益母草堿對(duì)梗死后心衰大鼠的實(shí)驗(yàn)研究※

徐玉平 錢海兵

（1凱里學(xué)院化學(xué)與材料工程學(xué)院，凱里556011；2貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，貴陽(yáng)550002）

益母草堿對(duì)梗死后心衰大鼠的實(shí)驗(yàn)研究※

徐玉平1，2錢海兵2*

（1凱里學(xué)院化學(xué)與材料工程學(xué)院，凱里556011；2貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，貴陽(yáng)550002）

目的研究益母草堿對(duì)心衰后左心室結(jié)構(gòu)及心功能的影響。方法采用冠狀動(dòng)脈結(jié)扎法制備長(zhǎng)期心梗致心衰模型。雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組：假手術(shù)組，模型組，益母草堿高、低劑量組（30mg·kg-1·d-1、15mg·kg-1·d-1）和卡托普利陽(yáng)性對(duì)照組（30 mg·kg-1·d-1）。灌胃給藥6周后，行心臟超聲學(xué)檢查EF、FS、LVPW和LVAW等指標(biāo)，觀察心功能改變，計(jì)算心重指數(shù)和肺重指數(shù)。結(jié)果益母草堿高劑量能明顯降低HW、LungW eight、Lung W eight/BW，與心衰模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論益母草堿通過降低心重、肺重及肺重指數(shù)以減輕心衰大鼠的心臟肥大和肺淤血，對(duì)心衰后的心功能有一定保護(hù)作用。

益母草堿；慢性心力衰竭；心功能；左心室結(jié)構(gòu)；實(shí)驗(yàn)研究；大鼠

益母草堿為益母草的主要有效成分之一，具有保護(hù)腦缺血、保護(hù)心肌缺血、保肝等藥理作用［1-2］。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，益母草堿對(duì)急性心肌梗死造成的心肌缺血和心肌細(xì)胞損害具有良好的預(yù)防性保護(hù)作用，但并未對(duì)長(zhǎng)期梗死所致的心衰作用以及作用機(jī)制進(jìn)行研究，因此，本研究將在前期研究的基礎(chǔ)上，采用整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，觀察益母草堿對(duì)心衰大鼠左心室結(jié)構(gòu)及心功能的影響，并初步探討其改善梗死后心衰的作用機(jī)制。本研究的完成將為益母草堿在心血管疾病方面的進(jìn)一步開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試藥與動(dòng)物卡托普利片（中美上海施貴寶制藥有限公司）；益母草堿（復(fù)旦大學(xué)提供純度大于98%）。雄性SPF級(jí)SD大鼠，體重180～220 g，由復(fù)旦大學(xué)藥學(xué)院動(dòng)物中心提供。（證書編號(hào):2008001616687）。

1.2 儀器小動(dòng)物呼吸機(jī)（DHX-I50成都儀器廠）；臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)（306110700 Thermo）；全套手術(shù)器械（醫(yī)用縫合針線、氣管插管、開胸器等）。

1.3 方法

1.3.1 大鼠心梗致心衰模型制備，參照Z(yǔ)hu［3］等方法雄性SD大鼠，180～220 g，7%水合氯醛（0.5 m l/100 g）腹腔麻醉動(dòng)物后，用膠圈將大鼠四肢仰面固定于手術(shù)臺(tái)，接小動(dòng)物呼吸機(jī)，氣管插管。自左側(cè)3～4肋間隙逐層打開胸腔，6～0號(hào)絲線于左心耳下方約2～3 mm處永久性結(jié)扎冠脈左前降支，結(jié)扎后如見心尖變白、左心室壁被動(dòng)跳動(dòng)，心臟出現(xiàn)因缺血而致的顏色改變認(rèn)為手術(shù)成功。在此模型成功的基礎(chǔ)上，不做任何其它操作，自然、常規(guī)飼養(yǎng)6周，存活下來(lái)的動(dòng)物采用超聲心動(dòng)圖檢測(cè)，證明為梗死后心衰模型成功的用在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥冠脈結(jié)扎48 h后存活下來(lái)的大鼠，隨機(jī)分為以下5組：1）心衰模型組（CHF）；2）益母草堿高劑量組（leonurine 30 mg·（kg·d）-1）；3）益母草堿低劑量組（leonurine 15 mg·（kg·d）-1；4）陽(yáng)性藥卡托普利組（Captopril 30 mg·（kg·d）-1；5）假手術(shù)組（sham）。術(shù)后各自進(jìn)行藥物干預(yù)，除心衰模型組和假手術(shù)組給予生理鹽水外，其余各組按相應(yīng)劑量灌胃給藥，每日一次，連續(xù)6周。

