雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定雷貝拉唑鈉腸溶片含量

雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定雷貝拉唑鈉腸溶片含量

徐花榮1，楊世霆2，次麗倩3，趙芝菁3

1.上海信誼天平藥業(yè)有限公司(上海，201108)

2.上海信誼嘉華藥業(yè)公司(上海，201815)

3.上海理工大學(xué) 醫(yī)療器械與食品學(xué)院(上海，200093)

【摘要】應(yīng)用雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定雷貝拉唑鈉腸溶片中雷貝拉唑鈉的含量。以磷酸鹽緩沖液為溶劑，在波長(zhǎng)290 nm、360 nm處進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得雷貝拉唑鈉的線性范圍是0.200 2～1.801 mg/mL，相關(guān)系數(shù)為0.999 7。雷貝拉唑鈉的回收率為99.7%～100.4%，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.218%。

【關(guān)鍵詞】雙波長(zhǎng)；分光光度法；雷貝拉唑鈉；腸溶片

doi:10.3969/j.issn.1674-1242.2015.02.008

作者簡(jiǎn)介：徐花榮, E-mail: 1851923773@qq.com

【中圖分類號(hào)】O657.32

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

文章編號(hào)：1674-1242(2015)02-0095-04

Abstract【】 Dual wavelength spectrophotometry is used for the determination of rabeprazole sodium in rabeprazole sodium enteric-coated tablets. The solvent is phosphate buffer and the determine wavelength is 290 nm and 360 nm, respectively. The linear calibration curve of rabeprazole sodium ranges 0.200 2～1.801 mg/mL, and the correlation coefficients is 0.999 7. The recovery of rabeprazole sodium was 99.7%～100.4% and RSD is 0.218%.

收稿日期：(2105-01-15)

Determination of Rabeprazole Sodium Enteric-coated

Tablets by Dual Wavelength Spectrophotometry

XU Huarong1，YANG Shiting2，CI Liqian3，ZHAO Zhijing3

1. Shanghai Sine Tianping Pharmaceutical Co.Ltd( Shanghai，201108)

2. Shanghai Sine Jiahua Pharmaceutical Co.Ltd( Shanghai，201815)

3. School of Medical Instrument and Food Engineering,

University of Shanghai for Science and Technology(Shanghai，200093)

【Key words】 dual wavelength, spectrophotometry, rabeprazole rodium, enteric-coated tablets

雷貝拉唑鈉腸溶片，主要成分為雷貝拉唑鈉，其化學(xué)名為2-{4-(3-甲氧基丙氧基)-3-甲基吡啶-2-基甲亞磺?；鶀-1H-苯并咪唑鈉。適用于治療活動(dòng)性十二指腸潰瘍；良性活動(dòng)性胃潰瘍；伴有臨床癥狀的侵蝕性或潰瘍性的胃-食管返流征(GORD)；與適當(dāng)?shù)目股睾嫌?，可根治幽門螺旋桿菌陽性的十二指腸潰瘍；侵蝕性或潰瘍性胃-食管返流征的維持期治療。雷貝拉唑鈉的測(cè)定方法有紫外分光光度法、比色法、高效液相色譜法等[1]，但運(yùn)用雙波長(zhǎng)方法測(cè)量雷貝拉唑鈉目前未見文獻(xiàn)報(bào)道。雙波長(zhǎng)分光光度法通過測(cè)定參比波長(zhǎng)處和測(cè)定波長(zhǎng)處的吸光度的差值進(jìn)行定量，由于僅用一個(gè)吸收池，且用試液本身作參比液，因此，可消除吸收池及參比液所引起的誤差，在一定程度上克服了單波長(zhǎng)的局限性，擴(kuò)展了分光光度法的應(yīng)用范圍。

雷貝拉唑鈉藥物本身在290 nm處有極好吸收，但是其輔料在290 nm處也有小量吸收，因此單一使用290 nm作為其含量測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)，會(huì)有一定的誤差存在。經(jīng)過全波長(zhǎng)掃描發(fā)現(xiàn)，輔料在360 nm存在穩(wěn)定吸收，因此選擇290 nm和360 nm雙波長(zhǎng)，作為雷貝拉唑鈉腸溶片雙波長(zhǎng)檢測(cè)的波長(zhǎng)檢測(cè)其含量，消除輔料的影響。該方法簡(jiǎn)便可靠，重現(xiàn)性良好，測(cè)定結(jié)果滿足標(biāo)準(zhǔn)要求[2]。

1　實(shí)驗(yàn)材料

1.1試劑

磷酸鹽緩沖液(pH=6.8)；雷貝拉唑鈉對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，純度99.8%);雷貝拉唑鈉腸溶片(自制，批次20141109，20141201，20141215，標(biāo)示量10%)；蒸餾水(雀巢)。

