摘要:目的 探討成人原發(fā)性腎病綜合征的發(fā)生與EB病毒(EBV)感染的相關(guān)性。方法 隨機(jī)選取65例成人原發(fā)性腎病綜合征患者外周血行EB病毒DNA檢測(cè),隨機(jī)選取80例健康成年人作為對(duì)照,比較兩組EB病毒DNA載量的差異。結(jié)果 腎病綜合征患者血液中EB病毒DNA載量明顯高于健康成人,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 EB病毒感染可能與成人腎病綜合征的發(fā)生相關(guān)。
關(guān)鍵詞:EB病毒;成人腎病綜合征
Epstein-Barr病毒(EBV)為皰疹病毒科嗜淋巴細(xì)胞病毒屬的成員,為95%以上的成人所攜帶。它是傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體,并與腫瘤的發(fā)生有密切關(guān)系,被列為可能致癌的人類腫瘤病毒之一[1-2]。EB病毒是一種雙鏈DNA病毒,能引起多種器官的損害,許多研究表明,EB病毒可以引起腎小球腎炎,腎損害等[3-4],此外,有文獻(xiàn)報(bào)道兒童原發(fā)性腎病綜合征(PNS)患者中EB病毒感染率高[5]EB病毒感染可能與PNS的發(fā)生有關(guān)。本文中我們通過EBV-DNA檢測(cè),探討成人腎病綜合征和EB病毒感染的相關(guān)性,現(xiàn)報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 隨機(jī)選取2014年3月~2015年5月在我院腎內(nèi)科65例住院患者為研究對(duì)象,全部病例均符合第7版人民衛(wèi)生出版社出版《內(nèi)科學(xué)》中腎病綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn),均為首次發(fā)病并未接受治療初診者,年齡22~60歲(中位年齡為32歲),其中男29例,女36例。對(duì)照組為我院同期健康體檢者80例,年齡21~60歲(中位年齡為30歲),其中包括男性43例,女性37例。兩組年齡,性別等一般資料相比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
1.2方法 治療前,用EDTA鉀鹽抗凝管采集腎病綜合征組和對(duì)照組人群的外周血5ml,混勻,取1 ml全血用等量生理鹽水稀釋,然后緩慢加入1ml淋巴細(xì)胞分離液,離心1600rpm,15min,收集中間淋巴細(xì)胞層,加入50ul DNA提取液混勻,金屬浴100℃保溫10min,13000rpm/min離心5min,吸取上清液2ul用于PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增采用廣東中山大學(xué)達(dá)安基因公司EBV-DNA擴(kuò)增熒光檢測(cè)試劑盒,并嚴(yán)格按照試劑盒反應(yīng)體系和條件進(jìn)行。試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品、陽性和陰性參考品與樣品同時(shí)反應(yīng),讀取CT值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算EBV-DNA拷貝數(shù),>1000copies/ml判為陽性。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0軟件處理數(shù)據(jù),采用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較,P<0.05判定為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
腎病綜合征組EBV-DNA陽性率為78.5%,其中DNA載量在103~104copies/ml范圍內(nèi)占35.4%,104~105copies/ml范圍的占30.6%,>105copies/ml范圍的占12.5%,而健康對(duì)照組只有8%的呈EB病毒DNA陽性,并且這部分人群EBV-DNA載量在103~104copies/ml之間,屬于低拷貝。成人腎病綜合征組EBV-DNA陽性患者EBV-DNA載量的平均值為4.1×104copies/ml,健康對(duì)照組EBV-DNA陽性患者EBV-DNA載量的平均值為1.2×103copies/ml。通過配對(duì)t檢驗(yàn)計(jì)算,兩組EBV-DNA載量差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。綜上結(jié)果提示成人腎病綜合征患者EBV-DNA載量比健康成年人高。見表1。
3 討論
EB病毒是一種DNA病毒,呈球型,在B淋巴細(xì)胞中復(fù)制,主要通過唾液傳播。人是EBV感染的宿主,EBV首次感染后,可以長(zhǎng)期存在于記憶B細(xì)胞,建立潛伏感染,通常無臨床癥狀,細(xì)胞免疫在EBV感染中起著關(guān)鍵性作用,該功能下降將導(dǎo)致EBV的活化,活化的EB感染是發(fā)生多種惡性增殖性疾病的危險(xiǎn)因素[6]。在一些免疫系統(tǒng)性疾病如SLE、原發(fā)性干燥綜合征等發(fā)現(xiàn),EB的感染可引起免疫功能的紊亂。
腎病綜合征可由多種病因引起,以腎小球基膜通透性增加,表現(xiàn)為大量蛋白尿、低蛋白血癥、高度水腫、高脂血癥的一組臨床癥候群。2012年Deana Mikhalkova等人報(bào)道了1例與EB病毒感染相關(guān)的22歲女性腎病綜合征患者病例,揭示EB病毒感染可能通過引發(fā)腎微小病變進(jìn)而導(dǎo)致腎病綜合征的發(fā)生[7]。此外,也有研究表明EB病毒引起的免疫復(fù)合物可造成腎小球基底膜的損害,從而引起腎炎性腎病綜合征[5]。在本研究中,我們通過熒光定量PCR的方法進(jìn)行EBV-DNA水平的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)成人腎病綜合征患者EBV-DNA載量比健康成年人高,進(jìn)而提示EB病毒感染與腎病綜合征的發(fā)生可能有關(guān)聯(lián)。因此,在腎病綜合征的治療中,還需注意抗EB病毒感染治療。
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編輯/蔡睿琳