1.3.3 一般情況觀察每隔兩天稱一次體重，記錄下數(shù)據(jù)，連續(xù)3天腹腔注射青霉素以防傷口感染死亡，同時(shí)注意觀察大鼠的行動(dòng)、毛發(fā)，進(jìn)食和飲水量以及精神狀態(tài)，有無(wú)死亡等情況。

1.3.4 心臟超聲檢查藥物干預(yù)6周后，1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉動(dòng)物，超聲心動(dòng)圖檢測(cè)心衰大鼠LVPW、LVAW、EF及FS等指標(biāo)。

1.3.5 心重指數(shù)及肺重比測(cè)定處死大鼠后，迅速取出心臟，生理鹽水清洗，濾紙吸干，天秤稱量全心重（HW）、肺重（Lung Weight），計(jì)算心重指數(shù)［全心重/體重（HW/BW）］和肺重比（LungWeight/BW）。

1.3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。所有數(shù)據(jù)用（x±s）表示。

2 結(jié)果

2.1 一般情況觀察心衰模型制備成功后，各組大鼠出現(xiàn)心悸氣喘、水腫、呼吸微弱、四肢爪甲紫黯、毛色無(wú)光等癥狀，與臨床充血性心力衰竭的癥狀相似。藥物干預(yù)治療6周后，給藥組上述癥狀較心衰模型組有改善，而單純手術(shù)組總體上有加重趨勢(shì)。

2.2 益母草堿對(duì)心衰大鼠心功能的影響與假手術(shù)組相比，冠脈結(jié)扎后6周模型組LVPW、LVAW、EF、FS等指標(biāo)顯著降低（P＜0.05），提示心衰后大鼠心室壁拉長(zhǎng)、變薄、左心收縮功能受損，藥物干預(yù)后各指標(biāo)沒有明顯變化，說明益母草堿以及陽(yáng)性藥卡托普利均很難改善長(zhǎng)期心梗所致心衰后大鼠的心臟結(jié)構(gòu)和功能。結(jié)果見圖1、表1。

圖1 各組大鼠心超圖片比較

表1 各組大鼠超聲心動(dòng)圖檢測(cè)指標(biāo)（x±s）

2.3 益母草堿對(duì)心衰大鼠肺淤血的影響結(jié)果表明，冠脈結(jié)扎6周后，各組間大鼠體重并無(wú)明顯變化。而心衰組心重指數(shù)與假手術(shù)組比較顯著上升。這個(gè)上升趨勢(shì)在急性期可能與心肌梗死后引發(fā)的炎癥和水腫有關(guān)，而在慢性期則可能是心臟發(fā)生肥大和擴(kuò)張有關(guān)，而益母草堿雖然沒有明顯降低該指數(shù)但卻顯著降低了全心重量（P＜0.05）。心衰組肺重相對(duì)假手術(shù)組明顯升高，這可能與心衰后引起肺淤血有關(guān)，益母草堿30mg/kg明顯減輕肺淤血和降低肺重指數(shù)。結(jié)果見表2。

