阿莫西林與紅霉素對肺炎鏈球菌的體外抗菌效果

摘要：目的 研究阿莫西林和紅霉素對肺炎鏈球菌的殺菌效果以及聯(lián)合應(yīng)用體外對肺炎鏈球菌的相互作用。方法 選用肺炎鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌和藥物試劑（阿莫西林含量為86.2%，紅霉素含量為923 u/mg），采用瓊脂平皿二倍稀釋法測定MIC，采用影印培養(yǎng)法測定MBC，采用棋盤微量稀釋法和時間-殺菌曲線測定兩種藥物溶液對肺炎鏈球菌的聯(lián)合應(yīng)用效果。結(jié)果 大部分菌株的藥物MIC值與單劑相比，均相同或略有下降，阿莫西林、紅霉素的單劑用藥和二者聯(lián)合應(yīng)用殺菌效果均隨著時間的推移而不斷增加，紅霉素對肺炎鏈球菌也存在體外殺菌作用，與阿莫西林聯(lián)合應(yīng)用使活菌減少較阿莫西林單劑的FIC指數(shù)為1～2，表明阿莫西林與紅霉素之間為無關(guān)作用。結(jié)論 紅霉素在體外對肺炎鏈球菌具有殺菌作用，與阿莫西林聯(lián)合應(yīng)用時，藥物的殺菌效果均不會被減弱。

關(guān)鍵詞：肺炎鏈球菌；阿莫西林；紅霉素；抗菌效果

肺炎鏈球菌是肺炎較為常見的致病菌，聯(lián)合應(yīng)用β-內(nèi)酰胺和大環(huán)內(nèi)酯類藥物是目前應(yīng)用最為廣泛的治療方法，本研究通過對臨床分離的肺炎鏈球菌的聯(lián)合抑菌實驗來驗證阿莫西林和紅霉素聯(lián)合應(yīng)用對肺炎鏈球菌的相互作用以及紅霉素對其產(chǎn)生的殺菌作用，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選用符合ATCC49679肺炎鏈球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株作為質(zhì)控株，將菌株接種至哥倫比亞血瓊脂平板，培養(yǎng)備用。選用的阿莫西林含量為86.2%，紅霉素含量為923 u/mg，試劑包括乙醇、磷酸鹽緩沖液、滅菌生理鹽水和滅菌蒸餾水，器材包括恒溫水浴箱、培養(yǎng)箱、分析天平、微量加樣器等。

1.2方法

1.2.1 MIC測定 阿莫西林和紅霉素對肺炎鏈球菌的最小抑菌濃度，采用瓊脂平皿二倍稀釋法來測定，將培養(yǎng)物取出稀釋，將其點種在各抗菌藥物濃度培養(yǎng)基上，接種量為1×104 CFU；根據(jù)菌株對阿莫西林和紅霉素的不同敏感性，將其分組，計算和測定MIC。

1.2.2 MBC測定 對于最小殺菌濃度的測定，采用影印培養(yǎng)法，影印戳先輕落在接種點上，再將其移開輕落到不含抗菌藥物平皿上，以菌落計數(shù)并統(tǒng)計MBC值，計算其與MIC的比值，以其比值>4作為判斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。

1.2.3聯(lián)合藥敏試驗 藥物對肺炎鏈球菌菌株的聯(lián)合作用的測定，采用棋盤微量稀釋法，將菌株接種到哥倫比亞血平板上，培養(yǎng)完成后，將其用MH肉湯制成菌懸液，濃度為1×107 CFU/ml，然后在微孔板上分別加入MH肉湯和菌懸液，以此作為飛揚鏈球菌生產(chǎn)的陽性和陰性對照；將兩種溶液各接入MH肉湯，進行二倍稀釋，加入菌量放入培養(yǎng)箱，培養(yǎng)20h后，觀察并記錄其結(jié)果；根據(jù)聯(lián)合抑菌指數(shù)公式，計算FIC指數(shù)，以此作為判斷兩種藥物對肺炎鏈球菌所起到的體外抗菌作用，判斷標(biāo)準(zhǔn)為：FIC指數(shù)<0.5，表示協(xié)同作用；<1，表示累加作用；<2表示無關(guān)作用；>2，表示拮抗作用[2]。

