炮制時(shí)間對(duì)黃精多糖含量的影響

周小慧

（江蘇省中醫(yī)院藥劑科，南京210000）

炮制時(shí)間對(duì)黃精多糖含量的影響

周小慧

（江蘇省中醫(yī)院藥劑科，南京210000）

黃精來(lái)源于百合科黃精屬polygonatum m ill黃精［1］p.sibircum Red、滇黃精P.jingianum coll.et hemsl、多花黃精pcyrtonerna hua的干燥根莖，黃精屬藥用植物資源豐富，我國(guó)分布多達(dá)30余種。黃精為常用中藥，始載于《名醫(yī)別錄》：“味甘，平，無(wú)毒。主補(bǔ)中益氣，除風(fēng)濕，安五臟。久服輕身延年不饑”?，F(xiàn)代研究亦發(fā)現(xiàn)具有降低血脂、血糖以及延長(zhǎng)動(dòng)物壽命等作用［2］。黃精歷代生制兼用，但傳統(tǒng)認(rèn)為生用“刺人咽喉”，故多炮制后使用。通過(guò)炮制以達(dá)到減毒增效的作用。本文從黃精炮制歷史沿革以及對(duì)不同產(chǎn)地不同炮制時(shí)間對(duì)黃精含水量、外觀色澤、麻舌感（刺人咽喉）、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、多糖含量等指標(biāo)的測(cè)定，闡明黃精炮制機(jī)理，確定最佳蒸制工藝，進(jìn)一步研究其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考依據(jù)。

黃精；蒸制工藝；多糖

黃精為臨床常用補(bǔ)益藥，其性味甘平，有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾潤(rùn)肺及益腎等功效，主治肺燥干咳、體虛乏力、心悸氣短、久病津虧口干、糖尿病、高血壓等癥。傳統(tǒng)認(rèn)為黃精生品能夠刺激咽喉，臨床多用炮制品。現(xiàn)代黃精的炮制方法主要用蒸法，本文通過(guò)對(duì)不同產(chǎn)地、不同炮制時(shí)間對(duì)黃精含水量、外觀色澤、麻舌感（刺人咽喉）、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、多糖含量等指標(biāo)的測(cè)定，闡明黃精炮制機(jī)理，確定最佳炮制工藝，為進(jìn)一步研究其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料原料：黃精（產(chǎn)地，批號(hào)：嵩山，2012-03-21；老山，2012-03-21；茅山，2012-04-05；浙江，2012-04-08）經(jīng)常州市中醫(yī)院藥劑科鑒定為百合科黃精［3］。

實(shí)驗(yàn)儀器：LDZX-40BI型立式自動(dòng)電熱壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠），微型植物試樣粉碎機(jī)（河北省黃驊市新興電器廠），DHG-9146A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司），732紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海分析儀器廠），METLERAE240電子分析天平（瑞士）。

葡萄糖對(duì)照品（批號(hào)：111124，天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心），蒸餾水（實(shí)驗(yàn)室自制）、乙醇（南京化學(xué)試劑廠，95%）、無(wú)水乙醇（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、丙酮（南京化學(xué)試劑廠）、蒽酮（上?；瘜W(xué)試劑有限公司）、濃硫酸（上?；瘜W(xué)試劑有限公司），試劑均為分析純［4］。

1.2 研究方法

1.2.1 不同產(chǎn)地黃精鮮品理化指標(biāo)的研究

1.2.1.1 不同產(chǎn)地黃精鮮品含水量測(cè)定［5］取不同產(chǎn)地鮮品2～5 g平鋪于干燥至恒重的扁形稱瓶中，厚度不超過(guò)5mm疏松供試品不超過(guò)10 mm，精密稱定，打開(kāi)瓶蓋在100～105℃干燥5小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時(shí)，冷卻，稱量，至連續(xù)2次稱量的差異不超過(guò)5 mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品的含水量（%）。

表1 不同產(chǎn)地黃精鮮品的含水量（n=3）

由表1結(jié)果可知，不同產(chǎn)地黃精鮮品其含水量略有差異，其中產(chǎn)自浙江天目山的含水量最大。

1.2.1.2 不同產(chǎn)地黃精鮮品外觀色澤和麻舌感（刺人咽喉）采用目視法和口嘗記錄炮制過(guò)程中樣品的外觀顏色變化和麻舌感的變化［6］。

表2 不同產(chǎn)地不同炮制黃精的外觀色澤和麻舌感［7］

由表2知，不同產(chǎn)地黃精鮮品的外觀色澤與口感有所差異。

1.2.1.3 不同產(chǎn)地黃精醇溶性浸出物［8］取不同產(chǎn)地黃精干燥品約2～4 g，精密稱定，置100～250 m l的錐形瓶中，精密加入稀乙醇50～100m l塞緊，稱定重量，靜置1 h，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h，放冷后，取下錐形瓶，密塞，稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過(guò)。精密量取濾液25 ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，移至干燥器中，冷卻0.5 h，迅速精密稱定重量，除另有規(guī)定外，以干燥品計(jì)算不同產(chǎn)地黃精樣品中醇溶性浸出物的含量（%）。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 不同產(chǎn)地黃精鮮品醇溶性浸出物含量（n=1）