1.2儀器

紫外分光光度計(jì)(型號(hào)UV-5300，上海元析儀器有限公司)；分析天平(BS224S，賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)；酸度計(jì)(PHS-3B，上海精科儀器有限公司)；超聲波清洗儀(KQ3200，上海精密儀器儀表有限公司)；純化水儀(ESW-I-1，Millipore)。

2　實(shí)驗(yàn)方法

2.1溶液配制

(1)磷酸鹽緩沖液(pH=6.8)：取磷酸氫二鉀13.6 g，加水溶解并稀釋到2 000 mL，用氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8，搖勻作為溶媒待用。

(2)雷貝拉唑鈉對(duì)照品溶液：分別精密稱取雷貝拉唑鈉對(duì)照品約10 mg，置于10 mL容量瓶中，以pH =6.8的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻作為儲(chǔ)備液。精密量取儲(chǔ)備液1.00 mL，置于10 mL容量瓶中，以pH =6.8的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻作為對(duì)照品溶液。

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

取雷貝對(duì)照品適量，加入緩沖液制成每1 mL溶液中含有雷貝拉唑鈉100 μg的溶液；同時(shí)按照處方比例配制包衣粉溶液，照分光光度法(中國(guó)藥典2005年版二部附錄IV A)測(cè)定，在190 nm～600 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)對(duì)兩份樣品進(jìn)行紫外全掃描。掃描結(jié)果如圖1和圖2。

圖1雷貝拉唑鈉紫外全波長(zhǎng)掃描

Fig.1UV wavelength scanning for rabeprazole sodium

圖2　包衣粉紫外全波長(zhǎng)掃描

由圖1可見，本品在215 nm，290 nm波長(zhǎng)有最大吸收，215 nm屬于邊緣吸收，會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響，故我們選擇290 nm作為含量測(cè)定的波長(zhǎng)，350 nm后無吸收；而包衣粉在300 nm后有穩(wěn)定吸收(見圖2)，因此選擇290 nm與360 nm作為雙波長(zhǎng)測(cè)量波長(zhǎng)。經(jīng)過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，輔料包衣粉在360 nm和290 nm處吸光度比值為0.65，則在測(cè)定樣品含量時(shí)，以360 nm為參比波長(zhǎng)，290 nm為測(cè)定波長(zhǎng)，同時(shí)測(cè)定，令△A=A290-0.65*A360為定量信息來測(cè)定樣品中雷貝拉唑鈉的含量。采用此雙波長(zhǎng)測(cè)定雷貝拉唑鈉的含量能有效的排除包衣粉對(duì)其的干擾，結(jié)果更準(zhǔn)確。

2.3方法對(duì)比

取雷貝拉唑鈉樣品一片于10 mL容量瓶中，加入pH6.8緩沖液稀釋定容至刻度，取其中1 mL至10 mL容量瓶中，定容至刻度，作為樣品溶液(n=3)。同時(shí)取雷貝對(duì)照品儲(chǔ)備液1 mL至10 mL，定容至刻度，做為標(biāo)準(zhǔn)溶液。同時(shí)采用雙波長(zhǎng)法和單波長(zhǎng)法進(jìn)行測(cè)定，對(duì)測(cè)得含量進(jìn)行對(duì)比(以標(biāo)示量為準(zhǔn))，測(cè)定結(jié)果如表1。

表1　雙波長(zhǎng)與單波長(zhǎng)法測(cè)定結(jié)果比較

由表1可見，由于包衣粉存在紫外吸收，雙波長(zhǎng)掃描的測(cè)定結(jié)果更接近真實(shí)值，且平行實(shí)驗(yàn)RSD值更小，方法準(zhǔn)確度更高。實(shí)際檢測(cè)中，由于包衣粉的用量無法測(cè)定，無法扣除由其帶來的吸光度，所以雙波長(zhǎng)測(cè)定更有使用價(jià)值。

2.4雙波長(zhǎng)測(cè)定法方法學(xué)驗(yàn)證

2.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密稱取雷貝拉唑鈉對(duì)照品0.100 2 g，置50 mL量瓶中，加混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為儲(chǔ)備溶液；分別精密量取儲(chǔ)備溶液1、3、5、7、9 mL，置10 mL量瓶中，再加混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，掃描雙波長(zhǎng)，記錄吸光度，以濃度(C)為橫坐標(biāo)，雷貝拉唑吸光度(△A)為縱坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：△A=0.4928c-0.0605，相關(guān)系數(shù)r2=0.999 7。應(yīng)與結(jié)果見表2、圖3。

