ABO血型鑒定錯(cuò)誤原因分析與質(zhì)量控制方法

摘要：目的 總結(jié)探討血型鑒定的影響因素。方法 對(duì)226例健康體檢人群玻片法和試管法同時(shí)進(jìn)行ABO血型鑒定。結(jié)果 兩種方法檢測(cè)結(jié)果不是完全相符，除AB型兩種方法檢測(cè)結(jié)果基本一致外，其他血型（A型、B型、O型）的人數(shù)存在一定差異。結(jié)論 在血型鑒定中，如果出現(xiàn)正反定型結(jié)果不相符時(shí)，應(yīng)找到對(duì)血型鑒定造成影響的因素，針對(duì)因素，采取措施。

關(guān)鍵詞：血型鑒定；影響因素；質(zhì)量控制

紅細(xì)胞的兩大血型抗原抗體系統(tǒng)是ABO血型系統(tǒng)和RH血型系統(tǒng)，這兩大系統(tǒng)在臨床輸血和遺傳學(xué)研究上的意義非常重要[1]。血型鑒定正確與否是保證安全輸血的前提。生理鹽水凝集法是臨床最常用ABO血型鑒定方法，有玻片法和試管法兩種方法。本文主要對(duì)ABO血型鑒定中最常見(jiàn)出現(xiàn)錯(cuò)誤原因進(jìn)行分析及質(zhì)量控制方法。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2014年1月～6月我院226例健康體檢人群為研究對(duì)象，年齡20～28歲，平均年齡（24.3±3.7）歲。所有研究對(duì)象均無(wú)嚴(yán)重的傳染性疾病和血液疾病。

1.2標(biāo)本采集 抽取EDTA抗凝血后在2h內(nèi)完成血型鑒定操作。

1.3血型試劑 采用上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)提供的ABO血型反定型用紅細(xì)胞試劑盒；抗A、抗B血型鑒定單克隆抗體購(gòu)置于長(zhǎng)春博徳生物技術(shù)有限公司[2]。

1.4鑒定方法 嚴(yán)格按照相關(guān)步驟方法進(jìn)行操作。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)處理，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示計(jì)量資料。采用頻數(shù)和率表示計(jì)數(shù)資料，采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

見(jiàn)表1。

由表1可以看出，兩種方法對(duì)226名健康體檢患者的血型檢測(cè)結(jié)果基本上是一致的。其中O型人數(shù)占比率最多，B型、A型人數(shù)次之，AB血型人數(shù)占比率最少。除AB型血型兩種方法的檢測(cè)結(jié)果一致外，其他血型（A型血型，B型血型，AB型血型）的人數(shù)存在一定的差異。

3 討論

3.1紅細(xì)胞方面的原因 ①血型檢測(cè)時(shí)，因患者紅細(xì)胞懸液過(guò)濃或過(guò)淡，使反應(yīng)不明顯，誤判為陰性反應(yīng)。紅細(xì)胞懸液（5%）配制要準(zhǔn)確，抗原抗體比例要適當(dāng)；②被檢者的紅細(xì)胞受到細(xì)菌污染，暴露了紅細(xì)胞上的T抗原，被各型血清中正常存在的抗T活性的IgM凝集，引起假凝集；③防止冷凝集素干擾。在較低溫度條件下，冷凝集素能夠與標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞和自身紅細(xì)胞可產(chǎn)生凝集現(xiàn)象，凝集強(qiáng)度隨著溫度升高而減弱[3]。若血清中有高效價(jià)冷凝集素，可使用37℃生理鹽水對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，再進(jìn)行血型鑒定，能排除因冷凝集對(duì)血型鑒定造成的干擾；④ABO亞型存在的干擾。在A抗原中主要為A1和A2，其他A亞型不多見(jiàn)，而B亞型通常比A亞型更少[4]；⑤某些患者腸道受到革蘭氏陰性桿菌感染而使紅細(xì)胞上獲得類B抗原，可與抗B標(biāo)準(zhǔn)血清出現(xiàn)假凝集；⑥某些白血病或惡性腫瘤患者由于紅細(xì)胞上抗原性減弱，與抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清不發(fā)生凝集反應(yīng)而常被誤定為O型。