由表3可知，不同產(chǎn)地的黃精醇溶性浸出物含量各有差異，其中老山的浸出物含量最高［9］。

1.2.1.4 不同產(chǎn)地黃精鮮品多糖含量測(cè)定1）對(duì)照品溶液的制備：取105℃烘干至恒重的葡萄糖對(duì)照品約100 mg，精密稱定，置100m l容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。2）蒽酮-硫酸試液的配制：稱取0.33 g蒽酮，加100 mL硫酸，置于棕色瓶中，混合搖勻置于冰箱中（現(xiàn)配現(xiàn)用）。3）樣品溶液的制備：分別稱取低溫干燥（60℃）的不同產(chǎn)地黃精5 g，每次加50m l蒸餾水煮沸提取，共3次，合并提取液，濃縮至約20 ml，加4倍量無(wú)水乙醇沉淀，離心（3000 rpm10 min），沉淀用乙醇洗2次，轉(zhuǎn)移沉淀并定容于50 m l容量瓶中，取0.5m l稀釋至100 ml，得樣品溶液。4）最大波長(zhǎng)的選擇：分別取對(duì)照品和樣品溶液各1 m l于具塞試管中，置冷水浴中，迅速加入新配制的0.2%蒽酮-硫酸溶液4.0 m l，搖勻，沸水浴10 min，取出，迅速冷卻至室溫，另取1m l蒸餾水同法操作做參比，采用TU-1800紫外分光光度計(jì)，在波長(zhǎng)400～800 nm掃描，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均在620 nm處有最大吸收。5）線性關(guān)系考察：精密吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0m l貯備液，分別置10 ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得系列對(duì)照品溶液。分別精密吸取1.0 m l系列對(duì)照品溶液置10 ml具塞試管中，加入0.2%蒽酮-硫酸試劑4.0 ml，搖勻后迅速浸入冰水浴中冷卻，各管加畢后，一起浸入沸水浴中，管口加塞，待水浴重新沸騰后反應(yīng)10min，取出試管浸入冰水中冷卻，室溫放置10 min，按分光光度法，在620 nm處測(cè)定吸光度，以含量C（μg/m l）對(duì)應(yīng)吸光度A回歸，其回歸方程為A=6.4709C+ 0.0427，r2=0.999。6）精密度試驗(yàn)：取樣品溶液（河南嵩山）1 ml于具塞試管中，一式6份，按1.2.1.4的（4）項(xiàng)下方法操作，在620 nm處測(cè)定吸收度，計(jì)算，得嵩山產(chǎn)黃精中多糖平均含量為11.38%RSD=0.6%。7）回收率試驗(yàn)：分別取對(duì)照品溶取0.1，0.2，0.4 m l，各加入樣品溶液（河南嵩山產(chǎn)）0.2，0.3，0.5 m l，每個(gè)濃度平行做3份，按1.2.1.4的（4）項(xiàng)下方法操作，在620 nm處測(cè)定吸收度，計(jì)算，得低、中、高濃度（5.62，9.46，17.14μg·ml-1）平均回收率分別為98.6%（RSD=1.1%）、101.0%（RSD=0.7%）、100.4%（RSD= 1.0%）。8）樣品的測(cè)定：分別取樣品溶液（不同產(chǎn)地）各1 ml，每個(gè)樣品3份，在620 nm處測(cè)定吸收度，計(jì)算。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 樣品含量測(cè)定（n=3）

1.2.2 蒸制時(shí)間對(duì)不同產(chǎn)地黃精理化指標(biāo)影響［10］

1.2.2.1 蒸制時(shí)間對(duì)不同產(chǎn)地黃精外觀色澤和麻舌感的影響（刺人咽喉）采用目視法和口嘗記錄炮制過(guò)程中樣品的外觀顏色變化和麻舌感的變化。結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 不同產(chǎn)地不同炮制黃精的外觀色澤和麻舌感

