血清分泌型卷曲相關(guān)蛋白5及載脂蛋白B對(duì)肥胖型2型糖尿病的影響

黃文森，鄧少雄，吳晴翼，李靖云(泉州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校內(nèi)科學(xué)教研室，泉州 36000;福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院內(nèi)分泌科;通訊作者，E-mail:drdengsx@6．com)

分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(secreted frizzled-related protein 5，SFRP5)是一種新近鑒定的抗炎脂肪因子［1］，血循環(huán)中的SFRP5被認(rèn)為是肥胖相關(guān)代謝紊亂的重要標(biāo)志，與胰島素抵抗密切相關(guān)［2］。載脂蛋白B(apolipoprotein B，ApoB)是低密度脂蛋白膽固醇的主要載脂蛋白，代表致動(dòng)脈硬化的脂蛋白顆粒數(shù)，也與胰島素抵抗密切相關(guān)［3］。胰島素抵抗則是2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)及肥胖發(fā)病的重要病理生理基礎(chǔ)［4］，但目前國內(nèi)外關(guān)于血清SFRP5、ApoB與肥胖型T2DM的研究尚少。本文通過研究肥胖型T2DM患者血清SFRP5、ApoB水平的變化及相關(guān)性，旨在為闡明血清SFRP5、ApoB在肥胖型2型糖尿病發(fā)病中的重要作用提供依據(jù)，從而為臨床早期干預(yù)和治療肥胖型T2DM提供一種可能的途徑。

1 資料與方法

1．1 研究對(duì)象

根據(jù)1999年世界衛(wèi)生組織糖尿病專家委員會(huì)制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］，選擇2014－09～2015－02在福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院(泉州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校教學(xué)醫(yī)院)內(nèi)分泌科住院的2型糖尿病患者288例。排除標(biāo)準(zhǔn):①1型糖尿病或其他特殊類型糖尿病。②糖尿病酮癥酸中毒、高血糖高滲狀態(tài)及其他糖尿病急性并發(fā)癥。③近期有手術(shù)、創(chuàng)傷(6個(gè)月內(nèi))或合并嚴(yán)重感染。④嚴(yán)重心、腦、肝、腎功能損害及影響糖代謝的其他內(nèi)分泌疾病。⑤妊娠、哺乳期或長期服用避孕藥婦女。⑥長期使用糖皮質(zhì)激素治療、細(xì)胞毒性藥物治療、免疫抑制劑治療者。⑦近2月有口服調(diào)脂藥物。根據(jù)1999年世界衛(wèi)生組織亞太地區(qū)肥胖癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，以體重指數(shù)(body mass index，BMI)是否≥25 kg/m2將2型糖尿病患者分為兩組:肥胖組(BMI≥25 kg/m2)146例，男性76例，女性70 例，年齡(52．75 ±11．72)歲;非肥胖組(BMI＜25 kg/m2)142例，男性73例，女性69例，年齡(53．11±12．26)歲。兩組間性別、年齡差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。

1．2 方法

1．2．1 體格檢查及血壓的測(cè)量 由專人檢測(cè)患者身高(H)、體重(W)、腰圍(WC)、臀圍(HC)，計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、腰臀比(WHR)?；颊呙撔⒚夤跍y(cè)量身高、體重;患者取站立位，雙足分開25－30 cm，測(cè)量腰圍時(shí)測(cè)量位置為通過兩側(cè)髂前上棘與第12肋下緣的中點(diǎn)連線長度，測(cè)量臀圍時(shí)測(cè)量位置為通過兩側(cè)股骨大轉(zhuǎn)子連線長度。體質(zhì)量指數(shù)=體質(zhì)量(kg)/身高2(m2)，腰臀比=腰圍/臀圍。用標(biāo)準(zhǔn)臺(tái)式水銀柱血壓計(jì)測(cè)量右上肢肱動(dòng)脈血壓，測(cè)量前讓患者安靜休息15 min，測(cè)量兩次，取其平均值(mmHg)作為血壓測(cè)量結(jié)果記錄。

