中藥方治療口腔潰瘍的實驗研究

摘要：目的 研究中藥方的抗?jié)冏饔?。方?3組SD大鼠，分別為對照組、中藥組、西藥組，用40%冰醋酸制造口腔潰瘍，觀察不同治療方法對口腔潰瘍愈合的影響。結(jié)果 中藥組和西藥組大鼠口腔潰瘍愈合時間明顯短于對照組，中藥組大鼠口腔潰瘍愈合時間長于西藥組，體重下降小于西藥組。結(jié)論 中藥方能促進大鼠口腔潰瘍愈合，其毒副作用小于左旋咪唑。

關(guān)鍵詞：口腔潰瘍；動物模型；SD大鼠；中藥方；左旋咪唑

Experimental Study on the Treatment of Oral Ulcer with Chinese Herbal Medicine

CAO Ming-xin1，LI Xin-yun1，WANG Yan2，LIU Si-mei2

（1.West China School/Hospital of Stomatology Sishuan University·State Key Laboratory of Oral Disease Research，Chengdu 610000，Sichuan，China；2.West China School of Pharmacy Sichuan University，Chengdu 610000，Sichuan，China）

Abstract：Objective To observe the curative effects of a Chinese medicinal formulae on SD rats of Aphthous Ulcer.Methods Aphthous Ulcer was induced in 3 groups of SD rats.The 3 groups，including control group，Chinese medicinal group and Western medicinal group，were divided ramdomly.The healing of the 3 groups of rats which are under different curatives were observed.Results The average cure periods in the Chinese medicinal group and the Western medicinal group were significantly shorter than that of control group.The average cure period in the Chinese medicinal group was shorter than that of the Western medicinal group while the decline of weights was less than that of the Western medicinal group.Conclusion The Chinese medicinal formulae do help to cure Aphthous Ulcer of SD rats and its side effects are less than that of levamisole.

Key words：Aphthous ulcer；Animal model；SD rats；Chinese medicinalformulae；Levamisole

復(fù)發(fā)性口腔潰瘍（RAU），是最常見的口腔黏膜潰瘍類疾病，具有周期性、復(fù)發(fā)性、自限性特征，灼痛明顯，影響患者日常生活[1]。本實驗建立大鼠口腔潰瘍模型，進一步驗證該中藥方的有效性，為臨床使用提供依據(jù)。近年來，大量研究提示免疫因素是RAU最重要的發(fā)病機制，尤其是細胞免疫應(yīng)答與RAU的發(fā)生有關(guān)[2]。該中藥方由生黃芪、生甘草、黃芩、黃柏、白芨組成，通過方藥分析發(fā)現(xiàn)其組分對機體免疫功能有一定的調(diào)節(jié)作用。

1資料與方法

1.1一般資料 健康清潔級SD大鼠30只，體重（220±20）g，雌雄各半，將大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1w，正常飲食。將實驗動物隨機分成3組，對照組10只，中藥組10只，西藥組10只，雌雄各半。

1.2試劑 10%的水合氯醛（麻醉劑），中藥方（黃芩、黃柏、白芨各12g，生甘草10g，生黃芪15g為一劑），左旋咪唑片（西藥組用藥），40%冰醋酸（用于建立大鼠創(chuàng)傷型口腔潰瘍模型）。

1.3中藥制備 中藥方（黃芩、黃柏、白芨各12g，生甘草10g，生黃芪15g），50～60℃恒溫水浴下制成生藥濃度為1g/1mL藥液，分裝滅菌，備用。按人鼠等效劑量換算，大鼠每日用量為1.278g/200g，即1.278mL/200g。