由5表知，不同產(chǎn)地黃精鮮品的外觀色澤與口感有所差異，隨著蒸制時(shí)間的變化，顏色略有變深，口感變甜，原先的刺咽喉感有所減輕。

1.2.2.2 蒸制時(shí)間對(duì)不同產(chǎn)地黃精醇溶性浸出物的影響［11］按“1.2.1.3”法測(cè)定不同蒸制時(shí)間下黃精醇溶性浸出物含量，蒸制后的黃精在干燥后再實(shí)驗(yàn)。

表6 不同蒸制時(shí)間對(duì)黃精醇溶性浸出物含量的影響（n=1）

續(xù)表6不同蒸制時(shí)間對(duì)黃精醇溶性浸出物含量的影響（n=1）

圖1 不同蒸制時(shí)間對(duì)黃精醇溶性浸出物含量的影響（n=3）

1.2.2.3 蒸制時(shí)間對(duì)黃精多糖含量的影響［12］參照“1.2.1.4”項(xiàng)下建立的黃精多糖含量測(cè)定方法，測(cè)定不同蒸制時(shí)間對(duì)黃精多糖含量的影響，結(jié)果如表7。

表7 蒸制時(shí)間對(duì)黃精多糖含量的影響（n=3）

續(xù)表7蒸制時(shí)間對(duì)黃精多糖含量的影響（n=3）

圖2 不同產(chǎn)地不同炮制時(shí)間黃精多糖含量的測(cè)定（n=3）

3 討論

多糖作為黃精中主要活性成分之一，有必要對(duì)其含量進(jìn)行研究。用沸水提取黃精多糖，然后用硫酸蒽酮比色法測(cè)定其含量，方法簡(jiǎn)便可行，結(jié)果準(zhǔn)確，精密度好。不足之處是硫酸蒽酮比色法僅能測(cè)定多糖的總含量，不能對(duì)多糖各組分構(gòu)成情況進(jìn)行具體分析，進(jìn)一步研究需借助HPLC分析來(lái)完成。

蒸制黃精樣品，從多糖含量測(cè)定結(jié)果可以看出，隨著蒸制時(shí)間的延長(zhǎng)，多糖含量有增加趨勢(shì)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明黃精中多糖含量與蒸制時(shí)間成正比。黃精的炮制破壞了其黏液質(zhì)，從而可以解釋炮制后的黃精刺激咽喉感有所減輕的原因。

近年來(lái)雖對(duì)黃精進(jìn)行了大量研究［13］，制定了一些客觀性指標(biāo)，然而根據(jù)有效成分以及刺激性成分，采用科學(xué)內(nèi)涵和質(zhì)量控制指標(biāo)尚有待進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)和制定。對(duì)黃精炮制增效減毒的機(jī)制仍然有待于進(jìn)一步研究。

［1］曹明菊，鄭曉燕，陳麗華.黃精多糖的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)食品添加劑，2008，（4）:52-55.

［2］車勇，王憲冉，夏作理.黃精的現(xiàn)代研究進(jìn)展［J］.社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志，2004，2（6）: 34-35.

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［13］甄漢深.黃精炮制歷史沿革的研究［J］.中成藥，1989，11（7）:19-20.

Effect o f Processing Tim e on the Conten t o f Po lysaccharide o f Polygonatum

ZHOU Xiaohui
（Department of Pharmacy，Jiangsu ProvincialHospital of TraditionalChineseMedicine，Nanjing210000，China）

Polygenetic mill，P.sibircum Red，P.jingianum coll.et hemsl and Polygenetic pcyrtonerna hua dry root are all from Liliaceous Polygenetic.There are asmany as 30 kinds of Polygenetic resources of medicinal plants distributing in our country.Polygonatum is a commonly traditional Chinesemedicine，only contained in the MingyiBielu:"sweet，flat，non-toxic，benefit，it could not only get rid of rheumatism butalso comfort five organs".Polygonatum can be used both in row and steaming，but the traditional view thought the raw was"prickly throat"，so of ten steamed them before use.Attached by concocting can achieve synergy effect.This article summarized Polygenetic fabricated history and the differenthabitats of different processing time on the precisemoisture content，appearance and color，test（stinging throat），water-soluble extract，alcohol-soluble extract，polysaccharide contentand other indicators of the determination，to clarify processingmechanism and determine the optimal steaming process，and further studywould provide referencematerialbase for efficacy.

Polygonatum；steaming technology；polysaccharide

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.11.075

1672-2779（2015）-11-0147-04

：張文娟本文校對(duì)：陳麗

2015-04-29）