3.2分型血清方面的原因 ①自制抗A、抗B、和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清不符合條件。如標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)太低、親和力不強(qiáng)造成定型不準(zhǔn)確；②某些患者在疾病治療過(guò)程中輸用了高飛子血漿代用品，造成紅細(xì)胞聚集，引起假凝集；③血清中不規(guī)則抗體引起的干擾：如A2和A2B型患者內(nèi)有抗A1抗體，能凝A1紅細(xì)胞。遇此情況可將紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌后再試驗(yàn)；④ABO血型抗體水平下降：某些疾病造成免疫球蛋白下降，血型抗體也下降甚至缺如，也是造成正反定型不符的重要因素；⑤受檢者血清中蛋白紊亂（高球蛋白血癥），或試驗(yàn)時(shí)溫度過(guò)高，常引起紅細(xì)胞呈緡錢狀排列?？杉拥葷B鹽水1滴混勻，可使紅細(xì)胞緡錢現(xiàn)象消失；⑥嬰幼兒及老年人血清中ABO抗體較弱，反定型時(shí)可出現(xiàn)不凝集或弱凝集；⑦某些疾病影響，使血清中球蛋白或纖維蛋白原增高，常引起假凝集。

3.3操作方面的原因是最常見(jiàn)的原因 ①玻璃試管不清潔，抗體試劑和生理鹽水受到細(xì)菌污染，可造成假陽(yáng)性；②紅細(xì)胞與抗體試劑比例不對(duì)應(yīng)、離心速度過(guò)大或過(guò)小、離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，都可出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性；③忽略溶血現(xiàn)象（發(fā)現(xiàn)溶血應(yīng)檢查鹽水是否等滲并將紅細(xì)胞洗滌后重配懸液）[5]；④人為原因引起標(biāo)本張冠李戴、書寫錯(cuò)誤、未加入或使用失效試劑等。

4 正反定型結(jié)果不一致解決辦法

遇到正反定型結(jié)果不一致時(shí)，首選重復(fù)試驗(yàn)，如仍然正反定型不符則做以下試驗(yàn)[6]：重新采集獻(xiàn)血員和受血者的新鮮標(biāo)本，以糾正因污染或搞錯(cuò)樣本造成的正反定型不符；多次洗滌被檢紅細(xì)胞和標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞，除去可引起意外陽(yáng)性反應(yīng)的血漿中或紅細(xì)胞保存試劑中的化學(xué)成分；用抗A1、抗AB檢測(cè)紅細(xì)胞；如懷疑血清中有抗A1，可用數(shù)份A2紅細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)；如果試驗(yàn)結(jié)果未見(jiàn)凝集，應(yīng)將正反試驗(yàn)在室溫或4℃放置30min，用顯微鏡核實(shí)；若懷疑是由于抗原減弱造成的正反定型不符，可進(jìn)一步做木瓜酶、直接抗人球蛋白、吸收放散試驗(yàn)等加以鑒別。

綜上所述，血型鑒定是臨床輸血的首要問(wèn)題，是每個(gè)住院患者都需要做的常規(guī)檢查項(xiàng)目之一，尤其是急需搶救和輸血的危重患者輸血前必須鑒定血型，科學(xué)的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件[7-8]。可根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，找到對(duì)血型鑒定造成影響的因素，針對(duì)因素，采取措施，以免出現(xiàn)ABO血型的誤判，產(chǎn)生嚴(yán)重的輸血事故。

參考文獻(xiàn)：

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[3]馬海峰.高效價(jià)自身冷抗體致血型正反定型不符1例[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，25（7）：591-592.

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[6]羅春麗，龔道元，張家忠.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：106.

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編輯/哈濤