1.2.4時間-殺菌曲線 將標(biāo)準(zhǔn)菌株、兩種溶液敏感株和耐藥株培養(yǎng)20 h后，然后將獲得的培養(yǎng)物加入MH肉湯中，進行振蕩培養(yǎng)，為確保細(xì)菌能夠呈指數(shù)生長，在1 h后加入適當(dāng)抗生素，各菌株濃度約為1.5×106 CFU/ml，藥物單劑和聯(lián)合應(yīng)用于菌懸液中，對加入藥物前和加入藥物后的細(xì)菌原液進行定點取樣，計算活菌數(shù)量，繪制時間-殺菌曲線，判定藥物素單劑和聯(lián)合作用對肺炎鏈球菌產(chǎn)生的體外抗菌效果[3]。

2結(jié)果

最低抑菌濃度及殺菌效果，分別計算阿莫西林和紅霉素兩種溶液耐藥不同菌株的MIC50和MIC90值，阿莫西林和紅霉素菌敏感株有16株，與耐藥株共有30株，其中，阿莫西林和紅霉素菌耐藥株最多。聯(lián)合藥敏試驗結(jié)果顯示，大部分菌株的藥物MIC值與單劑相比，均相同或略有下降，阿莫西林、紅霉素的單劑用藥和二者聯(lián)合應(yīng)用殺菌效果均隨著時間的推移而不斷增加，紅霉素對肺炎鏈球菌也存在體外殺菌作用，但是殺菌效果不如阿莫西林單劑和聯(lián)合應(yīng)用，而聯(lián)合應(yīng)用使活菌減少較阿莫西林單劑的FIC指數(shù)為1～2，表明阿莫西林與紅霉素之間為無關(guān)作用，見表1。

3討論

肺炎鏈球菌是化膿性球菌中致病力較高的一種病原菌，此菌會引發(fā)大葉性肺炎、腦膜炎、支氣管炎等疾病，5%～10%正常人上呼吸道中攜帶此菌，多見于兒童和老年人，其對青霉素類抗生素極少會產(chǎn)生耐藥性，這也是耐藥肺炎鏈球菌在全世界范圍內(nèi)得以持續(xù)流行并增長的主要原因，該菌對青霉素、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的敏感性正在衰退，而在體外實驗中與之相關(guān)的用藥對肺炎鏈球菌的抗菌效果的研究則引起了廣泛的關(guān)注[4]。本研究結(jié)果證實，阿莫西林、紅霉素的單劑用藥和二者聯(lián)合應(yīng)用殺菌效果均隨著時間的推移而不斷增加，紅霉素對肺炎鏈球菌存在體外殺菌作用，與阿莫西林聯(lián)合應(yīng)用時，藥物的殺菌效果不僅不會被減弱，而且還會有所增強，值得在臨床上推廣。

參考文獻：

[1]劉建華，劉勇，孫繼梅，等.阿莫西林與紅霉素對肺炎鏈球菌的體外抗菌效果[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2007，12（5）：372-375.

[2]宋秀杰，劉又寧，梁蓓蓓，等.20種抗菌藥物對肺炎鏈球菌的體外抗菌活性研究[J].中國藥物應(yīng)用與監(jiān)測，2010，10（1）：20-23.

[3]張樹敬.青霉素耐藥肺炎鏈球菌的分子流行病學(xué)與適應(yīng)性研究[D].復(fù)旦大學(xué)，2012.

[4]劉洋.泰樂菌素-阿莫西林聯(lián)用對豬鏈球菌體外藥效學(xué)及MSW的研究[D].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010.

編輯/張燕