乙型肝炎表面抗原膠體金免疫層析法血清快速測定性能研究

摘要：目的 通膠體金免疫層析法血塊快速對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）進行相關(guān)性能的測定，并評價測定結(jié)果。方法 對每年固定時間段內(nèi)相關(guān)調(diào)查及反饋作出客觀準確的描述性分析。結(jié)果 通過分析510例臨床患者樣本檢測情況，可知膠體金免疫層析法血塊快速檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的檢測靈敏度為5.0IU/ml，在實驗過程中最突出的問題就是陽性漏檢。通過將ELISA試劑檢測方法同本次試驗中的膠體金免疫層析法進行比較，可知其一致性較高。結(jié)論 在臨床應(yīng)用方面，ELISA試劑檢測方法和膠體金免疫層析法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的檢測結(jié)果一致性均比較高，但是在篩選乙型肝炎表面抗原（HBsAg）時應(yīng)該選用更為敏感的試劑檢測方法代替膠體金免疫層析法。

關(guān)鍵詞：膠體金免疫層析法；快速檢測；乙型肝炎表面抗原

在醫(yī)學(xué)免疫檢測領(lǐng)域，免疫膠體金標記方法因為其操作起來比較方便而被人們廣泛使用，成為一種重要的免疫檢測手段。本文將對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）進行膠體金免疫層析測定，并進行相關(guān)評價。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取在2010年1月～2014年12月某綜合醫(yī)院門診和住院患者以及該市臨床檢驗中心的檢測標本共510例。將收集到了臨床檢測樣本通過ELISA法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）進行檢測，隨后放置于零下2℃的環(huán)境中等待進一步檢測。

1.2方法 根據(jù)我國臨床檢測的相關(guān)規(guī)章制度和程序?qū)εR床試驗標本進行科學(xué)合理的處理。

1.3指標評估 將已知濃度為10IU/ml的乙型肝炎表面抗原定值血清稀釋成不同的濃度，如3IU/ml、4IU/ml、5IU/ml、6IU/ml、7IU/ml、8IU/ml、9IU/ml等。通過20份試紙條對不同稀釋濃度的乙型肝炎表面抗原的檢測靈敏度，即根據(jù)檢測的特異度（真陰性率）和靈敏度（真陽性率）將選出的患者判為非患者（實際無病）和患者（實際患?。煌ㄟ^誤診率（假陽性率）和漏診率（假陰性率）確定非患者中檢查異常和呈陽性的人數(shù)比例以及患者中檢查正常和呈陰性的人數(shù)比例。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 在本次檢測試驗中，對相關(guān)結(jié)果的陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值、特異度以及靈敏度等數(shù)據(jù)資料采用Microsoft Excel表格計算軟件進行處理。

2 結(jié)果

2.1臨床檢測評價 在對本次510例臨床檢測標本的數(shù)據(jù)資料進行統(tǒng)計分析后，得出其一般性描述特征，將采用兩種ELISA試劑檢測法同膠體金免疫層析法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的結(jié)果進行比較，可知一致性均比較高。其中一共有15例結(jié)果不一致的樣本，見表1。

2.2中和確認實驗 本次檢測實驗中共出現(xiàn)結(jié)果不一致的標本15例，應(yīng)該進一步對這15例檢測標本進行中和確認實驗。通過對實驗結(jié)果數(shù)據(jù)計算分析可知，B試劑的NEUT（%）值大于50%，且B試劑的（S/N）值均大于1.5，表明中和實驗確認了試驗結(jié)果為陽性。

3 討論

乙型肝炎表面抗原（HBsAg）常常出現(xiàn)在人體的血液中，是一種具有代表性的病毒血清學(xué)標志物。人體感染乙型肝炎病毒后的第一個出現(xiàn)的病毒血清學(xué)標志物就是乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。我國是乙型肝炎的高發(fā)病區(qū)以及高感染區(qū)，應(yīng)該努力提高檢出乙型肝炎病毒的能力[1-3]。目前實驗最常用的檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）方法是酶聯(lián)免疫吸附法，塔重復(fù)性、特異性以及靈敏度都能很好地滿足檢測要求，但是其操作繁瑣，且檢測時間達3h左右。而膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的方法是一種現(xiàn)代醫(yī)學(xué)即時檢驗（全稱Point of Care Testng，簡稱POCT）方法。它不僅能有效減少標本周轉(zhuǎn)時間，提高功效比，而且操作起來比較方便。

在本次檢測試驗中，主要評價了膠體金免疫層析法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的檢測考核系統(tǒng)。檢測試劑的實際靈敏度為5 IU/ml，因為膠體金需要較高濃度的標記物才能顯示其變色結(jié)果，因此在檢測標記物濃度較低時，其檢測靈敏度受到了一定的影響。除了這個缺陷以外，總體而言，膠體金免疫層析法對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的檢測還是比較方便和快速的。

膠體金免疫層析法因其檢測試劑穩(wěn)定、設(shè)備儀器簡便易于操作、快速顯效、特異性高、隨到隨測等優(yōu)勢。但是通過本次試驗表明，在檢測過程中，陰性結(jié)果基數(shù)較大，而且標本的檢測量越大，兩種ELISA試劑和膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）結(jié)果的一致性就越大?？梢?，對于高濃度膠體金試紙，其檢測結(jié)果會因出現(xiàn)單一性和特異性而導(dǎo)致差異。膠體金免疫層析法的一致性要低于ELISA試劑檢測法的一致性。但酶聯(lián)免疫吸附法明顯高于HBV-M試劑的靈敏度。

通過本次臨床檢測樣本試驗可知，通過膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎表面抗原（HBsAg）能夠及時為乙型肝炎病毒感染的早期診斷及治療提供有價值的依據(jù)，是乙型肝炎早期診斷的有效手段。但是在大量檢測和篩選乙型肝炎表面抗原（HBsAg）時應(yīng)該選用更為敏感的試劑檢測方法。

參考文獻：

[1]馬光.乙型肝炎表面抗原膠體金免疫層析法血清快速測定的性能評估[J].中國實用醫(yī)藥.2014.9（9）26：142-143.

[2]張茂海，吳建業(yè)，陸玲娜，等.膠體金與酶聯(lián)免疫法檢測乙肝表面抗原結(jié)果分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011，9（32）：14.

[3]李伶俐，孫俊聰.400例乙肝表面抗原膠體金試紙條與ELISA法檢測結(jié)果分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011，9（28）：35-36.

編輯/哈濤