g/d 兩組患者均治療48周, 隨訪24周。

1.2檢測指標(biāo)與方法各型病毒性肝炎血清學(xué)標(biāo)志/抗體用ELISA方法檢測,試劑由上?？迫A生物工程股份有限公司提供。HCV RNA定量及基因型檢測儀器為美國PE公司Gene AmP7500定量檢測系統(tǒng),試劑由上海之江生物科技股份有限公司提供的熒光定量HCV-PCR檢測試劑盒,具體按說明書進(jìn)行。治療1月、3月、6月、1年后停藥半年進(jìn)行血清學(xué)標(biāo)本采集?？焖俨《緦W(xué)應(yīng)答(rapid virological response,RVR)為治療4周時(shí)血清HCV RNA檢測<最低檢測限，或定量檢測降低2個(gè)log以上。復(fù)發(fā)(Relapse)為治療結(jié)束時(shí)HCV RNA轉(zhuǎn)陰，但是停藥后HCV RNA定量出現(xiàn)陽轉(zhuǎn)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行不同組之間觀察指標(biāo)的χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1HCV感染者感染方式分布狀況陜北地區(qū)HCV感染者在輸血傳播、吸毒、其它所占的比例為45.9%(39/85)、42.4%(36/85)、11.8%(10/85)。

2.2HCV感染者病毒基因型分布及不同基因RVR發(fā)生和復(fù)發(fā)率85例HCV RNA陽性的丙肝患者中，1型30例占35.3%，非1型為55例占64.7%?；蚍?型患者的RVR率(100.0%)明顯高于1型(83.3%), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=9.74，P=0.004)。基因1型患者的復(fù)發(fā)率(23.3%)明顯高于非1型(7.3%), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=4.44，P=0.046)，見表1。

表185例HCV基因型的分布及不同基因RVR發(fā)生和復(fù)發(fā)率[n(×10-2)]

Table 1　RVR and recurrence of different genotype

3討論

我國2004年制定的《丙型肝炎防治指南》中在HCV感染后有50%～85%發(fā)展為慢性丙型肝炎[1]。有報(bào)道，HCV感染后20年有10%～15%發(fā)展為肝硬化；HCV相關(guān)的肝細(xì)胞癌(Hepatoceallualar carcinoma，HCC)的發(fā)生率在感染30年后為1%～3%[2]。另外，由于HCV 的基因變異性較大，體內(nèi)產(chǎn)生的中和抗體難以應(yīng)付不斷出現(xiàn)的大量新病毒，所以丙型肝炎的預(yù)防尚無疫苗可用。目前能夠有效控制HCV感染的病程進(jìn)展及提高患者的生存質(zhì)量,最有效的措施是實(shí)施抗病毒治療方案-干擾素(IFN) 與利巴韋林(RBV)聯(lián)合應(yīng)用,其治療的目標(biāo)是獲得持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答率(sustained virological response,SVR)。因此，積極加強(qiáng)對HCV基因型的研究，不斷提高治愈率，才能延緩及減少肝硬化和肝癌的發(fā)生。

輸血曾是丙肝的主要傳播途徑，輸血后肝炎70%以上是丙型肝炎。隨著篩查方法的改善，我國從1993年開始對獻(xiàn)血者做抗-HCV檢測，使輸血相關(guān)性HCV的感染率明顯降低。我國部分地區(qū)輸血傳播HCV的殘余風(fēng)險(xiǎn)為1/6萬～1/4萬[3,4]。但隨著吸毒人數(shù)的增多, 靜脈注射毒品逐漸成為H CV傳播的主要途徑。靜脈吸毒者往往共用注射器, 從而導(dǎo)致各種經(jīng)血液傳播病毒在吸毒者之間傳播, 容易產(chǎn)生HCV、HBV和HIV的共同感染。據(jù)報(bào)道，靜脈吸毒>5年者中,50%～90%的人感染了HCV, 從而更增加了新靜脈吸毒者的感染幾率[5]。本研究42.4%的丙肝患者就由吸毒感染所致，可見遠(yuǎn)離毒品是降低丙肝發(fā)病率的重要方式。雖然大部分學(xué)者認(rèn)為HCV可以通過性接觸傳播, 提示人類的體液及分泌物可以排泄HCV，因?yàn)樵谝恍┗颊叩捏w液, 如唾液、精液中能夠檢測HCV RNA, 如職業(yè)暴露(像針刺傷)、紋身、穿耳、皮膚劃痕等, 也有潛在傳播HCV的可能醫(yī)源性傳播，本研究中11.8%的患者感染HCV可能與此有關(guān)。