表2　線性測(cè)定結(jié)果

圖3標(biāo)準(zhǔn)曲線

Fig.3Standard curve

2.4.2精密度試驗(yàn)

取雷貝拉唑鈉對(duì)照品儲(chǔ)備液4 mL至10 mL容量瓶中，定容至刻度后進(jìn)行連續(xù)測(cè)定，結(jié)果見表3。

表3　精密度試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，連續(xù)測(cè)定6次，測(cè)定結(jié)果RSD值為0.741，符合要求，說明該檢測(cè)方法精密度良好。

2.4.3輔料干擾實(shí)驗(yàn)

制備含雷貝拉唑鈉濃度相同( 0.1 mg /mL)，而包衣粉濃度按照處方量的80%，100%，120%各有不同的樣品溶液，按照雙波長(zhǎng)法測(cè)定吸光度并計(jì)算△A ，檢測(cè)結(jié)果如表4所示。

表4　輔料干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由表4可知，加入不同量的包衣粉，回收率良好，說明包衣粉對(duì)雷貝拉唑鈉的測(cè)定并沒有干擾，說明該方法可以很好地避免輔料干擾，用于測(cè)定雷貝含量，具有一定的可靠性。

2.4.4穩(wěn)定性試驗(yàn)

取雷貝拉唑鈉對(duì)照品溶液于室溫下放置0、2、4、6、8、10、12 h后，分別進(jìn)行測(cè)定，記錄吸光度值變化，結(jié)果見表5。

表5　雷貝拉唑鈉溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明：雷貝拉唑鈉對(duì)照品溶液于室溫放置12 h，吸光度值未發(fā)生顯著變化，12 h內(nèi)吸光度值RSD值為0.553%，符合要求。

2.4.5回收率試驗(yàn)

分別取已知含量雷貝拉唑鈉的對(duì)照品，取處方量的80%、100%、120%，置100 mL量瓶中，加入處方量100%的輔料，加混合溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾，分別測(cè)定。計(jì)算回收率。測(cè)定結(jié)果見表6。

表6　雷貝拉唑鈉回收率結(jié)果

結(jié)果表明：雷貝拉唑鈉在輔料溶液中的回收率在99.7～100.4%之間，RSD為0.218%，回收率良好，符合測(cè)定要求。

2.4.6重復(fù)性試驗(yàn)

取雷貝拉唑鈉樣品一片于10 mL容量瓶中，加入PH6.8緩沖液稀釋定容至刻度，取其中1 mL至10 mL容量瓶中，定容至刻度，作為樣品溶液(n=6)。同時(shí)取雷貝對(duì)照品儲(chǔ)備液1 mL至10 mL，定容至刻度，做為標(biāo)準(zhǔn)溶液。采用雙波長(zhǎng)法測(cè)樣品中雷貝含量，測(cè)定結(jié)果見表7。

表7　含量測(cè)定重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明：采用雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定樣品含量，6份樣品測(cè)定結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.0%，說明該方法重復(fù)性好，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

2.5三批樣品的含量測(cè)定

精密稱取裝量差異下三批自制樣品的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于雷貝拉唑50 mg)，置50 mL量瓶中，加混合溶劑，超聲溶解，定容，放冷至室溫，精密量取5 mL置50 mL容量瓶中，用混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，測(cè)定，記錄吸光度；另取雷貝拉唑鈉對(duì)照品適量，精密稱定，加混合溶劑稀釋并制成0.1 mg/ml的對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以吸光度計(jì)算出供試品中雷貝拉唑鈉的含量，結(jié)果見表8。

表8　雷貝拉唑鈉含量測(cè)定結(jié)果

3　結(jié)果討論

參考文獻(xiàn)綜上所述，參考《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄規(guī)定的檢測(cè)方法`([3])及相關(guān)的，根據(jù)雷貝拉唑鈉原料性質(zhì)、口服制劑的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及注射劑制劑通則，采用雙波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定雷貝拉唑鈉腸溶片含量。通過驗(yàn)證，該分析方法準(zhǔn)確、可靠、方便、快捷，在0.200 4～1.803 6 mg/mL范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 7。雷貝拉唑鈉的回收率為99.7～100.4%，測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.218%。

同樣本法亦可以適用于雷貝拉唑鈉腸溶片釋放度的測(cè)量，相比于部頒標(biāo)準(zhǔn)采用的高效液相色譜法，同樣能夠達(dá)到準(zhǔn)確、可靠、方便、快捷的要求，本法對(duì)于設(shè)備要求簡(jiǎn)單，尤其適合于生產(chǎn)廠家在產(chǎn)品留樣考察時(shí)大批實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的測(cè)量。

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