1.4動物造模 以水合氯醛腹腔注射麻醉SD大鼠，止血鉗分開上下頜，固定，平齒鑷輕輕拉出右側(cè)口腔邊緣皮膚，用小玻璃棒沾一定量的40%冰醋酸，準確放置于右側(cè)頰黏膜處，固定持續(xù)接觸5～10s，以出現(xiàn)黏膜潰破為準[3]。盡量使每只大鼠的創(chuàng)面大小及深度相當。次日創(chuàng)面可見白色偽膜覆蓋，揭開后可見深潰瘍，周圍黏膜均充血水腫。

1.5給藥方法 中藥組中藥按1.278mL/200g灌胃，西藥組左旋咪唑片按20mg/Kg灌胃。建模后次日開始，灌胃1次/d，其余飼養(yǎng)條件三組均完全一樣。

1.6觀察指標 從建模后次日開始，每日觀察各組大鼠口腔潰瘍的愈合狀況，如：偽膜情況，潰瘍深度、面積，唾液狀況，并記錄大鼠的皮毛光潔程度、體重增減情況以及精神狀態(tài)和活動度。每日記錄觀察結(jié)果直至大鼠口腔潰瘍完全痊愈后處死大鼠，記錄大鼠口腔潰瘍愈合的天數(shù)以及最終體重的變化量。

1.7統(tǒng)計學(xué)方法 運用SPSS 20.0對大鼠口腔潰瘍愈合天數(shù)以及體重改變量進行統(tǒng)計學(xué)分析。使用描述統(tǒng)計數(shù)據(jù)的方法分析對照組、中藥組、西藥組大鼠的平均體重改變量、平均愈合天數(shù)。使用單因素ANOVA比較三組大鼠平均體重改變量差異及平均愈合天數(shù)差異。所有數(shù)據(jù)均運用SPSS軟件分析（SPSS 20.0）。P<0.05認為具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1實驗動物數(shù)量分析 實驗共選取30只SD大鼠，體重（220±20）g，雌雄各半，適應(yīng)性飼養(yǎng)1w后大鼠皮毛光潔，精神狀態(tài)好，隨機分為3組；全部進入結(jié)果分析，無脫失。

2.2皮毛光潔程度、體重增減情況以及精神狀況和活動度對照組大鼠口腔潰瘍病程中皮毛黯淡無光澤，較臟，精神萎靡，活動度較差。隨潰瘍愈合，皮毛恢復(fù)光潔，精神狀態(tài)一般，體重下降較多；中藥組大鼠口腔潰瘍病程中皮毛較臟，精神較萎靡。潰瘍愈合后皮毛恢復(fù)光潔，精神狀態(tài)較好，中藥組大鼠體重大都有所增加；西藥組大鼠口腔潰瘍病程中皮毛缺少光澤，較臟，精神較萎靡，活動度較差。隨潰瘍愈合，皮毛恢復(fù)光潔，精神狀態(tài)較好。

2.3潰瘍愈合時間及體重變化比較 由以上統(tǒng)計學(xué)分析可知，中藥組和西藥組的大鼠的口腔潰瘍平均愈合時間均比對照組明顯縮短，其中西藥組大鼠的口腔潰瘍平均愈合時間比中藥組的短。在體重變化方面，對照組大鼠體重下降較多，中藥組大鼠體重有一定上升，西藥組大鼠體重變化較小，潰瘍對中藥組大鼠的體重影響最小，見圖1，表1）。

3討論

RAU是口腔黏膜最常見的疾病，患病率居口腔黏膜病的首位，發(fā)病率達到了20%[4]。迄今為止，RAU的治療是經(jīng)驗性的，其主要目標是減輕痛苦、恢復(fù)功能并且減少復(fù)發(fā)[5]。在中醫(yī)學(xué)方面，主要是從清熱瀉火法和滋陰降火法治療[6]。