1．2．2 生化指標(biāo)檢測(cè) 所有患者均禁食10－12 h，于第2天清晨空腹采靜脈血，甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、載脂蛋白A1(ApoA1)、載脂蛋白B(ApoB)、空腹血糖(FPG)、尿酸(UA)由全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定;糖化血紅蛋白(HbA1c)采用高壓液相色譜法檢測(cè);空腹胰島素(FINS)采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定;計(jì)算穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)，HOMA-IR=空腹血糖×空腹胰島素/22．5。

1．2．3 血清SFRP5檢測(cè) 所有患者另取一份5 ml靜脈血于血清分離管中室溫放置2 h，然后1 000×g離心20 min，取其上清置于－80℃冰箱，用于檢測(cè)SFRP5。血清SFRP5采用雙抗夾心ELISA法定量測(cè)定，試劑盒由美國Cloud-Clone公司生產(chǎn)，批內(nèi)CV＜10%，批間CV＜12%。

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2．1 肥胖組和非肥胖組的臨床資料比較

肥胖組的 WC、HC、WHR、TG、LDL-C、ApoB、UA、HOMA-IR均高于非肥胖組，而肥胖組HDL-C低于非肥胖組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)。肥胖組血清SFRP5水平低于非肥胖組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0．05，見表1)。

2．2 Logistic回歸分析T2DM患者發(fā)生肥胖的影響因素

以是否患肥胖癥作為因變量的二分類非條件Logistic回歸分析，結(jié)果顯示SFRP5、ApoB、UA作為獨(dú)立影響因素影響T2DM患者肥胖的發(fā)生(見表2)。

表1 肥胖組與非肥胖組的臨床指標(biāo)比較Table 1 Comparison of clinical parameters between obesity group and non-obesity group

表2 T2DM患者發(fā)生肥胖的影響因素Logistic回歸分析Table 2 Logistic regression analysis for risk factors of obesity in T2DM

2．3 偏相關(guān)分析

偏相關(guān)分析結(jié)果顯示，校正WC、HC、WHR、TG、LDL-C、HDL-C、ApoB、UA、HOMA-IR 后，血清 SFRP5水平與 BMI呈負(fù)相關(guān)(r=－0．218，P ＜0．05);校正WC、HC、WHR、TG、LDL-C、HDL-C、UA、HOMA-IR、血清SFRP5后，ApoB水平與 BMI呈正相關(guān)(r=0．193，P ＜0．05)。

3 討論

T2DM與肥胖均屬于與生活方式密切相關(guān)的多因素、多基因遺傳性疾病，已經(jīng)成為世界范圍的流行病，嚴(yán)重地影響人類的健康。本研究結(jié)果表明，肥胖組的 WC、HC、WHR、TG、LDL-C、UA、HOMA-IR 均高于非肥胖組，而肥胖組HDL-C低于非肥胖組，說明肥胖組的T2DM患者更易出現(xiàn)脂代謝紊亂、高尿酸血癥及胰島素抵抗，這與瞿華等［6］的研究結(jié)果相一致。載脂蛋白具有脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的功能，是脂蛋白顆粒重要的結(jié)構(gòu)和功能蛋白，而ApoB反映極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)、中間密度脂蛋白膽固醇(IDL-C)、LDL-C的顆?？倲?shù)，亦可更好地反映小而密的LDL-C的數(shù)量，參與肝臟膽固醇及甘油三酯的轉(zhuǎn)運(yùn)，具有致動(dòng)脈硬化的作用，可做為機(jī)體發(fā)生心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)性的預(yù)測(cè)指標(biāo)［7］。Sierra-Johnson 等［8］通過對(duì)2 955名非糖尿病的成年美國人進(jìn)行研究，認(rèn)為ApoB與胰島素抵抗密切相關(guān)，并與傳統(tǒng)的危險(xiǎn)因素如代謝綜合征構(gòu)成組分及炎性風(fēng)險(xiǎn)因子等相獨(dú)立。國內(nèi)龔蘭等［9］學(xué)者對(duì)T2DM及糖耐量受損(IGT)患者的研究表明T2DM組的ApoB值高于IGT組，IGT組的ApoB值高于正常對(duì)照組差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;且ApoB與HOMA-IR相關(guān)性優(yōu)于TG、TC、LDL-C、HDL-C。而本研究結(jié)果表明 T2DM患者肥胖組的ApoB高于非肥胖組，二分類非條件Logistic回歸分析顯示，ApoB優(yōu)于TG、LDL-C等傳統(tǒng)的脂代謝指標(biāo)作為獨(dú)立危險(xiǎn)因素影響T2DM患者肥胖的發(fā)生，進(jìn)一步行偏相關(guān)分析顯示ApoB與BMI呈正相關(guān)。