HCV基因組呈現(xiàn)高度異質(zhì)性,根據(jù)HCV基因組核苷酸序列的差異程度,可將HCV分為6種基因型和多種亞型[6]?；蛐偷姆植即嬖诘貐^(qū)差異，其中，基因1型呈全球性分布，占HCV感染的70%以上。在我國主要為1b和2a，其中以1b型為主，2a型次之。本研究結(jié)果顯示，1型30例占35.3%，非1型為55例占64.7%。由于HCV基因的高度變異,導(dǎo)致了變異病毒之間存在不同的生物學(xué)特性,包括病毒的復(fù)制能力和致病能力。本研究發(fā)現(xiàn)，基因型1型患者的復(fù)發(fā)率(23.3%)明顯高于非1型(7.3%), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明I型患者的成功治愈率低于非I型，提示HCV基因型是影響IFN治療后病毒復(fù)發(fā)的重要因素。陜北地區(qū)以非I型為主，提示陜北地區(qū)丙型肝炎患者易取得較好的抗病毒治療效果。基因1型患者對IFN的高復(fù)發(fā)率原因尚不清楚,可能的原因是與1b型HCV的糖蛋白高變區(qū)異質(zhì)性程度及病毒復(fù)制能力較強(qiáng)有關(guān)。故有報(bào)道基因型是治療應(yīng)答最重要的基線預(yù)測因子[7],基因2、3型的持續(xù)應(yīng)答率較基因1、4型高, 基因2、3型者療程24周的持續(xù)應(yīng)答率與療程48周相當(dāng), 而基因1、4型則必須使用48周, 否則過早停藥導(dǎo)致復(fù)發(fā)率增高[8,9]?！癐L-28B基因型”是更重要、更獨(dú)立的SVR預(yù)測因素。在健康人群的隨機(jī)抽樣調(diào)查表明,rs-12979860 CC基因型在亞洲人種很最普遍,此基因型的高表達(dá)率與以往報(bào)道的亞洲人種抗HCV的高應(yīng)答率似乎是一致的[10]。

慢性丙型肝炎病情隱匿, HCV感染是導(dǎo)致肝硬化及肝細(xì)胞癌等終末期肝病的主要病因之一, 抗病毒治療能延緩病情進(jìn)展。但由于HCV基因組的高度變異性及普通干擾素血清濃度波動(dòng)大, 使丙型肝炎抗病毒治療過程中病毒反彈, 或治療結(jié)束后出現(xiàn)復(fù)發(fā)。本研究有HCV 1型的患者7例出現(xiàn)復(fù)發(fā)，故應(yīng)采用足量、長療程應(yīng)用干擾素及利巴韋林進(jìn)行抗病毒治療可能會提高SVR率, 以達(dá)到提高丙型肝炎治療療效、降低復(fù)發(fā)率的目的。

根據(jù)患者治療過程中病毒學(xué)應(yīng)答情況來預(yù)測患者的療效并相應(yīng)調(diào)整治療方案(應(yīng)答指導(dǎo)治療),已成為抗病毒治療的研究熱點(diǎn)。目前對SVR 預(yù)測價(jià)值最高的病毒學(xué)應(yīng)答預(yù)測指標(biāo)為RVR，其預(yù)測意義不受患者HCV基因型影響,在獲得RVR的患者中,有89%基因1型患者、70%～95%基因2/3型患者與86%基因4型患者達(dá)到SVR[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，基因型為非1型患者的RVR率(100.0%)明顯高于1型(83.3%),且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與以往報(bào)道一致，可見RVR不僅可指導(dǎo)RGT通過個(gè)體化治療,提高SVR率,更重要的意義在于能預(yù)測復(fù)發(fā)率。

4結(jié)論

病毒基因型與丙型肝炎干擾素治療后的病毒復(fù)發(fā)呈顯著相關(guān)，是指導(dǎo)治療的重要依據(jù)；對不同基因型的患者采取分層管理，對提高丙型肝炎治療療效、降低復(fù)發(fā)率具有重要的臨床意義。

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