摘要:目的 研究不同結(jié)核病患者群血清蛋白質(zhì)譜分析與對比探討。方法 將2012年1月~2014年1月我院接診的99例結(jié)核病患者根據(jù)不同結(jié)核病類型分為兩組,其中包括54例菌陽肺結(jié)核患者(觀察組),45例菌陰肺結(jié)核患者(對照組),對比觀察二者的群血清蛋白質(zhì)譜。結(jié)果 在兩組患者中均捕獲到102種相對分子質(zhì)量在1011.42~9435.06的不同血清蛋白質(zhì),通過相關(guān)檢驗,在觀察組患者中有31種,對照組患者中有23種血清蛋白質(zhì)呈正態(tài)分布;正態(tài)分布的血清蛋白質(zhì)在不同結(jié)核病患者中無明顯差異(P>0.05);在非正態(tài)分布的血清蛋白質(zhì)中,觀察組與對照組患者人群間其水平無明顯差異(P>0.05)。結(jié)論 對于不同結(jié)核病患者來講,其血清蛋白質(zhì)譜具有同質(zhì)性,這為普遍適用性結(jié)核病血清學(xué)診斷標志物的篩選提供了科學(xué)依據(jù)。
關(guān)鍵詞:結(jié)核病;血清蛋白質(zhì)譜;菌陰肺結(jié)核;菌陰肺結(jié)核;非正態(tài)分布
本文就我院診治的99例不同結(jié)核病患者為研究對象,對比分析菌陰肺結(jié)核與菌陽肺結(jié)核患者的血清蛋白質(zhì)譜差異,現(xiàn)報道如下。
1資料與方法
1.1一般資料 將2012年1月~2014年1月我院接診的99例結(jié)核病患者根據(jù)不同結(jié)核病類型分為兩組,其中包括54例菌陽肺結(jié)核患者(觀察組),其涂片或者培養(yǎng)陽性并鑒定為結(jié)核分支桿菌,45例菌陰肺結(jié)核患者(對照組),其分枝桿菌片和培養(yǎng)檢查均為陰性,但是符合肺結(jié)核診斷標準。觀察組包括男性患者34例,女性患者20例;年齡13~80歲,平均年齡(49.17±5.63)歲。對照組包括男性患者26例,女性患者19例;年齡16~74歲,平均年齡(47.26±5.02)歲。兩組患者在一般資料方面的差異較小,無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。
1.2方法
1.2.1采集血液樣本與保存 采集血液約5mL置于真空采血管,以2000r/min的離心放置于4℃的環(huán)境下24h,吸引上層血清約1.5mL分裝于3支凍存管中,保存于零下80℃以備用[1]。
1.2.2實驗方法 ①采用10μL WCX磁珠處理5μL血清,將血清蛋白質(zhì)捕獲后獲得樣品,接著直接實施質(zhì)譜分析或者保存于零下20℃,并在24h內(nèi)實施質(zhì)譜分析。②正式實施質(zhì)譜分析之前,表現(xiàn)做好以下準備:備好標準品、基質(zhì)、Anchorchip靶清潔、質(zhì)譜參數(shù)調(diào)整等。③點樣及質(zhì)譜儀檢測,首先將1μL的樣品與10μL的基質(zhì)混勻,其次取出1μL點在600μm Anehorehip靶的樣品上,室溫干燥片刻,最后,將Anehorehip靶放人質(zhì)譜儀。④利用ClinProTools分析軟件進行數(shù)據(jù)的采集和處理[2-4]。
1.3療效評定標準 對比分析兩組患者的血清蛋白質(zhì)譜及各自血清蛋白質(zhì)的平均豐度對比。
1.4統(tǒng)計學(xué)分析 采用ClinProTools分析軟件進行處理,采用Anderson-Darling檢驗兩組患者的各血清蛋白質(zhì)的豐度在各人群中是否呈正態(tài)分布,以P>0.05為正態(tài)分布;組間比較中,若分析蛋白質(zhì)在兩組人群中均呈正態(tài)分布,其平均豐度比較采用t檢驗,以P>0.05表示差異無統(tǒng)計學(xué)意義,以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義;若分析蛋白質(zhì)在兩組人群中不都或均不呈正態(tài)分布,其平均豐度比較采用Wilcoxon檢驗,以P>0.05表示差異無統(tǒng)計學(xué)意義,以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1在兩組患者中均捕獲到102種相對分子質(zhì)量在1011.42~9435.06的不同血清蛋白質(zhì),觀察組患者的血清蛋白質(zhì)豐度為1.61~1631.55,對照組患者的血清蛋白質(zhì)豐度為3.16~1582.01。通過Anderson-Darling檢驗,在觀察組患者中有31種,對照組患者中有23種血清蛋白質(zhì)呈正態(tài)分布;正態(tài)分布的血清蛋白質(zhì)在不同結(jié)核病患者中無明顯差異(P>0.05);
2.2觀察組患者與對照組患者各血清蛋白質(zhì)的平均豐度對比:在非正態(tài)分布的血清蛋白質(zhì)中,觀察組與對照組患者人群間其水平無明顯差異(P>0.05)。
3討論
世界衛(wèi)生組織提出,蛋白質(zhì)標志物在感染性疾病的診斷、預(yù)示疾病狀態(tài)和明晰疾病進程等方面均可發(fā)揮重要作用,而應(yīng)用表面增強激光解吸技術(shù)可以以其高通量和要求樣本量較少等優(yōu)勢而被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的篩選工作中[5,6]。本文研究中,采用表面增強激光解吸一電離飛行時間質(zhì)譜蛋白質(zhì)芯片系統(tǒng)對不同結(jié)核病患者的血清蛋白質(zhì)譜進行的對比研究,就我院診治54例菌陰肺結(jié)核患者和45例菌陰肺結(jié)核患者為研究對象,回顧性分析其臨床資料,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在兩組患者中均捕獲到102種相對分子質(zhì)量在1011.42~9435.06的不同血清蛋白質(zhì),通過相關(guān)檢驗,在觀察組患者中有31種,對照組患者中有23種血清蛋白質(zhì)呈正態(tài)分布;正態(tài)分布的血清蛋白質(zhì)在不同結(jié)核病患者中無明顯差異(P>0.05);在非正態(tài)分布的血清蛋白質(zhì)中,觀察組與對照組患者人群間其水平無明顯差異(P>0.05)。
綜上所述,對于不同結(jié)核病患者來講,其血清蛋白質(zhì)譜具有同質(zhì)性,這為普遍適用性結(jié)核病血清學(xué)診斷標志物的篩選提供了科學(xué)依據(jù)。
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編輯/申磊