SFRP5屬于分泌型卷曲相關(guān)蛋白家族，主要由白色脂肪組織分泌，含有一個(gè)卷曲樣的半胱氨酸富集區(qū)域(cysteine-rich domain，CRD)，此結(jié)構(gòu)域與Wnt的跨膜受體卷曲蛋白(Frizzled，F(xiàn)rz)的CRD具有高度的同源性。因此SFRP5可以競爭性結(jié)合Wnt信號(hào)通路胞外配體Wnt5a蛋白，進(jìn)而抑制了Wnt通路的作用，發(fā)揮負(fù)調(diào)控作用［10］。而Wnt5a可以通過非經(jīng)典Wnt信號(hào)通路，激活c-Jun氨基末端激酶(JNK)-l，損害胰島素受體底物－1(IRS-1)的活性，抑制巨噬細(xì)胞腫瘤壞死因子－α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6等炎性因子的釋放，從而減少胰島素信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)并促進(jìn)胰島素抵抗的發(fā)展。T2DM和肥胖均被認(rèn)為與慢性低度炎癥和胰島素抵抗密切相關(guān)，SFRP5和Wnt5a之間的平衡可以調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞和脂肪組織巨噬細(xì)胞中JNK-l的活性，進(jìn)而調(diào)節(jié)炎癥和代謝功能。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，剔除SFRP5基因的小鼠空腹血糖和胰島素水平更高，巨噬細(xì)胞聚集現(xiàn)象更嚴(yán)重［1］。Lv 等［11］研究發(fā)現(xiàn)，在體外用TNF-α及胰島素分別干預(yù)分化成熟的脂肪細(xì)胞后，其SFRP5表達(dá)和分泌水平較前均有不同程度的下降，而給予羅格列酮和二甲雙胍等胰島素增敏劑干預(yù)后，SFRP5的表達(dá)和分泌水平則上升，表明炎癥及高胰島素血癥均有抑制SFRP5表達(dá)和分泌的作用，且SFRP5的表達(dá)和分泌可能與胰島素抵抗相關(guān)。國內(nèi)學(xué)者研究亦發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組相比糖尿病大鼠胰島素抵抗及肝臟p-JNK水平升高，血SFRP5水平下降，而糖尿病大鼠經(jīng)二甲雙胍治療后胰島素抵抗明顯改善，肝臟p-JNK水平下降，SFRP5 水平升高［12］。Schulte 等［13］研究則發(fā)現(xiàn)肥胖患者給予低熱量飲食減輕體重后，引起了SFRP5水平的增加，伴有胰島素抵抗的改善。本研究表明與非肥胖T2DM患者相比，肥胖T2DM患者血清SFRP5水平明顯升高，伴有脂代謝紊亂及胰島素抵抗增加;Logistic回歸分析顯示血清SFRP5亦為T2DM患者肥胖發(fā)生的獨(dú)立影響因素，且校正WC、HC、TG等相關(guān)因素后，血清SFRP5水平仍與BMI呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。

總之，本研究提示肥胖型 T2DM患者血清SFRP5下降而 ApoB升高，血清SFRP5、ApoB均為T2DM患者肥胖發(fā)生的獨(dú)立影響因素，BMI與血清SFRP5呈負(fù)相關(guān)而與ApoB呈正相關(guān)。本研究提示血清SFRP5、ApoB在肥胖型2型糖尿病的發(fā)病機(jī)制中可能具有重要的作用，有可能作為肥胖型T2DM患者預(yù)防治療的新靶點(diǎn)，但血清SFRP5、ApoB通過哪些具體機(jī)制影響T2DM患者肥胖的發(fā)生尚有待進(jìn)一步的研究。

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