表2 各組大鼠心重指數(shù)和肺重比（x±s）

3 討論

心室重構(gòu)是心力衰竭最重要的特征之一，它不僅會(huì)導(dǎo)致心衰的發(fā)生，并在很大程度上增加了心力衰竭的致殘率和死亡率。心室重塑發(fā)生后，機(jī)體的病理生理過程也隨之改變，其中尤為重要的表現(xiàn)是心室重量和心室容量的增加，以及心室結(jié)構(gòu)的改變，但是心臟肥厚的代償功能不可能持久，因此心肌的受損程度難逃進(jìn)一步惡化的命運(yùn)，隨著持續(xù)時(shí)間的不斷延長(zhǎng)，最終導(dǎo)致左室整體功能下降［4］。本研究使用超聲心動(dòng)圖檢測(cè)心衰大鼠左心室結(jié)構(gòu)和心功能，其中射血分?jǐn)?shù)（EF）和左室短軸縮短率（FS）是評(píng)價(jià)左心室收縮功能的指標(biāo)參數(shù)，F(xiàn)S≤25%為異常，EF≤40%被認(rèn)為是心力衰竭的客觀依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示冠脈結(jié)扎6周后心衰大鼠心室壁拉長(zhǎng)、變薄、左心收縮功能受損，益母草堿干預(yù)治療后各指標(biāo)沒有明顯變化，表明心衰后藥物對(duì)心衰的治療并不能恢復(fù)心臟結(jié)構(gòu)及功能，因而在臨床上我們應(yīng)該把改善心功能和預(yù)防心室重構(gòu)作為治療慢性心衰的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。同時(shí)由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，心衰模型組大鼠心重指數(shù)較假手術(shù)組顯著上升，這個(gè)上升趨勢(shì)在急性期可能與心肌梗死后引發(fā)的炎癥和水腫有關(guān)，而在慢性期則可能是心臟發(fā)生肥大和擴(kuò)張有關(guān)，益母草堿雖然沒有明顯降低該指數(shù)但卻顯著降低了全心重量和肺重指數(shù)，提示益母草堿能明顯減輕水腫和肺淤血，對(duì)心衰后的心功能有一定保護(hù)作用，其具體作用機(jī)制值得深入研究。

［1］阮金蘭，杜俊榮，曾慶忠，等.益母草的化學(xué)藥理和臨床研究進(jìn)展［J］.中草藥2003，34（11）:15-18．

［2］趙彩霞，蔡長(zhǎng)春，張?jiān)銮桑?益母草的藥理作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.臨床誤診雜志，2011，24（2）:82-84.

［3］Zhu YZ，Zhu YC，LIJ，et al.Effects of losartan on haemodynamic Parameters and angiotensin receptormRNA levels in ratheartaftermyocardial Infarction［J］. JRenin Angiotensin AldosteroneSyst2000l（3）:257-262.

［4］Cutler MJ，Rosenbaum DSDunlap ME.Structural and electrical remodeling as therapeutic targets inheart failure［J］.JElectrocardiol200740（6Suppl）:S1-7.

Experim en ta l Stud y o f Leonu rine on Rats w ith Heart Failu re after M yo card ial In farction

XU Yuping1，2，QIANHaibing2
（1.School of ChemistryandMaterialsEngineering，KailiUniversity，Guizhou，Kaili556011，China；2.School of BasicMedicalSciences，GuiyangCollege of TraditionalChineseMedicine，Guiyang550002，China）

Ob jective To study the effects of leonurine on left ventricular structure and cardiac function after heart failure.M ethods Establishing themodel of ratswith heart failure by ligation of the left anterior descending coronary artery.Male SD ratswere randomly divided into five groups:sham operated control group，modelgroup，leonurine high-dose group（30mg·kg-1·d-1），leonurine low-dose group（15mg·kg-1·d-1），and captopril positive control group（30 mg·kg-1·d-1）.Drugs were chronically administered to animals for 6 weeks，E－chocardiography，EF，F(xiàn)S，LVPW and LVAW index were checked，heart function was observed，and heartweight index and pulmonary weight index were calculated.Results The leonurine（30 mg·kg-1·d-1）can significantly declined HW，Lung Weight and Lung Weight/ BW，comparing withmodel group，the difference was statistically significant（P＜0.05）.Conclusion The leonurine had certain protective effect on heart failure after cardiac function，and it can alleviate cardiac hypertrophy and pulmonary congestion of rats with heart failure by reducing HW，LungWeight and LungWeight/BW.

leonurine；chronic heart failure；heart function；left ventricular structure；experimental research；rat

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.11.073

1672-2779（2015）-11-0144-02

：張文娟本文校對(duì)：戴貴東

2015-04-17）

貴州省國(guó)際科技合作項(xiàng)目（No：黔科合外G字［2010］7012）

*通訊作者：279753407@qq.com