本中藥方由生黃芪、生甘草、黃芩、黃柏、白芨組成。黃芪有調(diào)節(jié)免疫的作用，其中的黃芪多糖有明顯的抗病毒和增強免疫的作用[7]，黃芪注射液可以在黏膜損傷的早期通過誘導(dǎo)細胞分化，發(fā)揮其黏膜修復(fù)作用[8]。甘草清熱解毒，補脾益氣，緩急止痛。甘草提取物甘草酸具有抗病毒、抗炎、抗氧化、抗變態(tài)反應(yīng)、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等作用[9]。甘草甜素能促進樹突狀細胞成熟并上調(diào)其功能，顯著刺激T細胞增殖，同時可促進樹突狀細胞功能性產(chǎn)物IL-12表達的增高，實現(xiàn)免疫調(diào)節(jié)的作用[10]。黃芩清熱燥濕，瀉火解毒，一方面抗Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，另一方面黃芩可提高機體免疫功能，抑制HIV-1及HIV-1 RT的活性[11]。黃柏具有抗菌，抗炎作用，與黃芩配伍使用，清心胃實熱，敗氣血實火，散結(jié)而消斑，祛除潰瘍發(fā)生的病因[12]。白芨苦寒清泄，辛散消腫，有斂瘡生肌，清熱解毒，消癰散結(jié)之功效。該藥對局部出血有止血作用。同時白芨揮發(fā)油對淋巴細胞轉(zhuǎn)化有較強的刺激增殖作用，能夠活化淋巴細胞、提高機體免疫功能[13，14]。

本實驗結(jié)果表明，該中藥組的SD大鼠口腔潰瘍的平均愈合天數(shù)短于對照組，西藥組的SD大鼠口腔潰瘍的平均愈合天數(shù)短于對照組，也短于中藥組，中藥組大鼠體重下降少于西藥組，即該中藥方對SD大鼠口腔潰瘍的愈合有促進作用，雖然左旋咪唑的促進作用更加明顯，但該中藥方大鼠體重下降比左旋咪唑組大鼠的體重下降少大約9g，對大鼠的影響小于左旋咪唑。隨著醫(yī)療事業(yè)與社會的發(fā)展，中藥的應(yīng)用范圍越來越廣，正確使用中藥，不違反配伍原則，中藥也可達到良好的療效與安全性[15]。

在本實驗中，我們采用冰醋酸化學(xué)燒灼法制備SD大鼠口腔潰瘍模型，其優(yōu)點是簡單易行，可操作性強，影響因素單一，便于控制，可形成類似于人類的口腔潰瘍。但缺點是采用此法形成的潰瘍，為化學(xué)藥品刺激性損傷造成的創(chuàng)傷性潰瘍，不能模擬人類復(fù)發(fā)性口腔潰瘍的形成過程，與臨床實際情況仍有一定差別。RAU主要表現(xiàn)為慢性炎癥的病理狀態(tài)。在RAU病損早期，黏膜上皮細胞內(nèi)及細胞間水腫，可形成上皮內(nèi)皰。上皮內(nèi)及血管周圍有密集的淋巴細胞、單核細胞浸潤；隨后有多形核白細胞、漿細胞浸潤，上皮細胞破潰脫落，形成潰瘍。RAU病損的潰瘍期表面有纖維素性滲出物形成假膜或壞死組織覆蓋；固有層內(nèi)膠原組織水腫變形、均質(zhì)化或彎曲斷裂，甚至破壞消失；炎癥細胞大量浸潤；毛細血管充血擴張，血管內(nèi)皮細胞腫脹，管腔狹窄甚至閉塞，有小的局限性壞死區(qū)，或見血管內(nèi)玻璃樣血栓。而創(chuàng)傷性潰瘍雖然也表現(xiàn)為慢性炎癥的病理狀態(tài)，但其無自限性與周期復(fù)發(fā)性，病理狀態(tài)與RAU也不完全相同[1]。由于本實驗采取的冰醋酸燒灼法并不能完全地展現(xiàn)和反映出人體復(fù)發(fā)性口腔潰瘍的病理狀態(tài)，因此，該中藥方治療復(fù)發(fā)性口腔潰瘍的療效需要進一步的研究。

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編輯/申磊